青岛皱纹盘鲍新品系耐高温性能研究

发布时间：2020-09-26 18:57

　　皱纹盘鲍是我国一种重要的海水养殖经济贝类,近年来已经逐步成为我国南方海区鲍类养殖的主要品种。但是其高温季节的死亡率限制了养殖产业的发展,因此选育皱纹盘鲍的耐高温品种以提高存活率是科研工作者的攻关重点。本研究通过皱纹盘鲍的生长实验、免疫因子检测、荧光定量PCR技术对一种皱纹盘鲍新品系(青岛皱纹盘鲍)的耐高温性进行研究,从多种角度评价该鲍的耐高温性能,对该品系皱纹盘鲍在南方海区的推广养殖和贝类抗逆选育研究具有重要意义。1.高温胁迫对青岛皱纹盘鲍幼鲍日生长率和存活率的影响实验所选幼鲍壳长为11±0.25mm,壳宽为8±0.21mm,湿重为0.23±0.02g。实验分组如下:自然水温组(22℃)为对照组,其他三组分别为25℃、28℃以及31℃。比较皱纹盘鲍在温度渐变条件下的不同温度组的生长情况和死亡情况,从而分析其耐高温能力,实验持续45天,四组鲍的死亡率分别为2.2%、11.1%、43.3%、81.1%;壳长增长率分别为1.2%、0.5%、0.3%、0.1%;壳宽增长率分别为1.2%、0.6%、0.3%、0.1%;湿质量增长率为6.6%、3.3%、1.7%、1.1%。结果表明,当温度高于其最适温度时,随着温度升高皱纹盘鲍的死亡率升高、生长变缓慢;并可初步判断从该品系可筛选出能够耐受30℃以上水温的个体。2.高温胁迫对青岛皱纹盘鲍幼鲍免疫因子的影响在温度渐变条件下,研究不同温度组幼鲍体内几种免疫因子(AKT、ACP、SOD、LZM等)的差异,结果显示所选皱纹盘鲍幼鲍体内SOD、LZM、ACP活性有随温度的升高而升高,而AKP酶活性在31℃处理组有轻微下降,在实验控制的温度范围内该种鲍可以通过自身免疫因子的变化来抵抗高温带来的伤害。3.急性高温刺激对两个皱纹盘鲍群体HSP70、HSP90、铁蛋白(Fer1、Fer2)基因的影响运用急性高温刺激的方法处理两个不同群体(青岛群体和汕尾群体),从20℃下直接放入24℃、28℃和32℃的养殖水槽中刺激1H后放回,在刺激后的不同时间段取样,运用荧光定量PCR的方法检测HSP70、HSP90、Fer1、Fer2的相对表达量。结果显示两种鲍这四种基因在热激后均有升高,汕尾群体HSP90相对表达量高于青岛群体,相对表达量最高的接近250倍;Fer2在青岛群体内的相对表达量高于汕尾群体,相对表达量最高的接近3万倍;而两个群体HSP70和Fer1的相对表达量显著低于HSP90和Fer2,相对表达量最高的也低于10倍,说明Fer2和HSP90在鲍受热激时发挥的的作用大于HSP70和Fer1。4.温度渐变下青岛皱纹盘鲍群体与汕尾皱纹盘鲍群体耐温性能比较采用温度渐变的方式观察记录了两个不同群体皱纹盘鲍对高温的耐受性,鲍的处理方法同2,比较青岛群体皱纹盘鲍与汕尾群体的耐热性,青岛群体和汕尾群体在24℃水温处理后的死亡率分别为13.3%、20%,27℃水温处理组分别为54.7%、61.1%,30℃水温处理组分别为66.7%、81.9%。该结果表明青岛群体的耐高温性能高于汕尾群体。
【学位单位】：天津农学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2015
【中图分类】：S917.4
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章前言
    1 鲍的生物学特性
        1.1 鲍的形态特征及分布状态
        1.2 鲍的生活习性及繁殖
        1.3 鲍的价值
    2 南方海域鲍的养殖状况和发展前景
        2.1 养殖状况
        2.2 研究前景
    3 非特异性免疫因子的应用
        3.1 超氧化物歧化酶SOD
        3.2 碱性磷酸酶AKP和酸性磷酸酶ACP
        3.3 溶菌酶LZM
    4 HSP的研究与水生生物耐高温品系选育
        4.1 HSP家族的研究
        4.2 Fer功能的研究和应用
        4.3 水生生物耐高温品系的研究
    5 本文的研究目的及意义
第二章高温胁迫对青岛皱纹盘鲍幼鲍生长和存活的影响
    1 材料与方法
        1.1 试验材料
        1.2 试验方法
    2 结果
        2.1 水温对皱纹盘鲍幼鲍生长速率的影响
        2.2 皱纹盘鲍幼鲍对不同温度的耐受性
    3 讨论
第三章高温胁迫对青岛皱纹盘鲍幼鲍免疫因子的影响
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 试验方法
    2 结果
        2.1 不同温度下皱纹盘鲍幼鲍肌肉组织中总蛋白含量
        2.2 高温胁迫对皱纹盘鲍幼鲍超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响
        2.3 高温胁迫对皱纹盘鲍幼鲍碱性磷酸酶（AKP）活性的影响
        2.4 高温胁迫对皱纹盘鲍幼鲍酸性磷酸酶（ACP）活性的影响
        2.5 高温胁迫对皱纹盘鲍幼鲍溶菌酶（LZM）活性的影响
    3 讨论
        3.1 高温胁迫对鲍肌肉组织中SOD活性的影响
        3.2 高温胁迫对鲍肌肉组织中磷酸酶AKP、ACP活性的影响
        3.3 高温胁迫对鲍肌肉组织中LZM活性的影响
第四章皱纹盘鲍不同群体耐高温性能比较
    1 材料与方法
        1.1 试验材料
        1.2 试验方法
        1.3 数据处理方法
    2 结果
        2.1 青岛皱纹盘鲍群体热激 1h后HSP70、HSP90在不同时间段的相对表达量
        2.2 青岛皱纹盘鲍群体热激 1h后Fer1、Fer2在不同时间段的相对表达量
        2.3 汕尾皱纹盘鲍群体热激 1h后HSP70、HSP90在不同时间段的相对表达量
        2.4 汕尾皱纹盘鲍群体热激 1h后Fer1、Fer2在不同时间段的相对表达量
        2.5 温度渐变下不同温度组两个群体死亡率结果
    3 讨论
        3.1 急性高温刺激对皱纹盘鲍HSP70、HSP90表达水平的影响
        3.2 急性高温刺激对皱纹盘鲍Fer1、Fer2表达水平的影响
        3.3 温度渐变条件下两个群体不同温度组死亡率结果讨论
第五章结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的论文及著作

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