鲤嗜水气单胞菌弱毒株筛选及免疫原性评价
发布时间：2021-05-11 07:43
嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）是一种革兰氏阴性细菌,可以引起鲤（Cyprinus carpio）、鲫（Carassius aumtus）等多种淡水养殖鱼类细菌性败血症的爆发,对渔业生产造成严重的经济损失。目前,我国主要使用化学药物对鱼病进行防控,大量化学药物的使用会导致药物残留,破坏生态环境,并且为超级细菌的产生创造条件,所以使用疫苗对鱼病进行免疫防控是未来的发展趋势。然而我国尚未普及以疫苗为主的鱼病防控方法。原因主要有两方面:首先由于现阶段研制的鱼用疫苗免疫效果不稳定;另一方面疫苗导入方法不够高效,难以满足生产需求。所以,研发高效稳定,操作简便的鱼用疫苗是现阶段鱼类疾病防控研究的重点。本论文针对由嗜水气单胞菌引起的传染性疾病,开展了鲤嗜水气单胞菌弱毒疫苗的研制及不同导入途径的疫苗免疫效果评价。旨在找到一种可广泛应用于水产养殖业,高效稳定、操作简便的嗜水气单胞菌弱毒疫苗,预防由嗜水气单胞菌引起的细菌性败血症,并为鱼用疫苗免疫效果评价标准的建立提供参考。本论文主要内容如下:1.利福平筛选嗜水气单胞菌弱毒菌株以采自新乡本地的高致病性鲤嗜水气单胞菌菌株XX1为研究对...
【文章来源】：河南师范大学河南省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 嗜水气单胞菌疫苗的研究现状
1.1.1 新型疫苗
1.1.2 灭活疫苗
1.1.3 弱毒疫苗
1.2 疫苗导入方法的研究进展
1.2.1 注射免疫
1.2.2 浸泡免疫
1.2.3 口服免疫
1.3 疫苗免疫效果评价的研究进展
1.3.1 非特异性免疫评价指标
1.3.2 特异性免疫评价指标
1.3.3 相对免疫保护率（RPS）
1.4 本论文研究目的与意义及技术路线
第二章 采用利福平筛选鲤嗜水气单胞菌弱毒株
2.1 材料与方法
2.1.1 实验材料
2.1.2 实验方法
2.2 实验结果
2.2.1 菌液浓度与吸光度值的标准方程
2.2.2 菌株XX1LA的鉴定和菌落形态
2.2.3 弱毒菌株XX1LA的毒力和稳定性
2.3 讨论
第三章 嗜水气单胞菌弱毒疫苗XX1LA免疫效果评价
3.1 材料与方法
3.1.1 实验材料
3.1.2 实验方法
3.2 实验结果
3.2.1 灭活疫苗和XX1LA对鲤鱼种的相对免疫保护率
3.2.2 疫苗免疫后对血清溶菌酶活性的影响
3.2.3 疫苗免疫后血清中特异性抗体效价的变化
3.2.4 疫苗免疫后鲤免疫相关基因表达量的变化
3.3 讨论
第四章 不同导入方式对嗜水气单胞菌弱毒疫苗XX1LA免疫效果的影响
4.1 材料与方法
4.1.1 实验用鲤鱼种
4.1.2 实验鱼的饲养管理
4.1.3 菌株及培养条件
4.1.4 主要实验仪器和设备
4.1.5 鱼种的免疫与攻毒实验
4.1.6 相对免疫保护率测定
4.1.7 血清特异性抗体凝集效价测定（微量凝集反应）
4.1.8 血清溶菌酶活性的测定
4.1.9 统计分析
4.2 结果
4.2.1 血清溶菌酶活性
4.2.2 免疫后不同时间血清抗体凝集效价
4.2.3 攻毒后鲤鱼种相对免疫保护率
4.3 讨论
4.3.1 疫苗不同导入方法对血清溶菌酶活性的影响
4.3.2 疫苗不同导入方法对血清抗体凝集效价和免疫保护率的影响
第五章 研究成果与展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表论文
【参考文献】：
期刊论文
[1]脂多糖与β葡聚糖对迟钝爱德华氏菌亚单位疫苗的免疫促进效果研究[J]. 刁菁,叶海斌,于晓清,许拉,樊英,李天保,王淑君,王娟. 中国农学通报. 2014(05)
[2]嗜水气单胞菌灭活疫苗对虹鳟免疫力和抗病力的影响[J]. 孙金辉,王庆奎,陈成勋,白东清,乔秀亭. 淡水渔业. 2013(01)
[3]两种多糖作为迟缓爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）灭活疫苗佐剂对大菱鲆（Scophthalmus maximus）的免疫保护效果[J]. 隋虎辰,谢国驷,边慧慧,王秀华,张晓华,黄倢. 海洋与湖沼. 2012(05)
[4]嗜水气单胞菌3种疫苗免疫的青鱼外周血免疫指标的变化[J]. 张波,曾令兵,罗晓松,高正勇,周勇,安伟. 华中农业大学学报. 2012(01)
[5]草鱼的一种急性细菌性传染病病原的分离鉴定及致病性研究[J]. 李楠,郭慧芝,焦冉,张书环,刘志新,姚卫建,聂品. 水生生物学报. 2011(06)
[6]3种美人鱼发光杆菌疫苗对卵形鲳鲹的免疫效果[J]. 苏友禄,冯娟,郭志勋,王瑞旋,徐力文,姜敬哲,王江勇. 华南农业大学学报. 2011(03)
[7]草鱼嗜水气单胞菌候选疫苗[J]. 邱并生. 微生物学通报. 2011(03)
[8]几种免疫增强剂对草鱼SOD、CAT及AKP活性的影响[J]. 李赫,宋文华,于翔,富丽静,姚福相,胡宗云,张涛. 水产学杂志. 2010(04)
[9]嗜水气单胞菌灭活疫苗浸泡后鳜IgM基因表达量和抗体效价的变化[J]. 刘雨果,潘厚军,陈偿,石存斌,吴淑勤. 淡水渔业. 2009(06)
[10]Synergistic actions of complement and lysozyme in clearance of Escherichia coli from amphioxus Branchiostoma belcheri[J]. Guangfeng Wang a,Shicui Zhang a,Zhimeng Zhuang b,Zhiping Wang a a Department of Marine Biology,Ocean University of China,Qingdao 266003,China b Yellow Sea Fisheries Research Institute,Qingdao 266071,China. Progress in Natural Science. 2009(02)
硕士论文
[1]草鱼呼肠孤病毒微载体培养技术与灭活疫苗浸泡免疫效果研究[D]. 刘秋凤.上海海洋大学 2013
本文编号：3181024
【文章来源】：河南师范大学河南省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 嗜水气单胞菌疫苗的研究现状
1.1.1 新型疫苗
1.1.2 灭活疫苗
1.1.3 弱毒疫苗
1.2 疫苗导入方法的研究进展
1.2.1 注射免疫
1.2.2 浸泡免疫
1.2.3 口服免疫
1.3 疫苗免疫效果评价的研究进展
1.3.1 非特异性免疫评价指标
1.3.2 特异性免疫评价指标
1.3.3 相对免疫保护率（RPS）
1.4 本论文研究目的与意义及技术路线
第二章 采用利福平筛选鲤嗜水气单胞菌弱毒株
2.1 材料与方法
2.1.1 实验材料
2.1.2 实验方法
2.2 实验结果
2.2.1 菌液浓度与吸光度值的标准方程
2.2.2 菌株XX1LA的鉴定和菌落形态
2.2.3 弱毒菌株XX1LA的毒力和稳定性
2.3 讨论
第三章 嗜水气单胞菌弱毒疫苗XX1LA免疫效果评价
3.1 材料与方法
3.1.1 实验材料
3.1.2 实验方法
3.2 实验结果
3.2.1 灭活疫苗和XX1LA对鲤鱼种的相对免疫保护率
3.2.2 疫苗免疫后对血清溶菌酶活性的影响
3.2.3 疫苗免疫后血清中特异性抗体效价的变化
3.2.4 疫苗免疫后鲤免疫相关基因表达量的变化
3.3 讨论
第四章 不同导入方式对嗜水气单胞菌弱毒疫苗XX1LA免疫效果的影响
4.1 材料与方法
4.1.1 实验用鲤鱼种
4.1.2 实验鱼的饲养管理
4.1.3 菌株及培养条件
4.1.4 主要实验仪器和设备
4.1.5 鱼种的免疫与攻毒实验
4.1.6 相对免疫保护率测定
4.1.7 血清特异性抗体凝集效价测定（微量凝集反应）
4.1.8 血清溶菌酶活性的测定
4.1.9 统计分析
4.2 结果
4.2.1 血清溶菌酶活性
4.2.2 免疫后不同时间血清抗体凝集效价
4.2.3 攻毒后鲤鱼种相对免疫保护率
4.3 讨论
4.3.1 疫苗不同导入方法对血清溶菌酶活性的影响
4.3.2 疫苗不同导入方法对血清抗体凝集效价和免疫保护率的影响
第五章 研究成果与展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表论文
【参考文献】：
期刊论文
[1]脂多糖与β葡聚糖对迟钝爱德华氏菌亚单位疫苗的免疫促进效果研究[J]. 刁菁,叶海斌,于晓清,许拉,樊英,李天保,王淑君,王娟. 中国农学通报. 2014(05)
[2]嗜水气单胞菌灭活疫苗对虹鳟免疫力和抗病力的影响[J]. 孙金辉,王庆奎,陈成勋,白东清,乔秀亭. 淡水渔业. 2013(01)
[3]两种多糖作为迟缓爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）灭活疫苗佐剂对大菱鲆（Scophthalmus maximus）的免疫保护效果[J]. 隋虎辰,谢国驷,边慧慧,王秀华,张晓华,黄倢. 海洋与湖沼. 2012(05)
[4]嗜水气单胞菌3种疫苗免疫的青鱼外周血免疫指标的变化[J]. 张波,曾令兵,罗晓松,高正勇,周勇,安伟. 华中农业大学学报. 2012(01)
[5]草鱼的一种急性细菌性传染病病原的分离鉴定及致病性研究[J]. 李楠,郭慧芝,焦冉,张书环,刘志新,姚卫建,聂品. 水生生物学报. 2011(06)
[6]3种美人鱼发光杆菌疫苗对卵形鲳鲹的免疫效果[J]. 苏友禄,冯娟,郭志勋,王瑞旋,徐力文,姜敬哲,王江勇. 华南农业大学学报. 2011(03)
[7]草鱼嗜水气单胞菌候选疫苗[J]. 邱并生. 微生物学通报. 2011(03)
[8]几种免疫增强剂对草鱼SOD、CAT及AKP活性的影响[J]. 李赫,宋文华,于翔,富丽静,姚福相,胡宗云,张涛. 水产学杂志. 2010(04)
[9]嗜水气单胞菌灭活疫苗浸泡后鳜IgM基因表达量和抗体效价的变化[J]. 刘雨果,潘厚军,陈偿,石存斌,吴淑勤. 淡水渔业. 2009(06)
[10]Synergistic actions of complement and lysozyme in clearance of Escherichia coli from amphioxus Branchiostoma belcheri[J]. Guangfeng Wang a,Shicui Zhang a,Zhimeng Zhuang b,Zhiping Wang a a Department of Marine Biology,Ocean University of China,Qingdao 266003,China b Yellow Sea Fisheries Research Institute,Qingdao 266071,China. Progress in Natural Science. 2009(02)
硕士论文
[1]草鱼呼肠孤病毒微载体培养技术与灭活疫苗浸泡免疫效果研究[D]. 刘秋凤.上海海洋大学 2013
本文编号：3181024
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