牙鲆甲状腺激素受体TRαA介导甲状腺激素调控的靶基因鉴定

发布时间：2020-09-03 19:53

　　 为了鉴定牙鲆甲状腺激素受体TRs介导甲状腺激素调控的靶基因,研究采用RT-PCR克隆了TRαA基因的CDS区,并构建了p3×Flag-TRαA重组真核表达载体;该重组质粒转染HEK293T细胞后, RT-PCR、实时定量PCR与Western blot检测均表明牙鲆TRαA在哺乳动物蛋白表达系统中成功转录并翻译;且重组质粒转染的细胞裂解液通过G1亲和层析柱纯化、过滤除菌可得到纯的融合蛋白3×Flag-TRαA,然后双荧光素酶报告实验通过在HEK293T细胞中共转染p3×Flag-TRαA和含候选靶启动子的报告基因表达载体pGL3-Pro-atoh8-1517/1333/708,表明TRαA受体结合在atoh8基因启动子区 1497— 688特异的2个TRE识别序列来调控该基因的转录,即atoh8是TRαA介导甲状腺激素直接调控的靶基因。研究为深入探究甲状腺激素受体TRαA介导甲状腺激素调控的信号通路提供了基础依据。

【参考文献】

相关期刊论文 前2条

1 裘佳;陈虹;黄秉仁;;甲状腺激素受体在调节靶基因转录中的激活和抑制作用[J];生命的化学;2009年03期

2 宿文辉;张杰;张丽雁;宗志红;张哲;于秉治;;人睾丸精子结合蛋白-His6融合蛋白在真核细胞中的表达及亲和纯化[J];细胞与分子免疫学杂志;2006年05期

相关硕士学位论文 前1条

1 周晶耀;斑马鱼ATOH8基因的克隆、表达及初步功能研究[D];复旦大学;2009年

【共引文献】

相关期刊论文 前7条

1 张晓沁;马庆良;周宇;;绝经前后妇女阴道壁黏膜甲状腺激素功能性受体表达的变化[J];中国妇产科临床杂志;2013年02期

2 杨皓月;李丕鹏;陆宇燕;;环境污染物对脊椎动物甲状腺及甲状腺激素影响的研究现状[J];环境化学;2012年06期

3 曹庆珍;朱攀;袁静;张小利;刘俊奇;黄民生;施华宏;;三丁基锡对热带爪蟾蝌蚪甲调基因mRNA表达的影响[J];华东师范大学学报(自然科学版);2011年06期

4 宿文辉;刘欣春;冯晨;张杰;武迪迪;于秉治;;重组人睾丸精子结合蛋白对人精子运动参数的影响[J];中华男科学杂志;2009年09期

5 宿文辉;王国丽;张杰;金博;冯晨;张哲;徐小燕;于秉治;;重组人睾丸精子结合蛋白对人精子蛋白激酶A及蛋白激酶C活性的影响[J];细胞生物学杂志;2008年05期

6 朱彦彩;王选年;银梅;乔新安;吴艳云;熊静;;His6免疫原的制备及免疫小鼠抗体效价检测[J];河南农业科学;2007年12期

7 宿文辉;崔城;张哲;李宏图;王彦;于秉治;;重组人睾丸精子结合蛋白对人精子获能及膜功能的影响[J];生殖与避孕;2007年05期

相关硕士学位论文 前1条

1 谢燕;牙鲆甲状腺激素受体TRαA介导甲状腺激素调控的靶基因鉴定[D];上海海洋大学;2019年

【二级参考文献】

相关期刊论文 前3条

1 杨麦贵,杨阳,黄萍,郝晓柯,郑善銮,张竹映,饶国洲;男性不育精液中NO的含量与生殖细胞凋亡的关系[J];细胞与分子免疫学杂志;2005年04期

2 张杰,冯晨,刘莹,姜淼,杨嘉宁,陈菲,宋宇彤,王格,于秉治;人新基因hbrp的染色体定位及其对TPK活性的抑制作用(简报)[J];实验生物学报;2005年02期

3 罗阳,张学,刘莹,姜莉,刘兴元,于秉治;人牛精浆蛋白相关新基因的cDNA克隆、定位和表达[J];中国生物化学与分子生物学报;2002年02期

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 贾亮;施志仪;张俊玲;;牙鲆甲状腺激素受体TRαA的原核表达和多克隆抗体的制备及应用[J];生物工程学报;2009年07期

2 施志仪;刘华;;甲状腺激素受体TRαA基因在牙鲆不同变态发育阶段中的表达差异[J];上海水产大学学报;2005年04期

3 田娟;施志仪;;甲状腺激素受体在大菱鲆组织细胞中的表达及其与甲状腺激素的关系[J];中国海洋大学学报(自然科学版);2010年S1期

4 刘琨;陈松林;张丽燕;董忠典;李海龙;刘万军;;半滑舌鳎甲状腺激素受体β基因(TRβ)的克隆与表达分析[J];农业生物技术学报;2014年09期

5 杨宝矿;王飞;黄玉君;;TR人工鱼礁建设技术的初步研究[J];农村经济与科技;2017年03期

6 张沛;温海深;迟美丽;钱q;陈守温;王旭;;花鲈三种甲状腺激素受体(TRs)基因克隆及表达分析[J];海洋湖沼通报;2018年05期

7 宫春光;殷蕊;孙桂清;于清海;崔剑斌;;牙鲆侧线神经肿胀症的防控[J];科学养鱼;2017年02期

8 ;牙鲆“鲆优2号”[J];海洋与渔业;2017年06期

9 李明;;牙鲆常见疾病的防治技术[J];农村实用技术;2009年07期

10 于清海;宫春光;;牙鲆苗种培育期间危害较大的几种疾病及其防治[J];科学养鱼;2007年09期

相关会议论文 前8条

1 解竞静;杨晓静;吴天星;岳根华;陈杰;赵茹茜;;大黄鱼甲状腺激素受体的克隆与表达[A];全国动物生理生化第九次学术交流会论文摘要汇编[C];2006年

2 解竞静;杨晓静;吴天星;岳根华;陈杰;赵茹茜;;大黄鱼甲状腺激素受体基因在不同年龄与不同组织中的表达差异[A];全国动物生理生化第十次学术交流会论文摘要汇编[C];2008年

3 李晓妮;史宝;柳学周;徐永江;陈圣毅;臧坤;;池塘养殖条件下牙鲆生长轴和甲状腺轴关键激素的变化规律[A];2014年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2014年

4 韩华;李健;王群;韩现芹;李吉涛;陈萍;;喹诺酮类药物对牙鲆肝药物代谢酶活性的影响[A];中国鱼类学会2008学术研讨会论文摘要汇编[C];2008年

5 刘海金;薛玲玲;刘永新;王桂兴;张晓彦;;牙鲆双单倍体及其克隆的制备[A];2010年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年

6 田永胜;徐田军;邓寒;王磊;季相山;丁浩;武鹏飞;董晓丽;苗贵东;陈松林;;牙鲆繁殖群体亲本效应及遗传参数估计[A];2008年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2008年

7 刘顺梅;臧晓南;张学成;刘滨;张维芬;孙平楠;况成宏;;摄食转基因集胞藻牙鲆的安全性评价[A];中国海洋湖沼学会藻类学分会第七届会员大会暨第十四次学术讨论会论文摘要集[C];2007年

8 何洁;王庆芝;吉志新;刘长发;;牙鲆复合循环养殖系统硝化滤器氮磷的去除[A];2014年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2014年

相关重要报纸文章 前4条

1 廖忠海;牙鲆速生抗病新品种问世[N];中国渔业报;2010年

2 山东省沂水县职教中心 侯和菊;牙鲆常见病的防治(上)[N];河北农民报;2007年

3 蔡雪峰;牙鲆的养殖[N];中国海洋报;2001年

4 山东省沂水县职教中心 侯和菊;牙鲆常见病的防治(下)[N];河北农民报;2007年

相关博士学位论文 前1条

1 王学颖;牙鲆原始生殖细胞的起源、增殖和迁移以及高温雄性化的机制研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2015年

相关硕士学位论文 前6条

1 刘琨;半滑舌鳎TRαA和TRβ基因的克隆与表达分析[D];上海海洋大学;2014年

2 谢燕;牙鲆甲状腺激素受体TRαA介导甲状腺激素调控的靶基因鉴定[D];上海海洋大学;2019年

3 刘素萍;牙鲆变态中TRβ基因的表达及其靶向miRNA鉴定分析[D];上海海洋大学;2018年

4 王占飞;牙鲆多聚免疫球蛋白受体与黏膜免疫球蛋白免疫应答动态分析[D];中国海洋大学;2015年

5 李美洁;牙鲆原始生殖细胞的标记及其迁移机制的初步研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2015年

6 王蕾;牙鲆肠道乳杆菌新种（Lactobacillus sp.nov）表面粘附蛋白的研究[D];山东师范大学;2005年

本文编号：2811889