复方磺胺嘧啶在拟穴青蟹体内药动学研究

发布时间：2020-06-10 14:33

【摘要】：本文通过建立磺胺嘧啶(SD)和甲氧苄胺嘧啶(TMP)在拟穴青蟹体内同时检测的高效液相色谱方法,研究了单剂量口灌给药条件下磺胺嘧啶和甲氧苄啶在青蟹血淋巴的药动学和组织中的分布代谢规律,并以低溶氧、高氨氮水环境胁迫青蟹,探究环境胁迫下药动学的变化,以期为药物的科学合理使用提供数据支持。1.反相高效液相色谱法测定拟穴青蟹组织中的复方磺胺嘧啶残留在比较不同检测波长、流动相对磺胺嘧啶、甲氧苄啶色谱行为影响,比对多种提取剂对磺胺嘧啶、甲氧苄啶在青蟹各组织中回收率的影响,建立了测定青蟹血淋巴、肌肉和肝胰腺等组织中磺胺嘧啶、甲氧苄啶含量的反相高效液相色谱法,色谱条件为:乙腈和0.01 mol/L乙酸铵(乙酸调节p H为3.80)为流动相;色谱柱Aglient Zorbax SB-C18(4.6×150 mm,5μm);柱温35℃;紫外检测器波长245nm;进样量10μL,流速1.0 mL/min。标准品磺胺嘧啶、甲氧苄啶在0.05~10μg/mL范围内线性关系良好,相关系数R2=0.995~0.999。采用乙腈提取青蟹血淋巴、肌肉、肝胰腺和鳃组织中磺胺嘧啶、甲氧苄啶,加标回收率分别为82.26%~95.23%、81.52%~98.59%,日内精密度分别为1.77%~2.53%、1.75%~4.09%,日间精密度分别为2.27%~3.30%、1.95%~4.82%。定量检测限分别为0.05μg/mL、0.05μg/g。该方法操作简单,重现性好,药峰无干扰,适用于青蟹生物样品中磺胺嘧啶和甲氧苄啶含量的同时分析。2.复方磺胺嘧啶在拟穴青蟹体内的药动学及组织分布和消除规律研究水温27±1℃,盐度10条件下,单剂量(100 mg/L)口灌给药复方磺胺嘧啶后,磺胺嘧啶和甲氧苄啶在拟穴青蟹体内的药动学,以及在肌肉、肝胰腺和鳃组织中的分布、消除规律,以期为其科学安全使用提供数据支持。结果显示,青蟹口灌复方磺胺嘧啶后,血淋巴中磺胺嘧啶和甲氧苄啶药物浓度-时间关系曲线均符合一级吸收二室模型。SD和TMP在血淋巴的达峰时间(Tmax)分别为4 h、2 h,血药峰浓度Cmax分别为49.56 mg/L、2.79 mg/L,药时曲线下面积(AUC)分别为1417.65 mg/L·h、82.76 mg/L·h;SD和TMP的在肌肉中Tmax分别为4 h、1h,药物峰浓度分别为44.95 mg/kg、10.09 mg/kg,消除半衰期分别为25.09 h、35.08 h;SD、TMP在肝胰腺中达峰时间为4 h、2 h,达峰浓度分别为59.36mg/kg、74.82 mg/kg,消除半衰期分别为32.39 h、34.93 h;在鳃组织中Tm ax=4 h、2 h,达峰浓度Cmax分别为23.28 mg/kg、25.29 mg/kg,消除半衰期分别为32.39 h、34.93 h。药物在肝胰腺达峰浓度最高,明显高于其他组织,说明其是药物蓄积、代谢的主要场所,可能因为高浓度药毒性和代谢能力饱和,肝胰腺中药物消除慢,导致肝胰腺中药物消除半衰期最长。同时鳃组织中药物浓度也比较高,而且消除速度较快,可能是其在药物代谢中承担部分作用。以0.1 mg/kg和0.05 mg/kg为青蟹体内SD和TMP的最高残留限量(MRL),95%置信区间,SD、TMP在拟穴青蟹肌肉中的理论休药期分别为290.6 h和302.8 h,在胰腺中期分别为340.4 h和377.0 h。3.环境胁迫对药动学特征的影响通过模拟低溶氧(2.5±0.5 mg/L)、高浓度氨氮(25±2 mg/L)水体环境胁迫健康的拟穴青蟹,胁迫96 h后口灌复方磺胺嘧啶(100 mg/L,SD:TMP=5:1),研究药物在不同组别青蟹血淋巴中的比较药动学,结果显示:SD、TMP在低溶氧组和氨氮组中药物峰浓度分别为37.68 mg/L、2.26 mg/L和43.23 mg/L、2.56mg/L,达峰时间分别为8 h、4 h和4 h、4 h,时间曲线下面积2416.08 mg/L·h、95.90 mg/L·h和2029.36 mg/L·h、95.56 mg/L·h,平均驻留时间分别为54.60 h、44.80 h和45.17 h、45.13 h,消除半衰期分别为81.04 h、33.55 h和42.36 h和40.24 h。与对照组相比,低溶氧组青蟹对药物的吸收和消除能力都有所降低,推断青蟹为适应低氧环境调整代谢水平,使药物处置能力有所降低;高氨氮组可能处于应激状态,给药后短时间内消除速率高于对照组使达峰时间提前,随胁迫时间延长,后期药物消除能力下降。
【图文】：

药物结构,磺胺嘧啶,甲氧苄啶

水产品质量安全和药物的合理使用，是我国水产行业中亟待解胺类药物概述胺类药物的介绍类药物(Sulfonamides)是以对氨基苯磺酰胺（磺胺）为基本结构殖作用的化学合成药物，磺胺药是药物化学史上的重大发现，，人 Gelmo 首先合成了对氨基苯磺酰胺（Sulfanilamide），1 发现了链球菌和葡萄球菌不能感染使用过名为百浪多息（loride）红色偶氮染料的鼠、兔；直到 1935 年 Foerster 公布百浪感染导致的败血症的临床结果，磺胺药得到了世界范围的关注域目前临床上使用的主要有：磺胺醋酰（SA）、磺胺嘧啶（（SMZ）等[5-7]。我国兽药试行标准中允许在水产动物中使用方磺胺二甲氧嘧啶粉（水产用）、磺胺间甲氧嘧啶钠粉（水产VA唑粉（水产用）、复方磺胺嘧啶粉（水产用）[8]。

电荷分布,磺胺药,甲氧苄啶,二氢叶酸

易溶于稀盐酸酸和氢氧化钠等溶液[9]。甲氧苄啶（Trimethoprim, TMP）是一种亲脂弱碱性乙胺嘧啶类抑菌剂，其抗菌谱与磺胺药接近，抗菌效果甚至更强，但单独使用易导致细菌耐药，故常作磺胺类药物的增效剂使用，磺胺嘧啶与甲氧苄啶联以质量比 5：1配伍成为复方磺胺嘧啶粉，广泛应用于水产动物[10]。1.1.2 磺胺类药物的抗菌机制和构效关系目前关于磺胺药物抗菌机制公认的是 Wood-fields 学说：磺胺类药物由于分子大小和电荷分布与对氨基苯甲酸（p-aminobenzoic acid，PABA）极相似，可与PABA 产生竞争性拮抗作用。二氢叶酸合成酶的催化 PABA 与二氢蝶啶焦磷酸酯（dihydropteridine phosphate）及谷氨酸（glutamic acid）或二氢蝶啶焦磷酸酯与对氨基苯甲酰谷氨酸（p-aminobenzoylglutamic acid ，PABG ）合成二氢叶酸（ dihydrofolic acid ， FAH2 ）。再被二氢叶酸还原酶还原成四氢叶酸（tetrahydrofolic acid，FAH4），为细菌提供叶酸辅酶[11]。磺胺药物与 PABA 竞争细菌酶—二氢叶酸合成酶，导致微生物所需的四氢叶酸减少，影响细菌核酸、蛋白的合成，从而抑制细菌的繁殖。磺胺药抗菌机制见图 1-2。
【学位授予单位】：上海海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S948

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