甘蓝型油菜二酰甘油酰基转移酶（BnDGAT3）基因克隆与表达研究

发布时间：2024-12-22 03:22

　　在Kennedy途径中,甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAT)、溶血磷脂酸酰基转移酶(LPAT)以及二酰甘油酰基转移酶(DGAT)依次将脂肪酸组装到甘油上,形成三酰甘油。DGAT是Kennedy途径中仅有的限速酶,在不同器官如叶片、花瓣、果实、花粉囊以及发育的种子等中广泛存在,且在发育的种子和花瓣中的活性较高。但是对于油菜DGAT基因家族的研究很少,尤其是尚未见关于BnDGAT3基因的报道。本研究以高、低含油量两个甘蓝型油菜品系为背景,通过同源比对,在油菜数据库共发现6个同源片段,分别定位在A08和C08染色体上,其中A亚染色体上有4个,分别命名为:BnDGAT3a、BnDGAT3ax1、BnDGAT3ax2、BnDGAT3ax3,C亚染色体组上有2个,分别命名为:Bn DGAT3c-1、BnDGAT3c-2。通过同源克隆,本研究得到了一条A08染色体上长为1071bp的完整CDS,该基因共编码356个氨基酸。通过对氨基酸序列进行理化性质分析可知:该蛋白为稳定性蛋白,稳定性指数为39.01,脂肪族氨基酸系数为74.41,蛋白表现为亲水性,无跨膜结构,为非膜结合蛋白。通过对该片段进行酵母和拟...

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1三酰甘油合成途径［5］Fig.1-1Synthesisoftriacylglycerol

调节油脂的积累，在Kennedy途径中，各酰基转移酶依次将脂肪酸组装到而形成三酰甘油，若增加各酰基转移酶：甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAT)、酸酰基转移酶(LPAT)以及二酰甘油酰基转移酶(DGAT)的含量将有可能增的代谢作用，有利于提高油脂的含量。1植物三酰甘油组....

图2-1WB06总RNA电泳图

RNA（图2-1），以物，扩增出长度约其用连接酶连接到，获得阳性重组子。名为BnDGAT3。

图2-2BnDGAT3PCR电泳图

提取甘蓝型油菜WB06的总RNA（图2-1），以反转录的cDNA为模板，利用AtDGAT3基因同源序列设计的引物，扩增出长度约为1000bp的基因片段（图2-2）利用试剂盒纯化回收该片段，将其用连接酶连接到T载体上，转化至大肠杆菌感受中，经菌落PCR鉴....

图2-3BnDGAT3菌落PCR鉴定电泳图

提取甘蓝型油菜WB06的总RNA（图2-1），以反转录的cDNA为模板，利用AtDGAT3基因同源序列设计的引物，扩增出长度约为1000bp的基因片段（图2-2）利用试剂盒纯化回收该片段，将其用连接酶连接到T载体上，转化至大肠杆菌感受中，经菌落PCR鉴....

本文编号：4019353