黑素皮质素受体-4（MC4R）在金钱鱼生殖调控中的功能研究

发布时间：2021-05-05 20:44

　　MC4R属于G蛋白耦联受体超家族（GPCRs）成员之一,大量存在于动物中枢神经系统的各个区域中,包括大脑皮质、丘脑、下丘脑、脑干和脊索。有研究表明,MC4R参与调节哺乳动物的生殖功能;在鱼类中,MC4R主要在脑、垂体和性腺中表达,且mc4r基因拷贝显性负突变可导致较大规格的雄性剑尾鱼推迟性成熟,暗示MC4R可能同样参与了鱼类的生殖调控,因此,开展鱼类MC4R的生殖内分泌功能研究,对于深入了解鱼类生殖调控机理具有重要意义。本文以金钱鱼为研究对象,利用同源克隆法,获得金钱鱼mc4r（Scatophagus argus mc4r,SAmc4r）的编码区序列,通过半定量PCR（RT-PCR）检测mc4r的组织分布;利用放射免疫分析法测定MC4R与其广谱性激动剂（NDP-MSH和a-MSH）及特异性激动剂（THIQ）的结合率以及cAMP的生成能力;实时荧光定量PCR（Real-time PCR）方法检测了广谱性激动剂NDP-MSH、广谱性拮抗剂SHU9119、特异性激动剂THIQ和特异性拮抗剂Ipsen5i对金钱鱼mc4r及生殖相关基因的表达影响。主要结果如下:1.金钱鱼mc4r基因的克隆及组织... 

【文章来源】：广东海洋大学广东省

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 黑素皮质素受体系统
    1.2 MC4R的结构和功能研究
        1.2.1 MC4R的结构特点及生理分布
        1.2.2 MC4R的信号通路及生理功能的研究
    1.3 MC4R在鱼类生殖调控中的研究进展
    1.4 本研究的目的与意义
2 金钱鱼mc4r c DNA克隆及组织分布
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 结果
        2.2.1 金钱鱼脑、垂体与卵巢总RNA的提取
        2.2.2 SAmc4r中间、3’端与 5’片段的克隆
        2.2.3 SAmc4r全长克隆
        2.2.4 SAmc4r基因的序列分析
        2.2.5 SAmc4r RT-PCR结果
    2.3 讨论
3 SAMC4R的高敏感性配体筛选
    3.1 材料与方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 结果
        3.2.1 SAmc4r真核表达载体的构建
        3.2.2 SAMC4R配体的结合特性
        3.2.3 SAMC4R的信号传导特性
    3.3 讨论
4 MC4R激动剂对金钱鱼mc4r及生殖相关基因表达的影响
    4.1 材料与方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 结果
        4.2.1 MC4R激动剂对金钱鱼生殖相关基因的离体调控
        4.2.2 MC4R特异性激动剂对金钱鱼生殖相关基因的在体调控
    4.3 讨论
5 MC4R拮抗剂对金钱鱼mc4r及生殖相关基因表达的影响
    5.1 材料与方法
        5.1.1 材料
        5.1.2 方法
    5.2 结果
        5.2.1 MC4R拮抗剂对金钱鱼生殖相关基因的离体调控
        5.2.2 MC4R特异性拮抗剂对金钱鱼生殖相关基因的在体调控
    5.3 讨论
6 结论
参考文献
致谢
作者简介
导师简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]金钱鱼性腺发育及其组织结构观察[J]. 崔丹,刘志伟,刘南希,张莹莹,张俊彬.  水产学报. 2013(05)
[2]金钱鱼繁殖生物学及诱导产卵试验[J]. 蔡泽平,王毅,胡家玮,张俊彬,林岳光.  热带海洋学报. 2010(05)
[3]黑皮质素受体-4调节通路的研究进展[J]. 聂茹,巴彩凤.  中国实验动物学报. 2008(04)
[4]金钱鱼生物学研究及回顾[J]. 兰国宝,阎冰,廖思明,罗砚,谢若痴.  水产科学. 2005(07)
[5]G蛋白及其研究进展[J]. 周元国,王正国.  生理科学进展. 1996(03)

硕士论文
[1]鸡黑素皮质素受体4基因的分子克隆及其突变体的药理学特性初步研究[D]. 姜晓芳.扬州大学 2013



本文编号：3170555