牙鲆（Paralichthvs olivaceus）FerritinM的克

发布时间：2020-10-19 19:40

　　 在本研究中,我们通过双向电泳技术(2-DE)结合质谱技术(MALDI-TOF MS/MS)对牙鲆感染迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)12h后脾脏中蛋白质的差异表达情况进行了分析,最终鉴定得到了20种表达差异的蛋白,并对细菌感染后上调表达的铁蛋白(Ferritin)进行了深入的研究。铁蛋白是一种进化非常保守的蛋白,在维持机体内铁离子的稳态中起着至关重要的作用。本实验克隆鉴定了牙鲆的一个M型铁蛋白(PoFerM),并对其基因结构和生物学功能进行了分析。PoFerM由176个氨基酸残基组成,包含了两个保守的结构域:铁氧化酶位点(ferroxidase site)和铁水合位点(ferrihydrite nucleation site)。PoFerM的5’-UTR含有一个保守的茎环结构,即铁反应元件(iron response element,IRE),是铁蛋白表达的主要调控因子。正常生理条件下,PoFerM在牙鲆多个组织内都有表达,其中在血液中表达量最高。感染细菌后,PoFerM在头肾、脾和肝中的表达都显著上调。重组PoFerM蛋白(rPoFerM)表现出络合铁的能力和明显的抑菌能力。对PoFerM的铁氧化酶位点和铁水合位点的两个关键氨基酸进行突变,得到重组的突变蛋白rPoFerMM。rPoFerMM没有明显的铁络合能力和抑菌能力。研究还发现rPoFerM可以减少芬顿反应产生的羟基自由基对质粒DNA和牙鲆PBL细胞的氧化损伤,而rPoFerMM则没有这种能力。此外,相比表达rPoFerMM的大肠杆菌和正常的大肠杆菌,表达rPoFerM的大肠杆菌表现出更强的过氧化氢能力。这些结果表明PoFerM是一种铁离子螯合剂,并且具有抑菌和抗氧化能力,而这些能力依赖于保守的铁氧化酶位点和铁水合位点。
【学位单位】：中国科学院研究生院(海洋研究所)
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2015
【中图分类】：S917.4
【部分图文】：

爱德华氏菌、海豚链球菌、哈氏弧菌、淋巴囊肿病毒、虹彩病毒是牙鲆的主要原，且致死率非常高 [1-5]。如图 1-1 所示，即为牙鲆感染迟缓爱德华氏菌后现出的一些外部体征。

第一章 前言 存在于细胞内，但也有少部分存在于血铁蛋白，只不过对其功能研究较少。动植能异常就可能导致机体死亡[51-55]。类型 所示，去铁铁蛋白（apoferritin）复合体球形，里面最多可以容纳 4500 三价铁

铁蛋白亚基的二级结构示意图A、B、C、D为长α螺旋，E为短α螺旋
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1 王晶晶;牙鲆（Paralichthvs olivaceus）FerritinM的克隆、表达及功能的研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2015年

本文编号：2847636