脂多糖及铜离子胁迫下厚壳贻贝补体C3分子表达研究

发布时间：2021-01-31 05:53

　　补体系统作为一个重要的人体先天免疫系统,在防御宿主病原体方面,发挥着不可替代的功能。补体C3是补体系统中最关键的分子,其作用主要体现在免疫调节,免疫防疫以及免疫病理学方面。补体C3分子在一些无脊椎动物中已被发现,但在双壳类的研究还有待进一步的探索。厚壳贻贝（Mytilus coruscus）被视为中国最重要的经济类贻贝物种之一,广泛分布于黄海,朝鲜半岛及日本北海道水域。近年来,厚壳贻贝正在遭受由各种环境变化引起的疾病危害,其中包括各种生物压力（细菌和病毒）和非生物类压力（热休克或冷休克,高渗压力,食物缺乏,氧含量降低,重金属浓度,有机或无机类化学物质）,这种种因素最终导致厚壳贻贝严重的经济损失。基于当前厚壳贻贝的养殖背景,本文通过克隆厚壳贻贝补体C3 MC-C3基因c DNA全长及脂多糖刺激下,铜离子胁迫下厚壳贻贝组织内补体C3 MC-C3表达情况分析,旨在填补补体C3基因在厚壳贻贝中的研究空白,同时为厚壳贻贝面对细菌感染及海洋污染现状对养殖技术的改进等方面提供应用型的指导。具体研究成果如下:本文采用RACE技术,首次获得了厚壳贻贝MC-C3基因c DNA全长,并对其功能域,生物学信息... 

【文章来源】：浙江海洋大学浙江省

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 文献综述
    1.1 补体系统概述
    1.2 补体C3概述
        1.2.1 补体C3基因和分子结构特征
        1.2.2 补体C3功能
            1.2.2.1 补体C3的生物学活性
            1.2.2.2 C3相关疾病
    1.3 厚壳贻贝概述
        1.3.1 厚壳贻贝的生物学特性
        1.3.2 厚壳贻贝的营养成分
        1.3.3 养殖现状
    1.4 研究目的与意义
        1.4.1 研究目的
        1.4.2 研究意义
第二章 厚壳贻贝补体C3基因cDNA克隆表达
    2.1 实验材料
        2.1.1 样品材料
        2.1.2 实验试剂及仪器
    2.2 厚壳贻贝总RNA提取
        2.2.1 前期准备
        2.2.2 总RNA提取
        2.2.3 RNA逆转录
        2.2.4 厚壳贻贝C3核心序列扩增
    2.3 RACE获得C3基因cDNA的全长
    2.4 PCR产物的纯化与克隆
    2.5 生物信息分析
    2.6 结果与讨论
        2.6.1 厚壳贻贝C3基因克隆及分子特征分析
        2.6.2 厚壳贻贝C3系统进化树分析
第三章 厚壳贻贝C3基因组织特异性表达
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验样品
        3.1.2 实验试剂与仪器
            3.1.2.1 实验试剂
            3.1.2.2 实验仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 厚壳贻贝组织总RNA提取
        3.2.2 cDNA模板合成
        3.2.3 荧光定量PCR引物设计
        3.2.4 实时荧光定量
        3.2.5 荧光数据分析
    3.3 结果与讨论
第四章 脂多糖及铜离子胁迫下厚壳贻贝C3基因表达
    4.1 实验材料
        4.1.1 样品材料
        4.1.2 实验仪器及试剂
    4.2 实验方法
        4.2.1 铜离子胁迫
        4.2.2 脂多糖刺激
        4.2.3 样品处理
        4.2.4 荧光定量PCR
        4.2.5 荧光数据分析
    4.3 结果分析与讨论
结论
致谢
在读期间发表的学术论文及研究成果
参考文献



本文编号：3010319