碳酸盐碱度对脊尾白虾生长和繁殖的影响

发布时间：2020-10-09 10:42

【摘要】：本论文采用脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)为实验动物,研究碳酸盐碱度对其生长繁殖以及对生长繁殖相关的维甲酸X受体基因的影响,为脊尾白虾展开盐碱水养殖提供理论根据。本研究分为三个部分:第一部分:确定了脊尾白虾半致死碳酸盐碱度,确定其对脊尾白虾生长、繁殖的影响。结果表明:脊尾白虾碳酸盐碱度的96 h LD50为8.73 mmol/L。脊尾白虾的死亡率、特定生长率、抱卵率、孵化率、性腺发育及变态幼体成活率随碱度(3.5、5、6.5、8mmol/L)的上升而降低,碳酸盐碱度为3.5 mmol/L的胁迫组与对照组差别不显著(P≥0.05),碳酸盐碱度为5、6.5、8 mmol/L的胁迫组与对照组差异显著(P0.05);3.5 mmol/L低碳酸盐碱度对脊尾白虾生长繁殖影响不显著(P≥0.05),5、6.5、8 mmol/L的碳酸盐碱度胁迫组与对照组差异显著(P0.05)。研究结果表明在3.5 mmol/L低碳酸盐碱度下脊尾白虾可以正常的生长繁殖,在高于5mmol/L的碳酸盐碱度是对于生长繁殖影响较显著,不适于脊尾白虾的正常生长繁殖。第二部分:在5、6.5、8 mmol/L的碳酸盐碱度胁迫下进行酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物岐化酶(SOD)酶活测定。结果显示:不同浓度碳酸盐碱度胁迫后,脊尾白虾鳃和肝胰腺中酶活性随着时间的变化,呈先升高后降低的变化趋势;胁迫72 h后,ACP活性显著低于对照组(P0.05),AKP活力显著高于对照组(P0.05),而SOD活性在鳃中显著低于对照组(P0.05),肝胰腺中显著高于对照组(P0.05)。本研究结果表明,碳酸盐碱度胁迫下脊尾白虾可以通过调节免疫酶的活性更好地应对高碱环境,对于碳酸盐碱度具备较高的耐受性。第三部分:本研究进一步运用RACE克隆了脊尾白虾维甲酸X受体基因,命名为EcRXR基因。该基因cDNA全长1323 bp,开放阅读框(ORF)855 bp,5′端非编码区37 bp,3′非编码区431 bp。对氨基酸序列进行生物学分析可得,EcRXR基因编码的蛋白质是由284个氨基酸构成,分子量为30.918 kDa,PI(理论等电点)为6.788。推导的氨基酸序列Blastp结果显示,EcRXR与已知甲壳动物RXR的一致性为71%~90%,系统进化树分析表明,脊尾白虾EcRXR基因与日本沼虾(Macrobrachium nipponense)RXR基因的同源性最高。荧光定量结果显示,EcRXR基因在各组织中均有表达,而在眼柄相对表达量最高,鳃、胃中次之,血淋巴中最低。EcRXR基因在蜕皮周期中的表达规律表明,EcRXR基因在不同蜕皮时期存在明显变化,在眼柄、肝胰腺、胃和肠中整体呈现上升趋势,在鳃中呈现先下降后上升的趋势,在表其中呈现逐渐降低的趋势。通过分析EcRXR基因在温度、盐度和碳酸盐碱度胁迫进程中的表达规律发现:温度、盐度和碳酸盐碱度胁迫均可显著改变EcRXR基因在鳃和肝胰腺中的表达模式。温度胁迫下EcRXR在鳃中呈先上升后下降的表达趋势,肝胰腺中整体呈先上升后下降再上升再下降的表达趋势。盐度对鳃和肝胰腺的调控模式相同均呈先升高后下降的变化趋势。碳酸盐碱度胁迫后,EcRXR基因在鳃中的相对表达量整体上呈现出抑制效应;在肝胰腺中相对表达量在低碳酸盐碱度时呈现诱导作用,在高浓度的碳酸盐碱度条件下会呈现抑制效应。该研究结果说明EcRXR基因在脊尾白虾蜕皮发育、酶活性调节及渗透压调控中发挥者重要作用,为进一步研究脊尾白虾和其它甲壳动物维甲酸X受体基因的功能提供了重要信息。
【学位授予单位】：上海海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S917.4
【图文】：

图 2.1 碳酸盐碱度对脊尾白虾亲虾抱卵率的影响Fig.2.1 Effects of carbonate alkalinity on spawning rate of Exopalaemon carinicauda.不同字母代表处理间差异显著( P<0.05 )，下同Different letters meant significant different among treatments at 0.05 level. The same below

图 2.1 碳酸盐碱度对脊尾白虾亲虾抱卵率的影响Fig.2.1 Effects of carbonate alkalinity on spawning rate of Exopalaemon carinicauda.不同字母代表处理间差异显著( P<0.05 )，下同Different letters meant significant different among treatments at 0.05 level. The same below

上海海洋大学硕士学位论文著（P<0.05）；当达到 8 mmol/L 时，亲虾已无法抱卵（如图 2.3 中所示）。变态幼体存活率与孵化率呈变化趋势相同（图 2.4）。3.5 mmol/L 组与对照低不显著（P≥0.05）；6.5、8 mmol/L 组孵化出的幼体分别在 12、6 h 内全部。

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本文编号：2833589