DHA诱导草鱼脂肪细胞凋亡的作用及其机制研究
发布时间：2021-04-23 17:39
脂肪组织是动物机体主要的储能器官之一,主要作用是以甘油三酯的形式储存机体内过度的能量。脂肪组织主要由脂肪细胞组成,脂肪细胞是储存甘油三酯的基本单位。二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA）属于n-3系列长链多不饱和脂肪酸（n-3LC-PUFAs）的一种,在生长发育、免疫调节、脂质代谢等过程中发挥重要作用。细胞凋亡是细胞的一种程序性死亡,涉及一系列酶及信号分子参与。有研究表明DHA能够调控草鱼脂质蓄积,但是潜在的机制尚不清楚。本研究以草鱼为研究对象,探讨DHA对脂质蓄积的作用、对脂肪细胞凋亡的影响及机制,以期为淡水鱼类脂代谢提供一定的参考依据。获得的主要结果如下:1、日粮中添加0.52%的DHA降低草鱼腹腔脂肪脂质蓄积。在日粮中分别添加0%（对照组）及0.52%（试验组）的DHA,饲喂初始重为22.19±1.76 g的草鱼稚鱼3周、6周后,解剖得到草鱼腹腔脂肪组织,气相色谱法检测脂肪酸相对含量,苏木精-伊红染色观察脂肪细胞形态变化,甘油三酯试剂盒检测脂肪组织甘油三酯含量,RT-PCR检测脂代谢相关基因mRNA水平,western blot检测脂代谢相关蛋白表达水...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 文献综述
1.1 二十二碳六烯酸（DHA）
1.1.1 DHA的化学结构
1.1.2 DHA的来源
1.1.3 DHA的体内合成
1.2 脂肪组织与脂质蓄积
1.2.1 脂肪组织
1.2.2 脂肪细胞
1.2.3 脂质代谢
1.2.4 DHA对脂质蓄积调控的研究进展
1.3 细胞凋亡
1.3.1 细胞凋亡的生物化学特征
1.3.2 细胞凋亡的途径
1.3.3 脂肪细胞凋亡及特性
1.4 草鱼
1.5 本研究的目的与意义
第二章 DHA影响草鱼脂肪细胞凋亡的在体研究
2.1 材料与方法
2.1.1 试验草鱼
2.1.2 试验饲料
2.1.3 饲养及采样
2.1.4 脂肪酸组成分析
2.1.5 苏木精-伊红（HE）染色
2.1.6 甘油三酯含量检测
2.1.7 实时定量PCR分析
2.1.8 蛋白免疫印迹检测
2.1.9 统计分析
2.2 结果
2.2.1 日粮中添加DHA对草鱼生长及生物学性状的影响
2.2.2 日粮中添加DHA对草鱼腹腔脂肪组织脂肪酸含量的影响
2.2.3 日粮中添加DHA对草鱼脂肪细胞大小的影响
2.2.4 日粮中添加DHA对草鱼脂肪组织甘油三酯含量的影响
2.2.5 日粮中添加DHA对草鱼脂肪细胞分化相关基因表达的影响
2.2.6 日粮中添加DHA对草鱼脂肪细胞凋亡相关基因及蛋白表达的影响
2.3 讨论
2.4 小结
第三章 离体探究DHA诱导草鱼脂肪细胞凋亡的作用及机制
3.1 材料与方法
3.1.1 试验草鱼
3.1.2 草鱼前体脂肪细胞培养
3.1.3 细胞活力检测
3.1.4 脂肪细胞凋亡率检测
3.1.5 Real-timePCR检测相关基因mRNA的表达水平
3.1.6 WesternBlot检测凋亡相关蛋白表达情况
3.1.7 凋亡相关蛋白酶活性的变化
3.1.8 数据分析
3.2 结果
3.2.1 DHA对草鱼脂肪细胞活力的影响
3.2.2 DHA以剂量依赖的方式诱导草鱼脂肪细胞凋亡
3.2.3 DHA以时间依赖的方式诱导草鱼脂肪细胞凋亡
3.2.4 DHA对草鱼脂肪细胞凋亡相关基因表达的影响
3.2.5 DHA上调了草鱼脂肪细胞中PPARγ的表达水平
3.2.6 DHA以PPARγ依赖的方式促进草鱼脂肪细胞凋亡
3.2.7 DHA诱导草鱼脂肪细胞凋亡可能通过内源性途径
3.3 讨论
3.4 小结
第四章 综合讨论与结论
4.1 综合讨论
4.2 结论
4.3 创新点
4.4 下一步研究计划
参考文献
附录
致谢
作者简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同来源DHA提取技术及其在食品工业中的应用进展[J]. 李鹤,胡文忠,姜爱丽,于雪,王倩影. 食品工业科技. 2017(07)
[2]DHA对宫颈癌细胞株凋亡、侵袭和转移的影响[J]. 杨翠,张广平,陈咏宁,孟凡良,刘士三,龚时鹏. 南方医科大学学报. 2016(06)
[3]高不饱和脂肪酸（HUFAs）在淡水鱼类中的营养作用研究进展[J]. 吉红,田晶晶. 水产学报. 2014(09)
[4]烟酰胺削弱罗格列酮诱导猪前体脂肪细胞凋亡的作用与分子机制[J]. 庞卫军,许儒祥,熊燕,孙世铎,杨公社. 中国农业科学. 2013(18)
[5]罗格列酮对肝癌SMMC-7721细胞凋亡、细胞周期及蛋白质表达的影响[J]. 彭利,徐卓,周烨,杨涛,梁占强,张萌. 中华肝脏病杂志. 2010 (02)
[6]饲料中HUFA影响草鱼脂质代谢的研究[J]. 吉红,曹艳姿,刘品,苏尚顺,林亚秋,曹福余,奥宏海,周继术,叶元土. 水生生物学报. 2009(05)
[7]n-3高不饱和脂肪酸对黑鲷幼鱼生长及脂肪代谢的影响[J]. 马晶晶,邵庆均,许梓荣,周凡,钟观运,宋文新,Owari Ngandeali Bergo. 水产学报. 2009(04)
[8]二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸研究进展（1）[J]. 许友卿,张海柱,丁兆坤. 生物学通报. 2007(11)
[9]n-3多不饱和脂肪酸DHA、EPA研究进展[J]. 朱路英,张学成,宋晓金,况成宏,孙远征. 海洋科学. 2007(11)
[10]浅议DHA、EPA及其应用[J]. 张道雷,陈瑶,周广田,李敬龙. 中国调味品. 2007(10)
硕士论文
[1]EGCG通过抑制内质网应激凋亡途径减轻高糖致足细胞损伤[D]. 项春红.山东大学 2017
本文编号：3155752
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 文献综述
1.1 二十二碳六烯酸（DHA）
1.1.1 DHA的化学结构
1.1.2 DHA的来源
1.1.3 DHA的体内合成
1.2 脂肪组织与脂质蓄积
1.2.1 脂肪组织
1.2.2 脂肪细胞
1.2.3 脂质代谢
1.2.4 DHA对脂质蓄积调控的研究进展
1.3 细胞凋亡
1.3.1 细胞凋亡的生物化学特征
1.3.2 细胞凋亡的途径
1.3.3 脂肪细胞凋亡及特性
1.4 草鱼
1.5 本研究的目的与意义
第二章 DHA影响草鱼脂肪细胞凋亡的在体研究
2.1 材料与方法
2.1.1 试验草鱼
2.1.2 试验饲料
2.1.3 饲养及采样
2.1.4 脂肪酸组成分析
2.1.5 苏木精-伊红（HE）染色
2.1.6 甘油三酯含量检测
2.1.7 实时定量PCR分析
2.1.8 蛋白免疫印迹检测
2.1.9 统计分析
2.2 结果
2.2.1 日粮中添加DHA对草鱼生长及生物学性状的影响
2.2.2 日粮中添加DHA对草鱼腹腔脂肪组织脂肪酸含量的影响
2.2.3 日粮中添加DHA对草鱼脂肪细胞大小的影响
2.2.4 日粮中添加DHA对草鱼脂肪组织甘油三酯含量的影响
2.2.5 日粮中添加DHA对草鱼脂肪细胞分化相关基因表达的影响
2.2.6 日粮中添加DHA对草鱼脂肪细胞凋亡相关基因及蛋白表达的影响
2.3 讨论
2.4 小结
第三章 离体探究DHA诱导草鱼脂肪细胞凋亡的作用及机制
3.1 材料与方法
3.1.1 试验草鱼
3.1.2 草鱼前体脂肪细胞培养
3.1.3 细胞活力检测
3.1.4 脂肪细胞凋亡率检测
3.1.5 Real-timePCR检测相关基因mRNA的表达水平
3.1.6 WesternBlot检测凋亡相关蛋白表达情况
3.1.7 凋亡相关蛋白酶活性的变化
3.1.8 数据分析
3.2 结果
3.2.1 DHA对草鱼脂肪细胞活力的影响
3.2.2 DHA以剂量依赖的方式诱导草鱼脂肪细胞凋亡
3.2.3 DHA以时间依赖的方式诱导草鱼脂肪细胞凋亡
3.2.4 DHA对草鱼脂肪细胞凋亡相关基因表达的影响
3.2.5 DHA上调了草鱼脂肪细胞中PPARγ的表达水平
3.2.6 DHA以PPARγ依赖的方式促进草鱼脂肪细胞凋亡
3.2.7 DHA诱导草鱼脂肪细胞凋亡可能通过内源性途径
3.3 讨论
3.4 小结
第四章 综合讨论与结论
4.1 综合讨论
4.2 结论
4.3 创新点
4.4 下一步研究计划
参考文献
附录
致谢
作者简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同来源DHA提取技术及其在食品工业中的应用进展[J]. 李鹤,胡文忠,姜爱丽,于雪,王倩影. 食品工业科技. 2017(07)
[2]DHA对宫颈癌细胞株凋亡、侵袭和转移的影响[J]. 杨翠,张广平,陈咏宁,孟凡良,刘士三,龚时鹏. 南方医科大学学报. 2016(06)
[3]高不饱和脂肪酸（HUFAs）在淡水鱼类中的营养作用研究进展[J]. 吉红,田晶晶. 水产学报. 2014(09)
[4]烟酰胺削弱罗格列酮诱导猪前体脂肪细胞凋亡的作用与分子机制[J]. 庞卫军,许儒祥,熊燕,孙世铎,杨公社. 中国农业科学. 2013(18)
[5]罗格列酮对肝癌SMMC-7721细胞凋亡、细胞周期及蛋白质表达的影响[J]. 彭利,徐卓,周烨,杨涛,梁占强,张萌. 中华肝脏病杂志. 2010 (02)
[6]饲料中HUFA影响草鱼脂质代谢的研究[J]. 吉红,曹艳姿,刘品,苏尚顺,林亚秋,曹福余,奥宏海,周继术,叶元土. 水生生物学报. 2009(05)
[7]n-3高不饱和脂肪酸对黑鲷幼鱼生长及脂肪代谢的影响[J]. 马晶晶,邵庆均,许梓荣,周凡,钟观运,宋文新,Owari Ngandeali Bergo. 水产学报. 2009(04)
[8]二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸研究进展（1）[J]. 许友卿,张海柱,丁兆坤. 生物学通报. 2007(11)
[9]n-3多不饱和脂肪酸DHA、EPA研究进展[J]. 朱路英,张学成,宋晓金,况成宏,孙远征. 海洋科学. 2007(11)
[10]浅议DHA、EPA及其应用[J]. 张道雷,陈瑶,周广田,李敬龙. 中国调味品. 2007(10)
硕士论文
[1]EGCG通过抑制内质网应激凋亡途径减轻高糖致足细胞损伤[D]. 项春红.山东大学 2017
本文编号：3155752
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