碱茅过氧化氢酶基因对紫花苜蓿遗传转化的研究

发布时间：2025-03-15 03:15

　　土壤盐渍化是农业生产中的一个重要的非生物胁迫因素,如何提高作物的耐盐性已经成为作物遗传育种领域的重要研究课题之一。紫花苜蓿是一种被誉为“牧草之王”的多年生优良豆科牧草,在生态环境治理、固土护坡、防止水土流失等方面具有非常重要的作用。如何进一步提高其抗逆性和产量,扩大其种植规模,是当前紫花苜蓿研究领域的重点。目前,基因工程的发展和应用为紫花苜蓿抗逆遗传育种开辟了一条新的途径。吉林省农业科学院牧草生物技术育种研究室前期利用同源克隆结合RT-PCR的方法在吉农朝鲜碱茅(Puccinellia chinampoensis)中分离到一个过氧化氢酶基因,命名为:PuCAT,并构建了其p3300-35s-PuCAT-NOS植物表达载体。本研究以“公农5号”紫花苜蓿作为受体材料,首先对已有的紫花苜蓿遗传转化系统进行了优化,接着利用农杆菌介导法将上述PuCAT基因转入紫花苜蓿,以期培育出抗盐碱转基因紫花苜蓿新种质。1.试验选择培育7d的无菌苗子叶作为外植体,选用UM+2,4-D 2 mg·L-1+KT 0.25mg·L-1作为愈伤培养基,后将培育出的愈伤组织在不同配比的分化培养基进行分化分析,结果发现,最...

【文章页数】：38 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2-1植物表达载体p3300-35s-PuCAT-NOS植物表达载体

杆菌介导的紫花苜蓿遗传转化体菌介导紫花苜蓿的遗传转化体系，本试验开铵膦的浓度选择、农杆菌的浓度确定、预培养基中所加头孢霉素的浓度等。农5号MedicagesativaL.cv.GongnongNo.室提供）含Bar基因的pCAMBIA3300和农杆菌为植物表....

图3-1bar基因的PCR鉴定图

.精确的称取0.8g琼脂糖，并加入0.5×TBE缓冲液，加热使其充分的溶.等待溶液冷却到60℃的时候需要戴手套加入1μl的EB替代染料后摇.将琼脂糖倒入制胶模具中，厚度一般为0.3～0.6cm插入梳子。.在室温下静止放置30min以上，等到琼脂糖完全凝固....

图3-2PuCAT基因的PCR鉴定图

图3-2PuCAT基因的PCR鉴定图Fig.3-2PuCATgeneforPCRidentification注：Maker为DNAMakerDL15000plus；“+”为质粒p3300-35s-PuCAT-NOS阳性对照-”为野生型植株阴性对照；编号....

本文编号：4035071