一株鲤疱疹病毒Ⅱ型的致病性分析及其对异育银鲫的温度敏感特性研究
发布时间：2021-03-29 09:00
鲫鱼（Carassius auratus gibelio）是我国的主要经济鱼种之一,在我国淡水养殖渔业结构中占据较大的比例。在2012年江苏省盐城地区爆发了一种由鲤疱疹病毒II型引起的鲫造血器官坏死症,该病传播快,致死率高,严重影响我国鲫鱼养殖业的健康发展。流行病学调查显示,CyHV-2的感染与水温有一定的关系,多发于春秋两季,且随着温度的变化病毒引发的症状也不尽相同。然而,温度对CyHV-2感染鲫鱼的影响及其机制尚不清楚。本论文从患病异育银鲫中分离到一株CyHV-2,分析了不同温度对CyHV-2感染异育银鲫的影响,并对差异响应基因TNF-α在大肠杆菌中进行了原核表达,主要研究内容如下:（1）从盐城市大丰区某养殖场采集到一例患病异育银鲫,病鱼呈现下颌、鳍基充血,鳃部肿胀出血等症状,组织切片显示脾、肾等组织细胞出现严重的变性、坏死的病理变化。常规PCR检测表明病鱼脾脏DNA为CyHV-2阳性,BLAST比对显示,PCR扩增产物与GenBank中公布的CyHV-2的序列相似度为100%,表明该病毒为一株CyHV-2分离株,我们将其命名为CyHV-2 YC17株。通过系统进化树发现,YC17...
【文章来源】：大连海洋大学辽宁省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
患病异育银鲫的症状检查Fig.2-1Examinationofsymptomsofcarassiusauratusgibelio
图 2-1 患病异育银鲫的症状检查Fig. 2-1 Examination of symptoms of carassius auratus gibelioa) 患病鱼体表有出血现象； b）病鱼肝胰腺苍白，脾脏肿大，腹腔存在明显腹水a)Bleeding on the surface of sick fish; b)The diseased fish liver and pancreas are pale, thspleen is swollen, and there is obvious ascites in the abdominal cavity.2 组织病理学观察肾脏组织由表面的被膜及内层的实质构成，取濒死病鱼及健康鱼肾脏做组织切片，在显微镜下进行观察，可见 CyHV-2 感染鱼体后，肾细胞边界不清性增强，间质内炎性细胞浸润，上皮细胞呈浑浊肿胀，间质细胞伴有变性的病理变化。
图 2-3 病鱼的 PCR 鉴定图 2-3 病鱼的 PCR 鉴定Fig. 2-3 Identification of diseased fish by PCRM：DNAmarker，lane1：CyHV-2 阳性样品 DNA，lane2 ：健康鱼脾脏 DNA，lane病鱼脾脏 DNAM: DNAmarker, lane1: CyHV-2 positive sAmple DNA, lane2: healthy fish spleen Dlane3-7: diseased fish spleen DNA将此次分离到的病毒株命名为 CyHV-2 YC17 将其测序序列与 GenBankCyHV-2 分离株序列进行同源性比对。Blast 结果显示，YC17 株核苷酸序HV-2 分离株 BY-JS1、YZ-01、ZRX001 等相似性均为 99.1%以上，并构育进化树。
【参考文献】：
期刊论文
[1]鲤疱疹病毒2型研究进展[J]. 袁锐,陈静,刘训猛,吴亚锋,王晶晶,方苹. 水产学杂志. 2019(01)
[2]国内鲫鱼产业发展现状与对策探讨[J]. 胡文娟,李艳芳,甘江英. 渔业致富指南. 2017(10)
[3]鲤疱疹病毒2型ORF5截短基因的克隆表达及免疫原性研究[J]. 廖红,林华,郝中香,佘容,陈世界,杨苗,陈珍容,薛昌华,赵珊,韩国全,曹三杰,颜其贵. 中国兽医科学. 2016(11)
[4]温度对北极红点鲑生长及非特异性免疫指标的影响[J]. 刘克明,夏苏东,尤宏争,胡华,李楠,刘义,冯守明. 经济动物学报. 2016(04)
[5]水霉病的防治[J]. 金艳. 齐鲁渔业. 2016 (05)
[6]异育银鲫病毒性鳃出血病预防与控制技术[J]. 吴霆,朱春艳,王瑶,薛中仪,管杰,孟庆国,王文. 中国水产. 2015(10)
[7]酵母多糖对受免异育银鲫免疫保护力的增强作用[J]. 陈昌福,方苹,胡明,陈辉,李景,袁锐,刘训猛. 当代水产. 2015(07)
[8]水霉病的处理建议[J]. 刘志玲,唐启胜. 科学养鱼. 2015(03)
[9]异育银鲫几种黏孢子虫病及其防控技术研究概况[J]. 陈昌福,曹丽敏,方苹. 当代水产. 2014(07)
[10]异育银鲫鳃出血病流行病学调查和研究[J]. 吴霆,丁正峰,朱春艳,薛中仪,顾伟,孟庆国,王文. 水产科学. 2014(05)
博士论文
[1]CyHV-2引起的异育银鲫鳃出血病组织病理及致病机理研究[D]. 吴霆.南京师范大学 2018
硕士论文
[1]饲料添加胆汁酸对异育银鲫生长、氧化损伤修复、内源胆汁酸代谢以及CyHV-2免疫保护作用的影响[D]. 何杰.苏州大学 2018
[2]鲤疱疹病毒II型微载体培养技术与灭活疫苗浸泡免疫效果研究[D]. 王维玲.上海海洋大学 2017
[3]射阳地区异育银鲫大红鰓病与鲫造血器官坏死病病原研究[D]. 蒋新益.上海海洋大学 2016
[4]鲫感染鲤疱疹病毒Ⅱ的组织病理学研究[D]. 姚卓凤.华中农业大学 2015
[5]凡纳滨对虾免疫基因克隆与合并感染条件下的免疫应答[D]. 王刚.广东海洋大学 2015
[6]江苏地区鲫出血病病原的分离、鉴定及检测方法研究[D]. 王璐.南京农业大学 2012
[7]异育银鲫皮肤粘孢子虫病的病原和组织病理研究[D]. 竹攸汀.上海海洋大学 2012
[8]CA16在不同温度与pH条件下的增殖动力学初探[D]. 刘尚允.北京协和医学院 2011
[9]环境胁迫对养殖锯缘青蟹主要免疫因子的影响[D]. 周素琴.中国海洋大学 2006
本文编号：3107300
【文章来源】：大连海洋大学辽宁省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
患病异育银鲫的症状检查Fig.2-1Examinationofsymptomsofcarassiusauratusgibelio
图 2-1 患病异育银鲫的症状检查Fig. 2-1 Examination of symptoms of carassius auratus gibelioa) 患病鱼体表有出血现象； b）病鱼肝胰腺苍白，脾脏肿大，腹腔存在明显腹水a)Bleeding on the surface of sick fish; b)The diseased fish liver and pancreas are pale, thspleen is swollen, and there is obvious ascites in the abdominal cavity.2 组织病理学观察肾脏组织由表面的被膜及内层的实质构成，取濒死病鱼及健康鱼肾脏做组织切片，在显微镜下进行观察，可见 CyHV-2 感染鱼体后，肾细胞边界不清性增强，间质内炎性细胞浸润，上皮细胞呈浑浊肿胀，间质细胞伴有变性的病理变化。
图 2-3 病鱼的 PCR 鉴定图 2-3 病鱼的 PCR 鉴定Fig. 2-3 Identification of diseased fish by PCRM：DNAmarker，lane1：CyHV-2 阳性样品 DNA，lane2 ：健康鱼脾脏 DNA，lane病鱼脾脏 DNAM: DNAmarker, lane1: CyHV-2 positive sAmple DNA, lane2: healthy fish spleen Dlane3-7: diseased fish spleen DNA将此次分离到的病毒株命名为 CyHV-2 YC17 将其测序序列与 GenBankCyHV-2 分离株序列进行同源性比对。Blast 结果显示，YC17 株核苷酸序HV-2 分离株 BY-JS1、YZ-01、ZRX001 等相似性均为 99.1%以上，并构育进化树。
【参考文献】：
期刊论文
[1]鲤疱疹病毒2型研究进展[J]. 袁锐,陈静,刘训猛,吴亚锋,王晶晶,方苹. 水产学杂志. 2019(01)
[2]国内鲫鱼产业发展现状与对策探讨[J]. 胡文娟,李艳芳,甘江英. 渔业致富指南. 2017(10)
[3]鲤疱疹病毒2型ORF5截短基因的克隆表达及免疫原性研究[J]. 廖红,林华,郝中香,佘容,陈世界,杨苗,陈珍容,薛昌华,赵珊,韩国全,曹三杰,颜其贵. 中国兽医科学. 2016(11)
[4]温度对北极红点鲑生长及非特异性免疫指标的影响[J]. 刘克明,夏苏东,尤宏争,胡华,李楠,刘义,冯守明. 经济动物学报. 2016(04)
[5]水霉病的防治[J]. 金艳. 齐鲁渔业. 2016 (05)
[6]异育银鲫病毒性鳃出血病预防与控制技术[J]. 吴霆,朱春艳,王瑶,薛中仪,管杰,孟庆国,王文. 中国水产. 2015(10)
[7]酵母多糖对受免异育银鲫免疫保护力的增强作用[J]. 陈昌福,方苹,胡明,陈辉,李景,袁锐,刘训猛. 当代水产. 2015(07)
[8]水霉病的处理建议[J]. 刘志玲,唐启胜. 科学养鱼. 2015(03)
[9]异育银鲫几种黏孢子虫病及其防控技术研究概况[J]. 陈昌福,曹丽敏,方苹. 当代水产. 2014(07)
[10]异育银鲫鳃出血病流行病学调查和研究[J]. 吴霆,丁正峰,朱春艳,薛中仪,顾伟,孟庆国,王文. 水产科学. 2014(05)
博士论文
[1]CyHV-2引起的异育银鲫鳃出血病组织病理及致病机理研究[D]. 吴霆.南京师范大学 2018
硕士论文
[1]饲料添加胆汁酸对异育银鲫生长、氧化损伤修复、内源胆汁酸代谢以及CyHV-2免疫保护作用的影响[D]. 何杰.苏州大学 2018
[2]鲤疱疹病毒II型微载体培养技术与灭活疫苗浸泡免疫效果研究[D]. 王维玲.上海海洋大学 2017
[3]射阳地区异育银鲫大红鰓病与鲫造血器官坏死病病原研究[D]. 蒋新益.上海海洋大学 2016
[4]鲫感染鲤疱疹病毒Ⅱ的组织病理学研究[D]. 姚卓凤.华中农业大学 2015
[5]凡纳滨对虾免疫基因克隆与合并感染条件下的免疫应答[D]. 王刚.广东海洋大学 2015
[6]江苏地区鲫出血病病原的分离、鉴定及检测方法研究[D]. 王璐.南京农业大学 2012
[7]异育银鲫皮肤粘孢子虫病的病原和组织病理研究[D]. 竹攸汀.上海海洋大学 2012
[8]CA16在不同温度与pH条件下的增殖动力学初探[D]. 刘尚允.北京协和医学院 2011
[9]环境胁迫对养殖锯缘青蟹主要免疫因子的影响[D]. 周素琴.中国海洋大学 2006
本文编号：3107300
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