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镜鲤鳞被发育相关基因(FGF1a/FGFR1a)的克隆与分析

发布时间:2021-05-23 20:34
  通过特异调取与鳞被发育的相关基因,得到了FGF/FGFR、EDA/EDAR、TPT1等基因。从中选择FGF1a/FGFR1a一对基因,开展了克隆和分析研究。研究利用中国水产科学研究院的鲤鱼EST数据库,设计包含CDS全长的特异引物,得到FGF1a/FGFR1a基因的全长CDS。分别克隆测序发现:1.镜鲤FGF1a基因全长的CDS包含444个碱基,其编码一个含有146个氨基酸的蛋白质,包含一个受体结合位点。2.镜鲤FGF1a基因编码的氨基酸序列与其他物种比对,结果显示镜鲤与斑马鱼相似度最高,达85.03%,而与其亲缘关系较远的人类、老鼠、非洲爪蟾蜍及鸡的相似度较低,分别是49.68%、49.68%、44.59%、45.22%,总体看来,不同物种间该基因具有保守性。3.各个组织RT-PCR显示:FGF1a基因在镜鲤的心脏、肾脏、腮、肌肉、肝脏和皮肤中均有表达,且在皮肤中的表达尤为明显。4.原位杂交技术发现:FGF1a基因在鱼刚长鳞片的皮肤上表达较高,表明该基因可能参与鳞被发育;同时在幼鱼尾鳍、背鳍和腹鳍中也有特异的高表达信号,表明该基因也可能参与鳍条的发育过程。5.镜鲤FGFR1a基因全长... 

【文章来源】:河南师范大学河南省

【文章页数】:46 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
目录
第一章 文献综述
    1.1 鳞被发育的研究现状
    1.2 鱼类的鳞
    1.3 鳞被研究的目的
    1.4 鳞被发育的研究进展
        1.4.1 鳞被发育相关因子的发现
        1.4.2 鳞的发育模式
    1.5 鲤鱼中的天然突变体---镜鲤
    1.6 以斑马鱼作为鳞被发育研究模式生物的优点
第二章 FGF1a 基因的克隆与分析
    2.1 实验材料与方法
        2.1.1 实验材料的获取与管理
        2.1.2 主要仪器设备及试剂
    2.2 FGF1a 基因的克隆与表达
        2.2.1 FGF1a 基因的调取
        2.2.2 FGF1a 基因 CDS 全长的克隆
        2.2.3 基因序列及进化树分析
        2.2.4 原位杂交检测基因在皮肤中的表达
    2.3 结果与分析
        2.3.1 FGF1a 基因全长 CDS 的序列分析
        2.3.2 FGF1a 在各组织中的表达
        2.3.3 FGF1a 基因在皮肤中的表达
    2.4 讨论
第三章 FGFR1a 基因的克隆与分析
    3.1 实验材料与方法
    3.2 FGFR1a 基因的克隆与表达
        3.2.1 FGFR1a 基因的调取
        3.2.2 FGFR1a 基因 CDS 全长的克隆
        3.2.3 基因序列及进化树分析
        3.2.4 原位杂交检测基因在皮肤中的表达
    3.3 结果与分析
        3.3.1 FGFR1a 基因全长 CDS 的序列分析
        3.3.2 FGFR1a 在各组织中的表达
    3.4 讨论
参考文献
致谢
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【参考文献】:
期刊论文
[1]鲤鱼Ectodysplasin-A(Eda)基因生物信息学及功能分析[J]. 王阳阳,蒋丽,程安达,张保勇,马龙,李恒德,孙效文.  生物技术通报. 2013(11)
[2]鱼类中鳞被发育的研究进展及展望[J]. 蒋丽,张保勇,李恒德,徐鹏,孙效文.  安徽农业科学. 2011(34)
[3]人成纤维细胞生长因子受体2Ⅲc及其突变型重组腺病毒的获得和在乳腺癌细胞中的表达[J]. 张勇仓,李丽玲,陈小佳,秦丽,郭淑军,刘兰,徐丽慧,洪岸.  生物工程学报. 2010(03)
[4]总RNA提取方法的比较与分析[J]. 林玲,杨燕凌,何海福,汪世华.  武夷科学. 2009(00)
[5]不同种属间成纤维细胞生长因子受体1限制片段多态性的初步研究[J]. 陈书明,刘强,苗传龙,刘子韬,于永利.  白求恩医科大学学报. 2001(03)



本文编号:3202937

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