丙氨酰—谷氨酰胺和γ-氨基丁酸对建鲤生长、免疫和抗低氧胁迫的影响

发布时间：2020-03-30 12:06

【摘要】：以初始体质量(45.59±0.24 g)建鲤作为研究对象,在建鲤配合饲料中添加不同比例Ala-Gln和GABA,制成7种等氮(质量分数为32%粗蛋白质)、等能(17.0 MJ/kg)饲料,以添加Ala-Gln和GABA对建鲤生长最适添加量(6.0g/kg、90 mg/kg GABA)添加组添加比例为100%,在此基础上等比例缩减和增加,Ala-Gln和GABA的添加梯度分别为I组0%(0 g/kg Ala-Gln、0 mg/kg GABA)、II组20%(1.2 g/kg Ala-Gln、18 mg/kg GABA)、III组40%(2.4 g/kg Ala-Gln、36 mg/kg GABA)、IV组60%(3.6 g/kg Ala-Gln、54 mg/kg GABA)、V组80%(4.8 g/kg Ala-Gln、72 mg/kg GABA)、VI组100%(6.0 g/kg Ala-Gln、90 mg/kg GABA)、VII组120%(7.2 g/kg Ala-Gln、108 mg/kg GABA),共7组。进行8周生长试验。建鲤8周生长试验后,进行低氧应激(DO:1.0±0.2mg/L),在0、1、2、4、8、8.5、9.5、10.5 h取样,前5个时间为低氧阶段,后3个时间为复氧阶段。探讨丙氨酰-谷氨酰胺(acyl-glutamine)和γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)对建鲤(Cyprinus carpio var.jian)生长、免疫及抗低氧胁迫的影响。结果表明:1、与对照组(I:0 g/kg Ala-Gln、0 mg/kg GABA)相比,饲料中添加Ala-Gln和GABA的添加组,建鲤平均增质量率以及特定生长率均显著提高(P0.05);其中IV(3.6 g/kg Ala-Gln、54 mg/kg GABA)组建鲤的饲料效率、肌肉中蛋白质合成以及蛋白质效率均显著高于不添加的对照组(I:0 g/kg Ala-Gln、0 mg/kg GABA)(P0.05),其他各添加组之间差异不显著(P0.05)。随着建鲤配合饲料中Ala-Gln和GABA添加比例的增多,建鲤超氧化物歧化酶(SOD)活性逐渐增加,丙二醛(MDA)含量逐渐降低,其中IV、V、VI组SOD活性都显著高于对照组(I:0 g/kg Ala-Gln、0 mg/kg GABA)(P0.05),且三组之间差异不显著(P0.05);IV、V、VI及VII组MDA含量显著低于不添加的对照组(I:0 g/kg Ala-Gln、0 mg/kg GABA)(P0.05)。与对照组(I:0 g/kg Ala-Gln、0 mg/kg GABA)相比,IV组、V组和IV组LZM活力均显著提高(P0.05);头肾、脾脏各组NO含量都显著提高(P0.05),其中头肾V组和脾脏IV组达到最大值;2、随着低氧胁迫时间增多,建鲤SOD活性先呈上升趋势后下降趋势。胁迫4 h,SOD活性上升到最大值,其中IV、V以及VI组显著高于不添加的对照组(I:0 g/kg Ala-Gln、0 mg/kg GABA)(P0.05);胁迫8 h,建鲤各组SOD活性降低,其中IV、V组显著高于不添加的对照组(I:0 g/kg Ala-Gln、0 mg/kg GABA)。复氧后,建鲤SOD活性短暂回升后降低,并逐渐恢复到正常水平。胁迫1 h建鲤MDA含量无显著变化,之后降低,IV、V以及VI组显著低于不添加的对照组(I:0 g/kg Ala-Gln、0 mg/kg GABA),胁迫8 h有所上升。恢复氧气10.5 h后,各组MDA含量无明显差异。与不添加的对照组(I:0 g/kg Ala-Gln、0 mg/kg GABA)相比,随着低氧时间延长,建鲤头肾、脾脏NO含量、LZM活性逐渐增加,低氧4 h达到最大值,低氧胁迫8 h,各组LZM活性、NO含量均下降,各添加组之间差异显著,建鲤头肾LZM活性和NO含量IV、V与对照组(I:0 g/kg Ala-Gln、0 mg/kg GABA)差异最显著(P0.05),这两组之间差异不显著。脾脏LZM活性和NO含量IV、V和VI组与对照组(I:0 g/kg Ala-Gln、0 mg/kg GABA)差异最显著(P0.05),三组之间差异不显著。恢复常氧阶段,建鲤各组LZM活性和NO含量继续下降,逐渐恢复正常水平,III、IV、V、VI、VII组与对照组(I:0 g/kg Ala-Gln、0 mg/kg GABA)差异显著(P0.05),各组之间差异不显著。低氧胁迫0 h,随着饲料中Ala-Gln和GABA添加量的增加,各添加组头肾、脾脏和肝胰脏HSP90 mRNA的相对表达量均高于对照组,肝胰脏V组、脾脏IV、V组以及头肾III、IV、V组显著高于与对照组(I:0 g/kg Ala-Gln、0 mg/kg GABA)(P0.05)。低氧胁迫8 h,各添加组头肾、脾脏和肝胰脏HSP90 mRNA的相对表达量与低氧0 h相比增加,随着饲料中Ala-Gln和GABA添加比例的增加,每个添加组的头肾、脾脏和肝胰脏HSP90 mRNA的相对表达量均高于对照组(I:0 g/kg Ala-Gln、0 mg/kg GABA),以IV组、V组差异最显著(P0.05)。恢复氧气阶段10.5 h,各添加组头肾、脾脏和肝胰脏HSP90 mRNA的相对表达量与低氧8 h相比有所下降,随着饲料中Ala-Gln和GABA添加比例的增加,每个添加组头肾、脾脏和肝胰脏HSP90 mRNA的相对表达量均高于对照组,脾脏IV组、头肾V组及肝胰脏III组、IV组显著高于与对照组(I:0 g/kg Ala-Gln、0 mg/kg GABA)(P0.05)。本试验条件下,通过在建鲤配合饲料中添加Ala-Gln和GABA能改善建鲤生长性能、免疫水平以及抗低氧胁迫能力。不同添加量组之间亦有差异,综合三方面考虑,在尽量降低生产成本的前提下,建议建鲤饲料中添加Ala-Gln和GABA较为适合的添加水平为3.6 g/kg Ala-Gln、54 mg/kg GABA。
【图文】：

示意图,相关性,示意图,机体

第六章研究问题、研究目的和意义及技术路线6.1Gln 与 GABA 的相关性及研究问题的提出从氨基酸的营养作用可知，一些必需氨基酸在动物的生长、发育和繁殖等方面有着不可替代的作用，有一些特殊的氨基酸在动物受到刺激下具有特殊意义，例如 Gln、非蛋白质性氨基酸 GABA 等。其中，，GABA 和 Gln 是近几年研究比较多的两种抗应激氨基酸。Gln 是一种条件必需氨基酸，当感染、术后、胁迫和耐力运动时，机体本身生成的 Gln 无法满足机体所需量，必须外源供给。Gln 主要是通过抗氧化作用、营养作用、功能作用等途径增强机体免疫力，及通过介导 HSP 等信号分子影响应激基因的表达，从而使机体细胞发挥正常功能，增强机体的抗胁迫能力。GABA 具有神经镇定作用的非蛋白质氨基酸，可以通过调节动物食欲和采食、抑制神经兴奋、调控物质代谢和增强机体免疫等途径来有效的提高动物机体的抗应激能力。

电泳图,胰脏,和肝,脾脏

硕士论文第三章Ala-Gln和GABA对建鲤抗低氧胁ln 和 GABA 对低氧胁迫下建鲤 HSP90 mRNA 表达量的影肾、脾脏和肝胰脏样品总 RNA 鉴定结果如图 3.6 所示。可见 5 S 条带，28 S 和 18 S 条带清晰，这表明试验提取的，可以进行逆转录，RNA 的 260/280 值均在 1.8-2.0 之间。
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S965.116

【参考文献】