刺参池塘养殖环境中几类细菌的周年变化规律及快速检测方法研究

发布时间：2021-04-16 16:34

　　随着刺参（Apostichopus japonicus）人工养殖业的快速发展，刺参病害日渐突出。微生物是刺参养殖池塘生态系统的重要组成部分，理化参数也与刺参的健康状况息息相关。因此，研究刺参养殖池塘中可培养细菌的周年变化规律及其与理化参数的关系，对刺参健康养殖具有重要意义。另外，快速定量检测环境中刺参病原菌的数量变化，也有助于对刺参疾病的发生进行预警，以便及时采取防治措施。本论文通过定期采样检测几类可培养细菌的数量和理化指标，研究了刺参养殖池塘水体和沉积物细菌的周年变化规律及其与理化环境因子的相关性，并建立了沉积环境中2种主要致病菌的快速检测方法，主要内容及结果如下：1.本研究于2012年4月至2013年4月，对山东省即墨刺参养殖池塘水体中4种可培养细菌（总异养菌、弧菌、硝化细菌、硫化细菌）、4项理化参数（温度、pH、盐度、溶解氧）和沉积环境中的6种可培养细菌（总异养菌、弧菌、硝化细菌、硝酸盐还原菌、硫化细菌、硫酸盐还原菌）、6项理化参数（温度、pH、氧化还原电位、硫化物、有机碳、总氮）的动态变化进行了监测；并分析了不同细菌类群之间及其与理化指标间的相关性。结果显示：水体中可培养总异养... 

【文章来源】：中国海洋大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
0 前言
1 综述
    1.1 微生物生态学和海洋微生物多样性概述
        1.1.1 微生物生态学的概念
        1.1.2 微生物生态学的发展
        1.1.3 微生物生态学的研究意义
        1.1.4 海洋微生物多样性
    1.2 微生物多样性的研究方法
        1.2.1 传统的研究方法
        1.2.2 现代分子生物学研究方法
    1.3 刺参养殖养殖业发展概况
        1.3.1 我国刺参养殖业发展现状
        1.3.2 刺参养殖技术
        1.3.3 影响刺参健康的理化因子
        1.3.4 我国刺参养殖业存在的问题
    1.4 刺参养殖常见疾病及主要致病微生物
        1.4.1 腐皮综合症
        1.4.2 育苗期疾病
        1.4.3 霉菌病
        1.4.4 扁形动物病
        1.4.5 纤毛虫病
        1.4.6 其它类生物引发的疾病
    1.5 本论文研究目的、意义及内容
        1.5.1 研究目的和意义
        1.5.2 研究内容
2 刺参养殖池塘中理化因子和可培养细菌类群的周年变化研究
    2.1 材料与方法
        2.1.1 实验池塘
        2.1.2 样品采集
        2.1.3 理化参数的测定
        2.1.4 配制培养基
        2.1.5 细菌数量的测定
        2.1.6 数据处理
    2.2 结果与分析
        2.2.1 刺参养殖池塘水体中理化参数和可培养细菌的动态变化规律
        2.2.2 刺参养殖池塘沉积物中理化参数和可培养细菌的动态变化规律
    2.3 讨论
        2.3.1 刺参养殖环境中理化参数和微生物群落的季节变化
        2.3.2 微生物数量与理化参数间的变化关系
        2.3.3 理化参数间的变化关系
3 养殖沉积环境中气单胞菌属细菌的实时荧光定量 PCR 检测方法的建立
    3.1 材料与方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 结果与分析
        3.2.1 模拟沉积物样品中 DNA 的提取
        3.2.2 PCR 扩增结果
        3.2.3 质粒标准曲线和模拟沉积物样品标准曲线的建立
        3.2.4 特异性试验
        3.2.5 灵敏性试验
        3.2.6 重复性试验
    3.3 讨论
4 养殖沉积环境中副溶血弧菌的实时荧光定量 PCR 检测方法的建立
    4.1 材料与方法
        4.1.1 菌种来源
        4.1.2 引物选择
        4.1.3 反应体系及反应条件
        4.1.4 方法
    4.2 结果与分析
        4.2.1 PCR 扩增结果
        4.2.2 质粒标准曲线和模拟沉积物样品标准曲线的建立
        4.2.3 特异性试验
        4.2.4 灵敏性试验
        4.2.5 重复性试验
    4.3 讨论
5 结论
参考文献
致谢
个人简历
发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]养殖刺参“化板症”病原菌的分离与鉴定[J]. 王印庚,郭伟丽,荣小军,李彬,廖梅杰,张正,陈霞,刘升平.  渔业科学进展. 2012(06)
[2]实时荧光定量PCR快速检测嗜水气单胞菌方法的建立[J]. 王蓉,王忠发,王志铮,赵蓓蓓,许欣.  现代预防医学. 2012(13)
[3]金黄色葡萄球菌荧光定量PCR计数法的建立[J]. 刘志勇,赵雪涛,钱子煜.  职业与健康. 2012(11)
[4]副溶血弧菌的SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法建立[J]. 张晓君,陈丽,毕可然,秦蕾,秦国民.  食品科学. 2012(08)
[5]辽东湾北部海域表层沉积物氧化还原电位及其主要影响因素[J]. 吴金浩,刘桂英,王年斌,徐雪梅,宋伦.  沉积学报. 2012(02)
[6]采用实时荧光定量PCR技术比较提取土壤真菌DNA方法的差异[J]. 王淑芳,马桂珍,钱媛媛,陈月.  安徽农业科学. 2011(33)
[7]刺参休眠规律的研究[J]. 胡凡光,高翔,王志刚,李美真,周文江,麻丹萍,李绍彬,张豫.  渔业现代化. 2011(02)
[8]牡蛎中副溶血弧菌荧光定量PCR检测方法的建立及其应用[J]. 林强,李宁求,付小哲,刘礼辉,石存斌,吴淑勤.  中国水产科学. 2011(01)
[9]实时荧光定量PCR技术研究进展及其应用[J]. 陈旭,齐凤坤,康立功,李景富.  东北农业大学学报. 2010(08)
[10]山东省刺参养殖产业现状分析与可持续发展对策[J]. 李成林,宋爱环,胡炜,张艳萍,赵斌,李翘楚,麻丹萍.  渔业科学进展. 2010(04)

硕士论文
[1]刺参养殖池塘异养菌数量变动及区系组成的初步研究[D]. 牛宇峰.中国海洋大学 2009
[2]反硝化作用抑制硫酸盐还原菌活性的技术研究[D]. 敖蕾娜日.哈尔滨工业大学 2006



本文编号：3141781