益生芽孢杆菌对草鱼肠上皮细胞凋亡的影响
发布时间：2021-02-06 01:31
鱼类细菌性疾病一直是限制水产养殖业发展的重要因素之一,其中嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）是淡水中一种常见的条件致病菌,而利用益生菌替代抗生素来防治疾病在养殖业上得到高度关注。本实验室从草鱼（Ctenopharyngodon idella）肠道中分离出一株枯草芽孢杆菌（Bacillus Subtllis）Ch9,发现其对草鱼的生长,免疫等有良好的益生作用。本文主要研究了Ch9菌株对感染嗜水气单胞菌的草鱼肠道细胞凋亡的影响。分析了草鱼口灌枯草芽孢杆菌3天后,用嗜水气单胞菌口灌攻毒的结果。实验分为3组:对照组（Control）,第1、3、5、6天口灌磷酸缓冲液（PBS）;Ah组（A.hydrophila group）,第1、3、5天口灌PBS后第6天口灌嗜水气单胞菌;Bs+Ah组（B.Subtllis+A.hydrophila group）,第1、3、5天口灌枯草芽孢杆菌Ch9后第6天口灌嗜水气单胞菌。收集嗜水气单胞菌攻毒后0h,12h,24h,48h,72h和96h的草鱼肠道组织,应用原位末端标记法（TUNEL）测定细胞凋亡,实时荧光定量PCR检测caspase-...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
口灌枯草芽孢杆菌对受嗜水气单胞菌感染的草鱼肠上皮细胞凋亡的影响
图 2 口灌枯草芽孢杆菌对受嗜水气单胞菌感染的草鱼肠上皮细胞的 TUNEL 阳性细胞率的影响Fig. 2 Effect of orally Bacillus subtilis on the rate of intestinal TUNEL-positive cells ofCtenopharyngodon idellus challenged with Aeromonas hydrophilaControl：对照组口灌 PBS；A.hydrophila：嗜水气单胞菌攻毒组；B. subtilis + A.hydrophila：枯草芽孢杆菌预处理后攻毒组，在 0h，12h，24h，48h，72h，96h TUNEL 阳性细胞的比例，数据表示为平均值±标准差，P＜0.05Control: oral PBS; A.hydrophila: challeged with Aeromonas hydrophila; B. subtilis + A.hydrophila:pre-treated with B. subtilisand challeged with Aeromonas hydrophila. The rate of TUNEL-positive cells at 0h, 12h,24h, 48h, 72h and 96h, Data shown represent mean ± SD, P＜0.053.1.2 Caspase-3，caspase-8 和 bcl-2 基因表达口灌枯草芽孢杆菌的草鱼，在嗜水气单胞菌攻毒后 caspase-3，caspase-8 和bcl-2 的基因表达详见图 3。实时荧光定量 PCR 分析 caspase-3，caspase-8 和 bcl-2的 mRNA 转录水平，与对照组相比，受嗜水气单胞菌感染的两组草鱼肠细胞的
22 3 口灌枯草芽孢杆菌对受嗜水气单胞菌感染的草鱼肠上皮细胞的 caspase-3，caspa和 bcl-2 基因转录水平的影响Fig.3 Effect of orally Bacillus subtilis on intestinal caspase-3, caspase-8 and bcl-2 genrelative transcriptional level of Ctenopharyngodon idellus challenged with Aeromonahydrophila）caspase-3 基因在攻毒后 0h，12h，24h，48h，72h，96h 的相对表达量；（b）caspase-8 基因在攻12h，24h，48h，72h，96h 的相对表达量；（c）bcl-2 基因在攻毒后 0h，12h，24h，48h，72h，9相对表达量。数据表示为平均值±标准差，P＜0.05After challeged with Aeromonas hydrophila at 0h, 12h, 24h, 48h, 72h and 96h , (a) Relative expression opase-3 (b) Relative expression of caspase-8 (c) Relative expression of bcl-2. The results shown are means P＜0.05
【参考文献】：
期刊论文
[1]益生芽孢杆菌对草鱼肠黏膜结构的保护作用[J]. 黄灿,张忠海,吴淑勤,张丁,李思思,陈孝煊,吴志新. 水生生物学报. 2017(04)
[2]急性热应激对草鱼肾细胞的影响[J]. 童娜,尹晓燕,李大鹏,汤蓉. 华中农业大学学报. 2014(04)
[3]嗜水气单胞菌防控技术研究进展[J]. 周宇,周秋白. 生物灾害科学. 2012(02)
本文编号：3019922
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
口灌枯草芽孢杆菌对受嗜水气单胞菌感染的草鱼肠上皮细胞凋亡的影响
图 2 口灌枯草芽孢杆菌对受嗜水气单胞菌感染的草鱼肠上皮细胞的 TUNEL 阳性细胞率的影响Fig. 2 Effect of orally Bacillus subtilis on the rate of intestinal TUNEL-positive cells ofCtenopharyngodon idellus challenged with Aeromonas hydrophilaControl：对照组口灌 PBS；A.hydrophila：嗜水气单胞菌攻毒组；B. subtilis + A.hydrophila：枯草芽孢杆菌预处理后攻毒组，在 0h，12h，24h，48h，72h，96h TUNEL 阳性细胞的比例，数据表示为平均值±标准差，P＜0.05Control: oral PBS; A.hydrophila: challeged with Aeromonas hydrophila; B. subtilis + A.hydrophila:pre-treated with B. subtilisand challeged with Aeromonas hydrophila. The rate of TUNEL-positive cells at 0h, 12h,24h, 48h, 72h and 96h, Data shown represent mean ± SD, P＜0.053.1.2 Caspase-3，caspase-8 和 bcl-2 基因表达口灌枯草芽孢杆菌的草鱼，在嗜水气单胞菌攻毒后 caspase-3，caspase-8 和bcl-2 的基因表达详见图 3。实时荧光定量 PCR 分析 caspase-3，caspase-8 和 bcl-2的 mRNA 转录水平，与对照组相比，受嗜水气单胞菌感染的两组草鱼肠细胞的
22 3 口灌枯草芽孢杆菌对受嗜水气单胞菌感染的草鱼肠上皮细胞的 caspase-3，caspa和 bcl-2 基因转录水平的影响Fig.3 Effect of orally Bacillus subtilis on intestinal caspase-3, caspase-8 and bcl-2 genrelative transcriptional level of Ctenopharyngodon idellus challenged with Aeromonahydrophila）caspase-3 基因在攻毒后 0h，12h，24h，48h，72h，96h 的相对表达量；（b）caspase-8 基因在攻12h，24h，48h，72h，96h 的相对表达量；（c）bcl-2 基因在攻毒后 0h，12h，24h，48h，72h，9相对表达量。数据表示为平均值±标准差，P＜0.05After challeged with Aeromonas hydrophila at 0h, 12h, 24h, 48h, 72h and 96h , (a) Relative expression opase-3 (b) Relative expression of caspase-8 (c) Relative expression of bcl-2. The results shown are means P＜0.05
【参考文献】：
期刊论文
[1]益生芽孢杆菌对草鱼肠黏膜结构的保护作用[J]. 黄灿,张忠海,吴淑勤,张丁,李思思,陈孝煊,吴志新. 水生生物学报. 2017(04)
[2]急性热应激对草鱼肾细胞的影响[J]. 童娜,尹晓燕,李大鹏,汤蓉. 华中农业大学学报. 2014(04)
[3]嗜水气单胞菌防控技术研究进展[J]. 周宇,周秋白. 生物灾害科学. 2012(02)
本文编号：3019922
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