中华绒螯蟹C型凝集素（EsLecB）的抗菌功能研究

发布时间：2020-06-16 17:57

【摘要】：中华绒螯蟹(Eriocheir sisensis)广泛分布于南北沿海各地湖泊,是我国一种重要的经济蟹类品种,也是一种中国传统美食。随着中国经济的发展,人们对于中华绒螯蟹的需求逐渐增多,这使它的养殖业大规模发展,但养殖场经常遭受病原菌或病毒等的侵害,经常大规模爆发疾病,造成直接的经济损失。因此,研究中华绒螯蟹的免疫防御机制,尤其是研究该蟹对复杂的养殖水环境中大量细菌等病原的识别机理尤为重要。免疫系统一般分为先天或固有和适应或获得性免疫系统。无脊椎动物不存在典型的由一系列免疫因子组成以及能产生免疫记忆的获得性免疫,但具有先天免疫。它依靠模式识别受体(pattern recognition receptors, PRRs)与病原相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns, PAMPs)相互作用,识别并结合病原菌,从而激活宿主体内信号通路,防御病原菌入侵。在无脊椎动物免疫中,C型凝集素(CTLs)作为一种模式识别受体(PRRs)具有重要作用。本研究基于中华绒螯蟹肝胰腺cDNA库的表达序列标签(expressed sequence tag, EST),克隆了一个新的C型凝集素EsLecB。EsLecB含19个氨基酸的信号肽,能编码156个氨基酸的开放阅读框(open reading frame, ORF),含131个氨基酸的糖基识别功能域(carbohydrate-recognition domain, CRD)。荧光定量qRT-PCR分析EsLecB的组织表达情况,发现它在检测的中华绒螯蟹各个组织中均表达,且在血细胞、肝胰腺和心脏中表达最多；病原相关分子模式(PAMPs)或病原菌诱导刺激中华绒螯蟹后,EsLecB表达上调。EsLecB的重组原核表达蛋白(rEsLecB)具有钙离子(Ca2+)不依赖而碳水化合物依赖的菌结合和凝集能力,且具有抗菌能力、血细胞包裹能力及激活酚氧化酶原(prophenoloxidase, proPO)激活系统的能力。本研究不仅丰富了C型凝集素(CTLs)的免疫功能研究,也为其他模式识别受体(PRRs)的免疫调控机制研究提供了参考,同时也将有助于更好的理解中华绒螯蟹乃至其他甲壳动物的先天免疫反应机理。
【学位授予单位】：华东师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S917.4
【图文】：

集而致死；相关免疫分子激活黑化级联反应生成的一系列化合物可将其杀死；此逡逑外，一些抗菌蛋白也可Ｗ直接消灭病原茵［１＂＂］。无脊椎动物免疫系统参与的通路逡逑已有初步研究，但具体分子机制仍有待深入研究（图１．１）。逡逑无脊椎动物免疫系统，包括一些细胞内的免疫反应，如吞枿及激活信号通路逡逑等；化及细胞外的免疫反应，如凝集和黑化等（图１．２）。大多数情况下，凝集、逡逑黑化和Ｔｏｌｌ信号通路受s{氧化酶（ＰＯ）级联系统调控。酷氧化酶巧０）级联系逡逑统能被模式识别蛋白（ｐａｔｔｅｒｎ邋ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ邋ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＰＲＰｓ）或损伤组织激活。酪逡逑氧化酶（Ｐ０）级联系统的激活比一些需要调控基因表法的免疫反应要快，因此逡逑在无脊椎动物免疫中有重要的地位Ｐ１。虽然在无脊椎动物中不存在与脊椎动物获逡逑得性免疫相关的一些关键成分，如Ｂ细胞、Ｔ细胞和主要的组织相容性分子，但逡逑这不能说明无脊椎动物缺乏具有免疫记忆的特异性免疫，只能说明无脊椎动物与逡逑脊椎动物执行特异性免疫的具体机制有可能不一样。因此，无脊椎动物很可能具逡逑有与脊椎动物相似的免疫记忆或特异性免疫。已有相关巧巧表明无脊椎动物免疫逡逑具有类似于脊椎动物的特异性免疫ｔｗｉ。逡逑无脊椎动物先天免疫激活的第一道免疫防线是免疫识别

逦华东师范大学２０１６届硕王研究生学位论文逦逡逑反应［Ｓ’ｌＷｌ’Ｗ。逡逑二、功能逡逑无脊椎动物Ｃ型凝集素作为一种模式识别受体（ＰＲＲｓ）能识别病原菌表面逡逑的病原相关分子模式（ＰＡＭＰｓ），进而结合微生物激活免疫系统无脊椎动物逡逑免疫系统激活的第一步是识别并结合病原菌。已报道Ｃ型凝集素能够结合大多逡逑数种类的病原菌和碳水化合物，且具有不同亲和力，也受剂量依赖［３８－３９］。此外，逡逑Ｃ型凝集素结合微生物和碳水化合物的反应类型，部分属于Ｃａ２＋不依赖，另有部逡逑分属于Ｃａ２＋依赖，但大多Ｃ型凝集素都是碳水化合物依赖ＰＳ’Ｗ。作为参与宿主逡逑区分自己与非己的重要模式识别受体（ＰＲ民Ｓ），Ｃ型凝集素通过识别、结合病原逡逑菌或碳水化合物后，能诱导激活Ｗ下等一系列的免疫反应。逡逑Ｆｕｎｇｉ逡逑

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本文编号：2716370