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渗透压应激对金钱鱼肾细胞的影响及抗菌肽铁调素的研究

发布时间:2021-02-07 01:36
  金钱鱼(Scatophagus argus)是一种盐度适应性极强的广盐性硬骨鱼类,尤其对急性盐度胁迫有极强的耐受力,使其非常适合用于研究硬骨鱼类渗透压调节机制。研究这种调节机制不但可以补充完善鱼类细胞生理学、发育生物学等基础研究,同时,掌握鱼类渗透压调节方式和机理,可以为鱼类盐度训养提供理论依据,对海水经济鱼类的淡化养殖非常有意义。1.为更好地了解鱼类的渗透调节机制及能更精确地分析鱼类适应渗透压的特性,建立了金钱鱼肾细胞系(SK)并传代至40代。从细胞水平对金钱鱼肾细胞在渗透压应激作用下的调节机制做进一步分析。金钱鱼肾细胞大都为成纤维样细胞,具有正常的二倍体核型(2n=48)。金钱鱼低渗适应细胞系(SK-la)诱导产生于低渗培养基(150 m Osm)。我们利用显微镜观察、流式细胞仪和Na+/K+-ATP酶活检测,探讨不同渗透压(150,300和450 m Osm)对广盐性硬骨鱼类金钱鱼肾细胞SK、SK-la和淡水硬骨鱼类草鱼肾细胞CIK形态、细胞增殖、细胞体积变化及细胞损伤的影响。SK细胞在低渗培养基(150 m Osm)中形态明显变小,且... 

【文章来源】:上海海洋大学上海市

【文章页数】:64 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

渗透压应激对金钱鱼肾细胞的影响及抗菌肽铁调素的研究


不同渗透压条件处理SK细胞、CIK细胞和SK-la细胞24小时

阳离子蛋白,前肽,信号肽,等电点


corresponding to the predicted signal peptide is boxed, whereas the prodomain region is in cursiveletters and the mature peptides shaded grey. Nucleotides and amino acids are numbered on the left ofthe sequences.SA-hepcidin1 和 SA-hepcidin2 都含有三个区域:信号肽(24 aa),前结构域(44aa)和成熟肽(SA-hepcidin1 为 26 aa, SA-hepcidin2 为 24 aa)。SA-hepcidin1 和SA-hepcidin2 信号肽剪切位点预测在 Ala24和 Val25之间,SA-hepcidin1 的前肽剪切位点预测在 Arg64和 Gln65之间,SA-hepcidin2 的前肽剪切位点预测 Arg64和 Asn65之间。SA-hepcidin1 多肽的理论等电点(PI)为 8.75,为阳离子蛋白;SA-hepcidin2多肽的理论等电点(PI)为 8.23,也为阳离子蛋白。SA-hepcidin1 和 SA-hepcidin2 的氨基酸序列比对结果都有八个相对保守的半胱氨酸残基(图 2-2),SA-hepcidin1 和 SA-hepcidin2 的一致性和相似性分别为 62 %和 72 %,SA-hepcidin1 N 端序列为(Q-S-H-L-S-M),与假定的铁离子调控序列相似(Q-S/I-H-L/I-S/A-L)[84],而 SA-hepcidin2 没有这段序列。

氨基酸序列,哺乳动物,氨基酸序列,比目鱼


37图 2-3 金钱鱼铁调素与一些鱼及哺乳动物铁调素的氨基酸序列比对。基因库登陆号如下:海鲷-1(BAH03289.1),海鲷-2(BAH03290.1),海鲷-3(BAH03291.1), 海鲷-4(BAH03292.1),大菱鲆-1(CAJ34592.1), 大菱鲆-2(AFE88622.1),比目鱼-1 (AAV37453.1), 比目鱼-2(AAV37454.1),河豚鱼(XP_003980066.1),三文鱼(AAO85553.1),斑马鱼(AAN10302.1),鼠(NP_115930.1),猴子(XP_001094273.1),人(NP_066998.1)。

【参考文献】:
期刊论文
[1]金钱鱼肾细胞系的建立及生长特性研究[J]. 张莹莹,梁雪梅,曾文刚,张俊彬.  海洋与湖沼. 2014(03)
[2]硬骨鱼类渗透调控的研究进展[J]. 刘珊,李冰,张成锋,朱健.  安徽农业科学. 2011(20)
[3]斑点叉尾肾脏组织细胞系的建立及其生物学特性[J]. 曾令兵,李晓莉,张林,徐进,张燕.  中国水产科学. 2009(01)
[4]Detection of Grass Carp Hemorrhage Virus (GCHV) from Vietnam and Comparison with GCHV Strain from China[J]. 张奇亚.  High Technology Letters. 2003(02)
[5]草鱼肾组织细胞系CIK的建立及其生物学特性[J]. 左文功,钱华鑫,许映芳,杜森英,杨先乐.  水产学报. 1986(01)



本文编号:3021427

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