内源性大麻素在翡翠贻贝（Perna viridis）附着中的作用

发布时间：2020-06-03 23:34

【摘要】：大麻素是一类能够通过作用于大麻素受体,调节神经递质释放,从而调节神经、免疫等功能的化合物。人体内合成和分泌的一些小分子化合物也能作用于大麻素受体,被称为内源性大麻素。在无脊椎动物中内源性大麻素已有发现。目前,已在紫贻贝中(Mytilus edulis)、淡水水螅(Hydra vulgaris)等中提取到N-花生四烯酰乙醇胺(ananadamide,AEA)、2-花生四烯酰甘油酯(2-arachidonoylgly erol,2-AG)等内源性大麻素(Sepe et al.,1998)。并且,在斑马贻贝(Dreissena polymorpha)中的研究表明,AEA及其类似物能够抑制斑马贻贝的附着,并且这个作用是可逆的,说明内源性大麻素很可能参与斑马贻贝附着的调控(Angarano et al.,2009)。翡翠贻贝(Perna viridis)作为我国沿海一种主要的污损贝类,关于其附着的相关机制,研究相对较少。本文,根据以上研究结果,初步探讨了内源性大麻素在翡翠贻贝附着中的作用。得到的主要结果如下:(1)AEA、2-AG、AA对翡翠贻贝的附着均有一定的抑制作用。它们可能参与了翡翠贻贝附着的调控。大麻素受体激动剂AM1241、HU308以及MAGL降解酶JZL184对翡翠贻贝的附着也有一定的抑制作用。说明AEA、2-AG可能是通过翡翠贻贝大麻素受体对其附着进行调控的。CB1受体拮抗剂SR141716A与AM251对AEA在翡翠贻贝附着中的作用并没有明显的竞争性抑制作用,CB2受体拮抗剂SR144528对2-AG在翡翠贻贝附着中的作用也没有明显的抑制作用。说明翡翠贻贝中虽然很可能存在大麻素受体,但是与脊椎动物中的大麻素受体不完全相同。AEA和2-AG对翡翠贻贝附着蛋白表达的影响实验结果表明,AEA可能是通过影响了 FP1V-1的表达,从而抑制了翡翠贻贝的附着。2-AG可能是通过影响了 FP1V-1、FP1V-2、FP2、FP4V-1和FP4V-2的表达从而抑制了翡翠贻贝的附着。(2)LC-MS/MS结果表明,翡翠贻贝中确实存在AEA、2-AG、OEA、PEA四种内源性大麻素。附着和不附着翡翠贻贝内源性大麻素含量对比,结果表明不附着翡翠贻贝中2-AG的含量较高,说明2-AG可能参与了翡翠贻贝不附着的调控。(3)转录组Unigene的注释中,在Nr数据库中注释到一个CB1类受体。证明翡翠贻贝中确实存在大麻素受体。附着和不附着翡翠贻贝转录组结果表明,在不附着组中2-AG的含量比CON组确实要高。对转录组进行差异表达分析,结果表明。一方面2-AG可能作用于突触前膜上的TRP离子通道,使细胞内Ca2+浓度降低,引起DSE现象,导致NO合成受阻,从而抑制翡翠贻贝的附着。另一方面2-AG可能作用于线粒体膜上的CB受体,影响细胞内能量的代谢,从而抑制翡翠贻贝的附着。
【图文】：

剖面图,足丝,贻贝,剖面图

图１．２贻贝的剖面图和足丝的结构（Ｈｅａｔｈｅｒ邋ｅｔａｌ．，，邋２００７）逡逑Ｆｉｇ邋．１．２邋Ａｎａｔｏｍｙ邋ｏｆ邋ｍｕｓｓｅｌ邋ａｎｄ邋ｂｙｓｓｕｓ邋ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ逡逑于以上研究结果，本研究以翡翠贻贝为实验材料，探究内源性

翡翠贻贝,足丝,附着率,翡翠

２．２．１内源性大麻素对翡班始贝附着的影响逡逑２．２．２．１邋ＡＥＡ对翡翠始贝附着的影响逡逑不同浓度ＡＥＡ对翡翠贻贝附着的影响如图２．１所示。在ＡＥＡ处理的２４邋ｈ逡逑中，从平均足丝数来看，在浓度为１０邋ＨＭ的ＡＥＡ中就开始与ＤＭＳＯ组具有显著逡逑的差异。而从不附着率来看的话，从浓度为２０邋ｍＭ开始，ＡＥＡ才开始对翡翠贻逡逑贝附着具有极显著的抑制作用。并且，在后遗效应实验中，实验组不论是不附着逡逑率还是平均足丝数都与对照组没有显著的差异，说明ＡＥＡ对翡翠贻贝附着的抑逡逑制是可逆的。根据足丝计算其ＥＣ５Ｑ＝１６．２６ｍＭ；根据不附着率计算其ＥＣ５Ｑ＝４７．３４逡逑ＭＭ。另外，由图还可以看出ＡＥＡ浓度梯度实验最初的化合物处理阶段和后遗作逡逑用检验实验（（ｉｎｉｔｉａｌ邋２４ｈ邋ｅｘｐｏｓｕｒｅ；邋２４ｈ邋ｐｏｓｔ－ｅｘｐｏｓｕｒｅ）过程中浓度邋１邋ｊｊＭ、５邋｜ｊＭ、逡逑２１逡逑
【学位授予单位】：厦门大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S917.4

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