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基于RAD-seq技术的南方鲇高密度遗传连锁图谱构建

发布时间:2020-12-09 18:10
  南方鲇(Silurus meridionalis)又称大口鲇,隶属于鲇形目(Siluriformes)、鲇科(Siluridae),是我国特有的一种重要经济鱼类。目前关于南方鲇的研究大多集中在繁殖生物学、比较解剖学、生理生态学等方面,而遗传学方面的研究却相对较少,更没有其遗传连锁图谱的相关报道。本研究借助RAD-seq技术,开发了大量的SNP标记并构建了南方鲇高密度遗传连锁图谱,这将为南方鲇数量性状定位、比较基因组、经济性状相关遗传机制的解析、分子标记辅助选育等研究提供有力工具;同时也为进一步从基因组水平上解析鲇形目鱼类生长、发育、繁殖、系统进化、环境适应机制等生物学问题提供重要基础数据。主要研究内容如下:1、本研究以两尾野生南方鲇作为亲本,以其繁殖的100尾子代个体(F1代)作为作图群体,对总共102个个体(父母本各一尾,100尾F1代个体)进行RAD测序。选取EcoRI限制性内切酶对作图群体基因组进行酶切,然后再构建RAD文库及高通量测序,以此来大批量的筛选SNP标记。本研究根据亲本的RAD数据总共筛选出了77,634个高质量的多态SNP位点,其中42,447个SNP来自于碱基间的... 

【文章来源】:西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:98 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
第1章 绪论
    1 遗传图谱构建概述
        1.1 遗传图谱构建的理论基础
        1.2 遗传图谱构建方法
        1.3 遗传图谱应用
    2 单核苷酸多态性(SNP)及其应用
        2.1 SNP的起源和突变机制
        2.2 SNP的优势
        2.3 SNP的应用
    3 简化基因组测序技术概述
        3.1 降低代表性测序
        3.2 RAD测序
        3.3 改进的RAD测序技术
        3.4 降低覆盖度测序分型
    4 鱼类遗传图谱构建研究进展
        4.1 模式鱼类遗传图谱研究
        4.2 养殖鱼类遗传图谱
        4.3 鲇形目鱼类遗传图谱
    5 本研究目的和意义
第2章 南方鲇高通量SNP标记的开发及验证
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 作图群体的构建
        2.2 基因组DNA提取
        2.3 DNA浓度与纯度的检测
        2.4 RAD测序文库的构建及测序
        2.5 RAD测序数据的预处理和SNP分型
        2.6 Sanger测序验证分型准确性
    3 结果
        3.1 作图群体的选择与基因组DNA的提取
        3.2 RAD测序及初始数据的过滤
        3.3 SNP识别及基因型分型
        3.4 Sanger测序验证分型准确性
    4 讨论
        4.1 利用RAD测序技术开发SNP标记
        4.2 Sanger测序验证分型准确性
        4.3 利用高通量测序技术进行标记开发的策略
    5 小结
第3章 南方鲇高密度遗传图谱的构建及利用JOINMAP 4.0 对遗传图谱的验证
    第1节 南方鲇高密度遗传图谱的构建
        1 引言
        2 材料与方法
            2.1 实验材料
            2.2 实验方法
        3 结果
            3.1 高密度遗传图谱的构建
            3.2 基因组长度估计和图谱覆盖度估计
        4 讨论
        5 小结
    第2节 利用JOINMAP 4.0 对遗传图谱的验证
        1 引言
        2 材料与方法
            2.1 实验材料
            2.2 实验方法
        3 结果
            3.1 经标记筛选后得到的遗传图谱
            3.2 用JoinMap作图得到的遗传图谱
        4 讨论
            4.1 经标记筛选后的遗传图谱与之前所构遗传图谱的比较
            4.2 两种作图软件所构遗传图谱的比较
        5 小结
结论与展望
    1 研究结论
    2 展望
参考文献
缩略表
致谢
在校期间科研实践情况


【参考文献】:
期刊论文
[1]南方鲇幼鱼运动代谢的个体变异和重复性及其饥饿响应[J]. 曾令清,彭韩柳依,王健伟,庞旭,曹振东,付世建.  水产学报. 2015(01)
[2]镜鲤体长性状的QTL定位分析[J]. 张天奇,张晓峰,谭照君,曹柱,王宣朋,李文升,储志远,孙效文.  遗传. 2011(11)
[3]大口鲇微卫星标记在三个鲇形目鱼类种群间适用性研究[J]. 吴旭东,连总强,侯玉霞,李力,肖伟.  水生生物学报. 2011(04)
[4]黄颡鱼遗传图谱构建及生长相关性状的QTL定位[J]. 葛学亮,尹洪滨,毕冰,孙中武.  水产学报. 2010(02)
[5]南方鲇和鲇线粒体DNA 16SrRNA基因片段的RFLP对比分析[J]. 王庆容,王乾兴,李学英,王大忠.  遵义师范学院学报. 2008(01)
[6]水产养殖动物遗传连锁图谱及QTL定位研究进展[J]. 常玉梅,孙效文.  动物学研究. 2006(05)
[7]饲料碳水化合物水平对南方鲇生长的影响[J]. 付世建,谢小军.  水生生物学报. 2005(04)
[8]分子标记的种类及其发展[J]. 黎裕,贾继增,王天宇.  生物技术通报. 1999(04)
[9]南方鲇继饥饿后的恢复生长[J]. 邓利,张波,谢小军.  水生生物学报. 1999(02)
[10]南方鲇的繁殖生物学研究:性腺发育及周年变化[J]. 张耀光,谢小军.  水生生物学报. 1996(01)

博士论文
[1]栉孔扇贝(Chlamys farreri)高密度图谱构建和基因组框架图绘制[D]. 付晓腾.中国海洋大学 2014

硕士论文
[1]黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)SRAP遗传图谱的构建[D]. 辛文婷.东北林业大学 2009



本文编号:2907272

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