三七绿紫过渡茎花色苷、皂苷含量和F3H转录强度的纵向变化

发布时间：2024-12-22 05:33

　　文山三七作为云南道地性药材,在普遍发生“紫化(purpling)”的三七营养器官中,地上茎的紫化出现得最早,也最明显,故紫化的地上茎成为探究三七花色苷合成和生态生理功能的首选器官。但是,三七一年生植株绿紫过渡地上茎上花色苷黄金分割式积累的原因和功能还尚不明确。本研究以一年生文山三七绿紫过渡茎为材料,主要研究花色苷、皂苷含量和F3H转录强度的纵向变化及其相关性,并用显微组织化学法研究了云南文山三七一年生植株绿紫过渡地上茎各茎段花色苷和皂苷的组织定位,用分光光度法检测了茎段的总花色苷(TAC)和总皂苷含量(TSC),用高效液相色谱检测了茎段的皂苷单体含量,用荧光定量PCR法检测了花色苷的结构基因F3H的转录强度。主要研究结果如下:(1)在茎段中部横截面上,花色苷主要定位在皮层薄壁组织外侧的2层或2～3层细胞中此外,在厚角组织外侧的1～2层细胞和表皮细胞中也有少量花色苷积累,但韧皮部、形成层、木质部和髓中均无花色苷积累,茎的花色苷明显富集于茎中上部的黄金分割点处,而皂苷主要定位在维管束中,其次为皮层薄壁组织,髓中则几乎无皂苷积累。(2)各茎段的皂苷单体均主要为人参皂苷Rb1。从茎顶向茎基,茎段...

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
符号及缩写语
1 引言
    1.1 三七绿紫过渡地上茎紫化特征的特殊性
        1.1.1 三七地上茎存在的紫化现象
        1.1.2 三七绿紫过渡地上茎的紫化存在着黄金分割式的分布
    1.2 F3H是高等植物花色苷生物合成结构基因之一
        1.2.1 F3H在花色苷生物合成中的地位
        1.2.2 目前F3H的研究进展
    1.3 高等植物花色苷和皂苷含量的检测方法
        1.3.1 高等植物花色苷含量的测定方法
        1.3.2 高等植物皂苷含量的测定方法
    1.4 基因转录水平检测的经典方法—实时荧光定量PCR
    1.5 研究内容、意义和创新点、技术路线
        1.5.1 研究内容和目标
        1.5.2 研究意义和创新点
        1.5.3 技术路线
2 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 材料采集与预处理
        2.1.2 主要试剂(盒)
    2.2 茎段花色苷和皂苷组织定位的检测
    2.3 茎段总花色苷含量的测定
    2.4 茎段皂苷含量的测定
        2.4.1 茎段总皂苷含量的测定
        2.4.2 茎段皂苷单体含量的测定
    2.5 三七绿紫过渡茎植株地上茎不同茎段合成花色苷的结构基因F3H转录强度的检测
        2.5.1 三七绿紫过渡茎植株的总RNA含量检测
        2.5.2 cDNA的合成
        2.5.3 三七花色苷合成途径中结构基因F3H引物的筛选及目的基因的扩增
        2.5.4 三七花色苷合成途径中结构基因F3H转录强度的检测
    2.6 数据分析
3 结果与分析
    3.1 三七绿紫过渡地上茎花色苷和皂苷组织定位和积累量的纵向变化特征
        3.1.1 花色苷组织定位和积累量的纵向变化特征
        3.1.2 皂苷组织定位和积累量的纵向变化特征
    3.2 三七绿紫过渡地上茎总花色苷含量的纵向变化特征
    3.3 三七绿紫过渡地上茎皂苷含量的纵向变化特征
        3.3.1 总皂苷含量的变化特征
        3.3.2 皂苷单体含量的变化特征
    3.4 三七绿紫过渡地上茎花色苷和皂苷含量纵向变化的相关性特征
    3.5 三七绿紫过渡地上茎花色苷合成结构基因F3H转录强度
        3.5.1 三七绿紫过渡地上茎总RNA的检测
        3.5.2 三七绿紫过渡地上茎F3H片段的筛选及生物信息学分析
        3.5.3 三七绿紫过渡地上茎F3H转录强度的纵向变化特征
    3.6 三七绿紫过渡地上茎F3H转录强度和总花色苷含量纵向变化的相关性特征
4 讨论
    4.1 三七绿紫过渡地上茎花色苷和皂苷组织定位和积累量纵向变化的差异性
    4.2 三七绿紫过渡地上茎花色苷和皂苷含量纵向变化的差异性
    4.3 三七绿紫过渡地上茎F3H转录强度和总花色苷含量纵向变化的差异性
5 结论
参考文献
攻读硕士期间论文发表情况和获奖情况
致谢



本文编号：4019518