大菱鲆脑细胞系和精巢细胞系的建立与鉴定

发布时间：2020-12-11 11:03

　　鱼类细胞系作为一种重要的研究工具已经被广泛地应用于病毒学、环境毒理学、鱼类资源保护与遗传育种、内分泌学、发育生物学以及生理学等研究中[1]。自Wolf和Quimby（1962）建立的第一个鱼类细胞系-虹鳟鱼生殖腺细胞系RTG-2以来,迄今已建立了包括淡水鱼类、海水鱼类和溯河洄游性鱼类的不同组织来源包括鳍条、皮肤、腮、肝脏、肾脏、脾脏、性腺、胚胎等的细胞系超过400余株。相较于活体鱼,鱼类细胞系作为实验体系有着如下的优点:不仅材料容易获得,降低了实验成本,还具有重复性好,实验条件可以精确控制等优势。因此,鱼类细胞系不仅对于基础研究,还是对于实际应用都具有重要应用价值。大菱鲆属辐鳍鱼纲（Actinopterygii）、鲽形目（Pleuronectiformes）、鲽亚目（Pleuronectoidei）、菱鲆科（Scophthalmidae）,是当前欧洲和亚洲被广泛养殖的经济鱼类之一。目前见诸报道的大菱鲆细胞系有胚胎细胞系、鳍细胞系、头肾细胞系、心脏细胞系,尚未见其脑细胞系和精巢细胞系建立的报道。本研究通过组织块培养法,以大菱鲆脑组织为材料,建立了大菱鲆脑细胞系（S.maximus bra... 

【文章来源】：上海海洋大学上海市

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1.1 鱼类细胞培养技术概述
        1.1.1 鱼类细胞培养发展概况
        1.1.2 鱼类细胞培养培主要技术简介
    1.2 鱼类细胞系在各领域的应用
        1.2.1 鱼类病毒的分离与鉴定
        1.2.2 鱼类细胞系在环境污染物检测及毒理学的应用
        1.2.3 鱼类基因功能分析的应用
        1.2.4 内分泌学
        1.2.5 鱼类种质资源保护
        1.2.6 鱼类细胞培养在其他方面的应用
第二章 大菱鲆脑细胞系的建立与鉴定
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 实验试剂和仪器
        2.2.3 原代培养
        2.2.4 传代培养
        2.2.5 不同温度对细胞生长的影响
        2.2.6 核型分析
        2.2.7 细胞转染
        2.2.8 线粒体细胞色素C氧化酶I基因测序和比对分析
    2.3 实验结果
        2.3.1 原代培养与传代培养
        2.3.2 不同温度对细胞生长的影响
        2.3.3 核型分析
        2.3.4 细胞转染
        2.3.5 线粒体细胞色素C氧化酶I基因测序和比对分析
    2.4 讨论
第三章 大菱鲆精巢细胞系的建立与鉴定
    3.1 引言
    3.2 材料和方法
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 实验试剂和仪器
        3.2.3 原代培养
        3.2.4 传代培养
        3.2.5 不同温度对细胞生长的影响
        3.2.6 核型分析
        3.2.7 细胞转染
        3.2.8 线粒体细胞色素C氧化酶I基因测序和比对分析
    3.3 实验结果
        3.3.1 原代培养与传代培养
        3.3.2 不同温度对细胞生长的影响
        3.3.3 核型分析
        3.3.4 细胞转染
        3.3.5 线粒体细胞色素C氧化酶I基因测序和比对分析
    3.4 讨论
第四章 牙鲆脾脏、肝脏、头肾离体培养的初步研究
    4.1 引言
    4.2 材料和方法
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 实验试剂和仪器
        4.2.3 原代培养
        4.2.4 传代培养
    4.3 实验结果
    4.4 讨论
参考文献
致谢



本文编号：2910420