刺参自溶过程中Caspase家族酶及线粒体膜电位变化的研究

发布时间：2020-08-13 11:07

【摘要】：刺参属于棘皮动物门,海参纲。刺参具有很高的营养价值,属于典型的高蛋白、富含维生素、矿物质,但低脂肪、不含胆固醇的高端营养食材。但刺参自溶能力很强,当生活条件发生改变或受到不利的理化因素的刺激,便会出现吐肠、体壁溶化等自溶现象。刺参自溶严重影响了刺参的养殖、运输、加工、保藏。前期研究发现,在刺参自溶的过程中伴随着细胞凋亡的发生。细胞凋亡与caspase家族酶密切相关。本实验通过紫外线UVC照射,以诱导刺参自溶。以刺参体壁TCA可溶性寡肽含量为标准,确定刺参自溶程度。然后,对自溶过程中,不同时间刺参线粒体膜电位的变化JC-1染色法进行检测。利用免疫组织化学法对自溶刺参体壁中的caspase-3进行染色、观察。并检测刺参肠中caspase-3、caspase-9等caspase家族酶的存在及酶比活力随自溶时间变化的情况。本实验通过JC-1染色对自溶过程中刺参肠中线粒体膜电位的检测发现:当刺参受到紫外线刺激时,自溶程度并不高,但线粒体膜电位立刻大幅度下降,之后随着自溶时间增加逐渐降低。对通过免疫组织化学法标记出刺参体壁caspase-3,比较不同自溶时间内刺参体壁免疫组化染色情况发现:与新鲜刺参相比,自溶刺参体壁内出现caspase-3染色颗粒,而且caspase-3染色颗粒的数量随着自溶时间的增加逐渐增多。对不同自溶时间的刺参中caspase-3、caspase-9等caspase家族酶酶比活力检测后,发现caspase家族酶的活性都会随着自溶时间增强,但激活的时间及活力增强的顺序不尽相同。
【学位授予单位】：大连工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S917.4

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