低氧和高氧对斑马鱼胚胎心血管发育的影响

发布时间：2021-03-30 20:41

　　氧是需氧生物正常生命活动的必要条件,动物可通过调节自身代谢适应短期的低氧或高氧环境。氧浓度变化会影响动物的生长发育和繁殖,尤其在心血管方面表现明显。水中溶解氧容易发生改变,对水生动物的代谢影响显著。鱼类受高氧或低氧胁迫后会引发各种生理应答,胁迫消除后机体会产生补偿现象,但生长发育仍受影响,严重时诱发疾病并影响生存。目前溶氧对鱼类影响的研究集中在成鱼的生理响应,对于胚胎发育时期的影响较少涉及。高氧和低氧条件下对胚胎生长发育、心血管发育情况及调控机制尚不清楚。本研究以斑马鱼（Danio rerio）作为实验模型,选择心脏、血管荧光标记的两个品系斑马鱼为实验材料,设定低氧（2.0±0.5mg/L）、常氧（6.0±0.5mg/L）和高氧（15.5±0.5mg/L）三种溶氧条件,用荧光显微镜观测24-72hpf胚胎形态结构,心脏和血管外部形态,心率,胚胎躯干部主要血管背主动脉（DA）和后主静脉（PCV）直径,背部纵向血管（DLAV）到PCV的距离,相邻体节间血管（ISV）距离,脊索旁血管（PAV）的形成情况。结果显示,常氧条件下胚胎存活率为74.18±4.23%,高氧下存活率为76±4.09%,... 

【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
缩略词
第1章 文献综述
    1.1 低氧对人和陆生动物的影响
    1.2 高氧对人和陆生动物的影响
    1.3 氧对鱼类的影响
        1.3.1 溶解氧的功能
        1.3.2 溶解氧对鱼类心血管机能的影响
        1.3.3 溶解氧对鱼类其他器官机能的影响
    1.4 模式生物—斑马鱼
    1.5 斑马鱼心血管发育
        1.5.1 斑马鱼心脏发育过程
        1.5.2 斑马鱼血管发育过程
        1.5.3 斑马鱼心血管发育研究现状
第2章 绪论
    2.1 选题背景与意义
    2.2 研究内容与技术路线
        2.2.1 研究内容
        2.2.2 技术路线
第3章 实验动物及方法
    3.1 实验动物、仪器及试剂
        3.1.1 实验动物
        3.1.2 质粒图谱
        3.1.3 主要仪器
        3.1.4 主要试剂
        3.1.5 主要试剂配制
    3.2 实验方法
        3.2.1 溶解氧条件的制备
        3.2.2 观测胚胎外部形态
        3.2.3 cDNA的合成
        3.2.4 PCR扩增目的基因
        3.2.5 目的片段的克隆
        3.2.6 重组质粒的提取及纯化
        3.2.7 地高辛探针的合成
        3.2.8 整胚原位杂交
        3.2.9 qPCR检测
第4章 实验结果与讨论
    4.1 低氧和高氧对胚胎形态发育的影响
        4.1.1 胚胎发育对低氧和高氧敏感的时间窗
        4.1.2 低氧和高氧对胚胎存活率的影响
        4.1.3 低氧和高氧对胚胎外部形态的影响
        4.1.4 低氧和高氧对胚胎体长的影响
        4.1.5 低氧和高氧对胚胎卵黄球（YB）及卵黄延伸（YE）的影响
        4.1.6 低氧和高氧对胚胎眼径的影响
        4.1.7 低氧和高氧对胚胎心脏形态的影响
        4.1.8 低氧和高氧对胚胎血管形态的影响
    4.2 低氧和高氧对胚胎心脏、血管发育相关基因表达的影响
        4.2.1 总RNA的提取
        4.2.2 目的基因的扩增
        4.2.3 阳性克隆筛选及鉴定
        4.2.4 DIG标记RNA探针的合成
        4.2.5 心脏相关基因的整胚原位杂交
        4.2.6 血管相关基因的整胚原位杂交
        4.2.7 qPCR检测心脏、血管发育相关基因的表达
    4.3 讨论
        4.3.1 低氧和高氧对胚胎形态发育的影响
        4.3.2 低氧和高氧对胚胎心脏发育的影响
        4.3.3 低氧和高氧对胚胎血管发育的影响
第5章 结论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]高溶氧量对西伯利亚鲟抗氧化酶活力及肝脏损伤相关指标的影响[J]. 况新宇,王晓雯,朱华.  水产科技情报. 2016(04)
[2]温度对斑马鱼胚胎发育的影响[J]. 李忻林,董洪坪,王婷,黄四洲,蔡佩玲.  四川动物. 2014(06)
[3]溶解气体过饱和水体对胭脂鱼血气平衡影响初步研究[J]. 吴湘香,李云峰,张燕,茹辉军,沈子伟,倪朝辉.  淡水渔业. 2014(06)
[4]高氧对小鼠视网膜新生血管模型中根蛋白的影响[J]. 王龙梅,闫琳,杨侠,董晓光,徐海峰.  眼科新进展. 2014(03)
[5]鲤鱼胚胎发育与温度和溶氧的关系[J]. 陈媛媛,邢娟娟,吕彬彬.  陕西水利. 2012(01)
[6]低氧和高氧对大菱鲆幼鱼红细胞核异常及氧化抗氧化平衡的影响[J]. 吴志昊,尤锋,王英芳,文爱韵,马得友,徐永立,张培军.  上海海洋大学学报. 2011(06)
[7]溶氧水平对黄颡鱼稚鱼摄食、生长及呼吸代谢的影响[J]. 杨凯,樊启学,张磊,杨磊,周华,李波,方巍.  淡水渔业. 2010(02)
[8]斑马鱼胚胎早期血管系统的形成[J]. 杨婧,王志坚.  生命的化学. 2009(02)
[9]溶解氧与养殖密度对褐牙鲆幼鱼血细胞数量及血红蛋白含量影响的研究[J]. 董晓煜,张秀梅,张沛东.  海洋水产研究. 2008(06)
[10]过饱和溶氧对大菱鲆生长及消化酶的影响[J]. 徐勇,曲克明,马绍赛.  渔业现代化. 2008(04)

博士论文
[1]重金属对斑马鱼的毒性效应及作用机制研究[D]. 殷健.北京协和医学院 2014
[2]高糖对斑马鱼胚胎心脏发育的影响及机制研究[D]. 梁进涛.复旦大学 2010
[3]IGFBP-3在斑马鱼胚胎发育中的功能[D]. 李云.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2005

硕士论文
[1]限制溶解氧供应对褐牙鲆幼鱼生长的影响及其机制的实验研究[D]. 李洁.中国海洋大学 2011
[2]生长抑素在斑马鱼胚胎发育中的时空表达及功能研究[D]. 陈桂来.西南大学 2011



本文编号：3110122