H型硫氧还蛋白在杀鱼爱德华氏菌细菌致病中的作用研究
发布时间：2021-04-08 12:51
硫氧还蛋白（Trx）是一类高度保守的蛋白,存在于多种生物中,在生物抗氧化应激和维持二硫键以保持蛋白正确功能等方面发挥着重要作用。杀鱼爱德华氏菌是一种危害严重的鱼类致病菌,但其致病机制还很不清晰。基因组分析表明杀鱼爱德华氏菌编码了三种硫氧还蛋白,分别是A型硫氧还蛋白（TrxA）、C型硫氧还蛋白（TrxC）和H型硫氧还蛋白（TrxH）,但它们的生物学功能尚不清楚,尤其是TrxH,目前还没有关于病原菌TrxH作用机制研究的报道。基于此,本研究旨在阐述杀鱼爱德华氏菌TrxH在细菌抗逆性和致病性中的作用。通过对杀鱼爱德华氏菌TrxH蛋白序列和结构分析,本研究发现H型硫氧还蛋白具有保守基序WCXXC和QSTL,二级结构分析表明该蛋白存在5个α螺旋和4个β折叠。借助于荧光定量PCR对trxH基因的表达进行了研究,结果表明在氧化应激、缺铁、低pH等逆境条件下以及感染宿主细胞时trxH的表达显著上调,这些结果表明TrxH很有可能在细菌适应逆境环境和宿主胞内环境等方面发挥作用;同时发现trxH的表达受到杀鱼爱德华氏菌全局性调控因子----铁调节因子Fur的负调控,这是首次发现TrxH受Fur调控。为研究t...
【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
硫氧还蛋白系统作用的主要过程
结果与分析3 结果与分析3.1 trxH 基因序列特征及蛋白结构TrxH 由 125 个氨基酸编码组成，并且含有硫氧还蛋白的结构域。通过 BLAST 序列分析发现杀鱼爱德华氏菌的 TrxH 与沙眼奈瑟菌、败血性巴斯德菌、木偶虫、贪铜菌、嗜血红蛋白嗜血杆菌、皮氏罗尔斯顿菌和施氏假单胞菌中的硫氧还蛋白的同源性在38.5%-49.6%不等，与人类的硫氧还蛋白的同源性为 37.1%。值得注意的是，与杀鱼爱德华氏菌的 TrxH 同源性超过 30%的物种中，除了爱德华菌属外并没有常见的动物致病菌。杀鱼爱德华氏菌 TrxH 中有 WCXXC 保守活性位点[71]，同时还有 QSTL/M 保守活性位点。对其蛋白二级结构分析表明该蛋白存在 5 个α螺旋和 4 个β折叠（图 3-1）。对杀鱼爱德华氏菌的 TrxH 三级结构的建模如图 3-2 所示。
图 3-2 TrxH 三级结构模型Fig. 3-2 TrxH theoretical modelling 的第 4 个α螺旋。he fourth α helix of TrxH.的获得华氏菌 trxH 功能，对编码的第 24~110 位氨得了敲除株 TX01 trxH；与此同时也构建rxH 的遗传突变体，trxH 回复互补株的构建克隆了 trxH 基因缺失片段和 trxH 基因片段，
【参考文献】：
期刊论文
[1]细胞应激和氧化还原活性蛋白参与硫氧还蛋白-1高表达幽门螺杆菌感染所致胃黏膜的癌变（英文）[J]. Yan-yan SHI,Jing ZHANG,Ting ZHANG,Man ZHOU,Ye WANG,He-jun ZHANG,Shi-gang DING. Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2018(10)
[2]单核细胞增多性李斯特菌硫氧还蛋白TrxA调控磷脂酶PlcB研究[J]. 汪渤森,韩笑,马天天,王航,杭奕,俞慧飞,赵碧波,邱旸,叶美伶,程昌勇,宋厚辉. 中国兽医学报. 2018(09)
[3]丙型副伤寒沙门菌lpfC基因缺失株的构建及其生物学特性分析[J]. 杨占峰,张晶晶,吴敏娜,何群力. 中国动物传染病学报. 2018(05)
[4]融合蛋白Trx-T4 DL可溶性表达、纯化与其生物活性应用[J]. 付大伟,陈启蒙,徐伟. 食品工业科技. 2018(07)
[5]噬菌蛭弧菌在畜禽与水产养殖中的应用[J]. 闫海,吕乐,许倩倩. 饲料与畜牧. 2018(03)
[6]重组大肠杆菌硫氧还蛋白（Trx）的制备及功能分析[J]. 孙风梅. 智库时代. 2018(01)
[7]金黄色葡萄球菌生物膜形成机制及相关感染治疗的研究进展[J]. 彭丹,周小仙,陈泽慧. 医学综述. 2017(19)
[8]基因敲除技术研究进展[J]. 高宇,程潜,张梦君,朱振宇,胡婷婷,杨宇. 农业技术与装备. 2017(08)
[9]鲫源迟缓爱德华氏菌的分离鉴定及其毒力基因的检测[J]. 程俊茗,万明月,周晋扬,贾丹,胡鲲. 微生物学通报. 2017(10)
[10]迟缓爱德华氏菌的研究概况[J]. 王淑娴,曲梁静,王晓璐,刁菁,樊英,许拉. 齐鲁渔业. 2017 (06)
本文编号：3125588
【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
硫氧还蛋白系统作用的主要过程
结果与分析3 结果与分析3.1 trxH 基因序列特征及蛋白结构TrxH 由 125 个氨基酸编码组成，并且含有硫氧还蛋白的结构域。通过 BLAST 序列分析发现杀鱼爱德华氏菌的 TrxH 与沙眼奈瑟菌、败血性巴斯德菌、木偶虫、贪铜菌、嗜血红蛋白嗜血杆菌、皮氏罗尔斯顿菌和施氏假单胞菌中的硫氧还蛋白的同源性在38.5%-49.6%不等，与人类的硫氧还蛋白的同源性为 37.1%。值得注意的是，与杀鱼爱德华氏菌的 TrxH 同源性超过 30%的物种中，除了爱德华菌属外并没有常见的动物致病菌。杀鱼爱德华氏菌 TrxH 中有 WCXXC 保守活性位点[71]，同时还有 QSTL/M 保守活性位点。对其蛋白二级结构分析表明该蛋白存在 5 个α螺旋和 4 个β折叠（图 3-1）。对杀鱼爱德华氏菌的 TrxH 三级结构的建模如图 3-2 所示。
图 3-2 TrxH 三级结构模型Fig. 3-2 TrxH theoretical modelling 的第 4 个α螺旋。he fourth α helix of TrxH.的获得华氏菌 trxH 功能，对编码的第 24~110 位氨得了敲除株 TX01 trxH；与此同时也构建rxH 的遗传突变体，trxH 回复互补株的构建克隆了 trxH 基因缺失片段和 trxH 基因片段，
【参考文献】：
期刊论文
[1]细胞应激和氧化还原活性蛋白参与硫氧还蛋白-1高表达幽门螺杆菌感染所致胃黏膜的癌变（英文）[J]. Yan-yan SHI,Jing ZHANG,Ting ZHANG,Man ZHOU,Ye WANG,He-jun ZHANG,Shi-gang DING. Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2018(10)
[2]单核细胞增多性李斯特菌硫氧还蛋白TrxA调控磷脂酶PlcB研究[J]. 汪渤森,韩笑,马天天,王航,杭奕,俞慧飞,赵碧波,邱旸,叶美伶,程昌勇,宋厚辉. 中国兽医学报. 2018(09)
[3]丙型副伤寒沙门菌lpfC基因缺失株的构建及其生物学特性分析[J]. 杨占峰,张晶晶,吴敏娜,何群力. 中国动物传染病学报. 2018(05)
[4]融合蛋白Trx-T4 DL可溶性表达、纯化与其生物活性应用[J]. 付大伟,陈启蒙,徐伟. 食品工业科技. 2018(07)
[5]噬菌蛭弧菌在畜禽与水产养殖中的应用[J]. 闫海,吕乐,许倩倩. 饲料与畜牧. 2018(03)
[6]重组大肠杆菌硫氧还蛋白（Trx）的制备及功能分析[J]. 孙风梅. 智库时代. 2018(01)
[7]金黄色葡萄球菌生物膜形成机制及相关感染治疗的研究进展[J]. 彭丹,周小仙,陈泽慧. 医学综述. 2017(19)
[8]基因敲除技术研究进展[J]. 高宇,程潜,张梦君,朱振宇,胡婷婷,杨宇. 农业技术与装备. 2017(08)
[9]鲫源迟缓爱德华氏菌的分离鉴定及其毒力基因的检测[J]. 程俊茗,万明月,周晋扬,贾丹,胡鲲. 微生物学通报. 2017(10)
[10]迟缓爱德华氏菌的研究概况[J]. 王淑娴,曲梁静,王晓璐,刁菁,樊英,许拉. 齐鲁渔业. 2017 (06)
本文编号：3125588
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