牛蒡子苷元衍生物抗传染性造血器官坏死病毒构效关系及机制研究
发布时间：2021-05-23 18:30
传染性造血器官坏死病毒（Infectious hematopietic necrosis virus,IHNV）引起的鲑鳟鱼类传染性造血器官坏死病（Infectious hematopietic necrosis,IHN）是对鲑鳟鱼养殖产业危害较为严重的一类病毒性疾病,主要危害鲑鳟鱼的鱼苗及当年鱼种,感染后的致死率可以达到100%。IHN已被世界动物卫生组织（Office International des Epizooties,OIE）规定为必须申报的动物疫病,也是我国动物疫病名录中规定的二类动物疫病。由于鱼种苗的免疫系统尚未发育完善,疫苗未能对其进行有效保护,无法解决鱼种苗的患病问题。因此,相关治疗性药物的开发显得更加迫切。目前,水产上仍未有防治IHNV的专用抗病毒药物,而本实验室前期研究发现天然产物牛蒡子苷元对IHNV具有一定的抑制效果。在此基础上,本研究以牛蒡子苷元为先导化合物,设计合成了一系列牛蒡子苷元衍生物。通过体外细胞筛选模型评价衍生物的抗病毒活性,结合比较分子力场分析（Comparative molecular field analysis,Co MFA）模型阐述衍生物...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：148 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
主要符号对照表
第一章 文献综述
1.1 传染性造血器官坏死病简介
1.1.1 IHN病原学
1.1.2 病症和病理变化
1.1.3 流行病学特征
1.1.4 IHN的诊断
1.1.5 IHN的防治
1.2 定量构效关系研究进展
1.2.1 QSAR的发展历程
1.2.2 QSAR的建模方法
1.2.3 QSAR在药物化学中的应用
1.3 牛蒡子苷元研究进展
1.3.1 抗病毒作用
1.3.2 抗炎作用
1.3.3 抗虫
1.3.4 抗肿瘤
1.3.5 其他药理活性
1.4 细胞自噬研究进展
1.4.1 细胞自噬的种类
1.4.2 细胞自噬的常用检测方法
1.4.3 细胞自噬抗病毒的研究进展
1.5 选题的目的和意义
第二章 牛蒡子苷元衍生物的合成
2.1 材料与方法
2.1.1 试剂与仪器
2.1.2 牛蒡子苷元衍生物的合成
2.2 结果与分析
2.2.1 衍生物1的结构表征
2.2.2 衍生物2-20的结构表征
2.2.3 衍生物21-29的结构表征
2.2.4 衍生物30-34的结构表征
2.2.5 衍生物35-57的结构表征
2.3 讨论
2.3.1 反应条件的优化
2.3.2 牛蒡子苷元衍生优化在药物研发中的应用
2.4 小结
第三章 牛蒡子苷元衍生物抗IHNV构效关系研究
3.1 材料与方法
3.1.1 细胞和病毒
3.1.2 试剂和仪器
3.1.3 细胞培养、病毒滴度检测及增殖
3.1.4 牛蒡子苷元衍生物毒性检测
3.1.5 牛蒡子苷元衍生物抗IHNV活性初筛检测
3.1.6 牛蒡子苷元衍生物对IHNV增殖的作用
3.1.7 活性衍生物复筛检测
3.1.8 牛蒡子苷元衍生物抗IHNV活性3D-QSAR模型的构建
3.2 结果与分析
3.2.1 牛蒡子苷元衍生物对EPC细胞最大安全浓度结果
3.2.2 牛蒡子苷元衍生物抗IHNV活性初筛检测结果
3.2.3 抗IHNV衍生物对病毒增殖的抑制结果
3.2.4 3D-QSAR数据集结果
3.2.5 分子叠加结果
3.2.6 CoMFA统计结果
3.2.7 CoMFA模型等势图结果
3.3 讨论
3.3.1 牛蒡子苷元侧链羟基上碳链长度对衍生物抗IHNV活性作用
3.3.2 氮杂环对衍生物抗IHNV活性作用
3.4 小结
第四章 抗IHNV潜在药物的设计、合成与活性研究
4.1 材料与方法
4.1.1 试剂与仪器
4.1.2 模型指导的牛蒡子苷元衍生物的合成
4.1.3 细胞、病毒和实验鱼
4.1.4 新牛蒡子苷元衍生物毒性检测
4.1.5 新牛蒡子苷元衍生物抗IHNV活性检测
4.1.6 衍生物EOA离体抗IHNV活性复筛检测
4.1.7 衍生物EOA对 IHNV诱导的EPC细胞凋亡的作用
4.1.8 衍生物EOA在体抗病毒活性检测
4.2 结果与分析
4.2.1 新牛蒡子苷元衍生物的结构表征
4.2.2 新牛蒡子苷元衍生物对EPC细胞毒性结果
4.2.3 牛蒡子苷元衍生物抗IHNV活性初筛检测结果
4.2.4 抗IHNV衍生物对病毒增殖的抑制结果
4.2.5 活性衍生物复筛结果
4.2.6 衍生物EOA抑制IHNV诱导的细胞凋亡
4.2.7 衍生物EOA在体抗IHNV活性
4.3 讨论
4.3.1 新合成衍生物抗IHNV构效关系
4.3.2 IHNV感染引起的EPC细胞凋亡
4.3.3 EOA可能是免疫抑制剂
4.4 小结
第五章 衍生物EOA抗 IHNV机制研究
5.1 材料与方法
5.1.1 细胞和病毒
5.1.2 药物
5.1.3 试剂、抗体和仪器
5.1.4 超速离心检测
5.1.5 衍生物EOA对 IHNV感染过程的作用
5.1.6 IHNV复制时间的检测
5.1.7 自噬激活剂、抑制剂对IHNV的作用
5.1.8 自噬荧光检测
5.1.9 自噬泡的观察
5.1.10 EOA对LC3真核表达检测
5.1.11 EOA对 JNK通路蛋白的作用
5.1.12 JNK激活剂、抑制剂对IHNV的作用
5.1.13 JNK激活剂、抑制剂对JNK通路蛋白的作用
5.2 结果与分析
5.2.1 EOA不直接作用于病毒粒子
5.2.2 EOA作用于病毒复制早期
5.2.3 自噬激活剂雷帕霉素有抗IHNV活性
5.2.4 EOA诱导EPC细胞自噬
5.2.5 JNK激活剂茴香霉素有抗IHNV活性
5.2.6 衍生物EOA通过激活JNK通路从而诱导细胞自噬
5.3 讨论
5.3.1 衍生物EOA通过作用宿主细胞从而达到抗病毒效果
5.3.2 IHNV能够引起EPC细胞自噬
5.3.3 JNK信号通路对细胞自噬的调控作用
5.4 小结
第六章 结论
参考文献
附录
致谢
个人简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]牛蒡子苷元药理作用的研究进展[J]. 王哲,王佳贺. 中国医药导报. 2018(32)
[2]传染性造血器官坏死病核酸疫苗的构建及其抗性基因对环境细菌抗性的影响[J]. 李渊,赵景壮,刘淼,卢彤岩,任广明,尹家胜,纪锋,徐黎明. 中国水产科学. 2018(01)
[3]香菇多糖提取物体外抗IHNV的机制[J]. 任广明,徐黎明,赵景壮,尹家胜,卢彤岩. 水产学杂志. 2017(05)
[4]QSAR方法的研究进展及其应用[J]. 赵亚玲,黄方. 毒理学杂志. 2017(03)
[5](—)-牛蒡苷元及其对映异构体的不对称合成新方法[J]. 吴平,徐凯,付莹,康廷国,窦德强,翟延君. 有机化学. 2016(05)
[6]Survivin基因在牛蒡子苷元增强人肺癌H460细胞化疗敏感性中的作用[J]. 王焕勤,王静. 国际呼吸杂志. 2015 (06)
[7]鱼类传染性造血器官坏死病毒RT-LAMP检测方法的建立及应用[J]. 刘淼,徐黎明,卢彤岩,赵景壮,曹永生,刘红柏,尹家胜,张金凤,冯剑. 中国水产科学. 2014(05)
[8]牛蒡子苷元抗肿瘤血管生成作用研究[J]. 何凡,孙小玲,宿亚柳,孙东,康廷国. 中药药理与临床. 2014(04)
[9]传染性造血器官坏死病病毒高效RT-PCR检测方法的建立[J]. 徐黎明,刘红柏,徐进,卢彤岩. 水生生物学报. 2013(06)
[10]遗传算法研究进展[J]. 马永杰,云文霞. 计算机应用研究. 2012(04)
博士论文
[1]牛蒡子苷元作用鱼类单殖吸虫靶标及机制研究[D]. 涂笑.西北农林科技大学 2019
[2]宿主细胞对小反刍兽疫病毒天然免疫应答机制的研究[D]. 马晓霞.中国农业科学院 2018
[3]香豆素类化合物抗鲤春病毒血症病毒活性及作用机制研究[D]. 刘镭.西北农林科技大学 2018
[4]肉桂醛—氨基酸希夫碱的合成、抑菌活性及定量构效关系研究[D]. 王慧.东北林业大学 2018
[5]QSAR研究在生命分析化学和环境化学中的应用[D]. 赵春燕.兰州大学 2006
硕士论文
[1]东莨菪内酯酚醚衍生物合成及其杀螨活性的构效关系[D]. 赖婷.西南大学 2018
[2]EPC抗氧化应激通路Nrf2/ARE对鲤春病毒的响应[D]. 杨毅.华中农业大学 2014
本文编号：3202783
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：148 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
主要符号对照表
第一章 文献综述
1.1 传染性造血器官坏死病简介
1.1.1 IHN病原学
1.1.2 病症和病理变化
1.1.3 流行病学特征
1.1.4 IHN的诊断
1.1.5 IHN的防治
1.2 定量构效关系研究进展
1.2.1 QSAR的发展历程
1.2.2 QSAR的建模方法
1.2.3 QSAR在药物化学中的应用
1.3 牛蒡子苷元研究进展
1.3.1 抗病毒作用
1.3.2 抗炎作用
1.3.3 抗虫
1.3.4 抗肿瘤
1.3.5 其他药理活性
1.4 细胞自噬研究进展
1.4.1 细胞自噬的种类
1.4.2 细胞自噬的常用检测方法
1.4.3 细胞自噬抗病毒的研究进展
1.5 选题的目的和意义
第二章 牛蒡子苷元衍生物的合成
2.1 材料与方法
2.1.1 试剂与仪器
2.1.2 牛蒡子苷元衍生物的合成
2.2 结果与分析
2.2.1 衍生物1的结构表征
2.2.2 衍生物2-20的结构表征
2.2.3 衍生物21-29的结构表征
2.2.4 衍生物30-34的结构表征
2.2.5 衍生物35-57的结构表征
2.3 讨论
2.3.1 反应条件的优化
2.3.2 牛蒡子苷元衍生优化在药物研发中的应用
2.4 小结
第三章 牛蒡子苷元衍生物抗IHNV构效关系研究
3.1 材料与方法
3.1.1 细胞和病毒
3.1.2 试剂和仪器
3.1.3 细胞培养、病毒滴度检测及增殖
3.1.4 牛蒡子苷元衍生物毒性检测
3.1.5 牛蒡子苷元衍生物抗IHNV活性初筛检测
3.1.6 牛蒡子苷元衍生物对IHNV增殖的作用
3.1.7 活性衍生物复筛检测
3.1.8 牛蒡子苷元衍生物抗IHNV活性3D-QSAR模型的构建
3.2 结果与分析
3.2.1 牛蒡子苷元衍生物对EPC细胞最大安全浓度结果
3.2.2 牛蒡子苷元衍生物抗IHNV活性初筛检测结果
3.2.3 抗IHNV衍生物对病毒增殖的抑制结果
3.2.4 3D-QSAR数据集结果
3.2.5 分子叠加结果
3.2.6 CoMFA统计结果
3.2.7 CoMFA模型等势图结果
3.3 讨论
3.3.1 牛蒡子苷元侧链羟基上碳链长度对衍生物抗IHNV活性作用
3.3.2 氮杂环对衍生物抗IHNV活性作用
3.4 小结
第四章 抗IHNV潜在药物的设计、合成与活性研究
4.1 材料与方法
4.1.1 试剂与仪器
4.1.2 模型指导的牛蒡子苷元衍生物的合成
4.1.3 细胞、病毒和实验鱼
4.1.4 新牛蒡子苷元衍生物毒性检测
4.1.5 新牛蒡子苷元衍生物抗IHNV活性检测
4.1.6 衍生物EOA离体抗IHNV活性复筛检测
4.1.7 衍生物EOA对 IHNV诱导的EPC细胞凋亡的作用
4.1.8 衍生物EOA在体抗病毒活性检测
4.2 结果与分析
4.2.1 新牛蒡子苷元衍生物的结构表征
4.2.2 新牛蒡子苷元衍生物对EPC细胞毒性结果
4.2.3 牛蒡子苷元衍生物抗IHNV活性初筛检测结果
4.2.4 抗IHNV衍生物对病毒增殖的抑制结果
4.2.5 活性衍生物复筛结果
4.2.6 衍生物EOA抑制IHNV诱导的细胞凋亡
4.2.7 衍生物EOA在体抗IHNV活性
4.3 讨论
4.3.1 新合成衍生物抗IHNV构效关系
4.3.2 IHNV感染引起的EPC细胞凋亡
4.3.3 EOA可能是免疫抑制剂
4.4 小结
第五章 衍生物EOA抗 IHNV机制研究
5.1 材料与方法
5.1.1 细胞和病毒
5.1.2 药物
5.1.3 试剂、抗体和仪器
5.1.4 超速离心检测
5.1.5 衍生物EOA对 IHNV感染过程的作用
5.1.6 IHNV复制时间的检测
5.1.7 自噬激活剂、抑制剂对IHNV的作用
5.1.8 自噬荧光检测
5.1.9 自噬泡的观察
5.1.10 EOA对LC3真核表达检测
5.1.11 EOA对 JNK通路蛋白的作用
5.1.12 JNK激活剂、抑制剂对IHNV的作用
5.1.13 JNK激活剂、抑制剂对JNK通路蛋白的作用
5.2 结果与分析
5.2.1 EOA不直接作用于病毒粒子
5.2.2 EOA作用于病毒复制早期
5.2.3 自噬激活剂雷帕霉素有抗IHNV活性
5.2.4 EOA诱导EPC细胞自噬
5.2.5 JNK激活剂茴香霉素有抗IHNV活性
5.2.6 衍生物EOA通过激活JNK通路从而诱导细胞自噬
5.3 讨论
5.3.1 衍生物EOA通过作用宿主细胞从而达到抗病毒效果
5.3.2 IHNV能够引起EPC细胞自噬
5.3.3 JNK信号通路对细胞自噬的调控作用
5.4 小结
第六章 结论
参考文献
附录
致谢
个人简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]牛蒡子苷元药理作用的研究进展[J]. 王哲,王佳贺. 中国医药导报. 2018(32)
[2]传染性造血器官坏死病核酸疫苗的构建及其抗性基因对环境细菌抗性的影响[J]. 李渊,赵景壮,刘淼,卢彤岩,任广明,尹家胜,纪锋,徐黎明. 中国水产科学. 2018(01)
[3]香菇多糖提取物体外抗IHNV的机制[J]. 任广明,徐黎明,赵景壮,尹家胜,卢彤岩. 水产学杂志. 2017(05)
[4]QSAR方法的研究进展及其应用[J]. 赵亚玲,黄方. 毒理学杂志. 2017(03)
[5](—)-牛蒡苷元及其对映异构体的不对称合成新方法[J]. 吴平,徐凯,付莹,康廷国,窦德强,翟延君. 有机化学. 2016(05)
[6]Survivin基因在牛蒡子苷元增强人肺癌H460细胞化疗敏感性中的作用[J]. 王焕勤,王静. 国际呼吸杂志. 2015 (06)
[7]鱼类传染性造血器官坏死病毒RT-LAMP检测方法的建立及应用[J]. 刘淼,徐黎明,卢彤岩,赵景壮,曹永生,刘红柏,尹家胜,张金凤,冯剑. 中国水产科学. 2014(05)
[8]牛蒡子苷元抗肿瘤血管生成作用研究[J]. 何凡,孙小玲,宿亚柳,孙东,康廷国. 中药药理与临床. 2014(04)
[9]传染性造血器官坏死病病毒高效RT-PCR检测方法的建立[J]. 徐黎明,刘红柏,徐进,卢彤岩. 水生生物学报. 2013(06)
[10]遗传算法研究进展[J]. 马永杰,云文霞. 计算机应用研究. 2012(04)
博士论文
[1]牛蒡子苷元作用鱼类单殖吸虫靶标及机制研究[D]. 涂笑.西北农林科技大学 2019
[2]宿主细胞对小反刍兽疫病毒天然免疫应答机制的研究[D]. 马晓霞.中国农业科学院 2018
[3]香豆素类化合物抗鲤春病毒血症病毒活性及作用机制研究[D]. 刘镭.西北农林科技大学 2018
[4]肉桂醛—氨基酸希夫碱的合成、抑菌活性及定量构效关系研究[D]. 王慧.东北林业大学 2018
[5]QSAR研究在生命分析化学和环境化学中的应用[D]. 赵春燕.兰州大学 2006
硕士论文
[1]东莨菪内酯酚醚衍生物合成及其杀螨活性的构效关系[D]. 赖婷.西南大学 2018
[2]EPC抗氧化应激通路Nrf2/ARE对鲤春病毒的响应[D]. 杨毅.华中农业大学 2014
本文编号：3202783
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