齐口裂腹鱼MCH、CRH和GnRH2基因的克

发布时间：2021-05-25 19:45

　　为研究黑色素聚集激素（melanin-concentrating hormone,MCH）、促肾上腺皮质激素释放激素（corticotropin-releasing hormone, CRH）和促性腺激素释放激素（gonadotropin releasing hormone,GnRH）基因在齐口裂腹鱼摄食调控中发挥的作用,本试验首先利用RT-PCR和RACE技术首次克隆了齐口裂腹鱼（Schizothorax prenanti）MCH、CRH和GnRH2的cDNA全序列；随后运用荧光定量PCR技术对MCH、CRH和GnRH2在不同组织的分布进行了检测；最后研究在不同摄食状态下MCH、CRH和GnRH2 mRNA在下丘脑表达的影响变化。研究结果表明：齐口裂腹鱼MCH cDNA全长序列为589bp,其中5’非编码区（5’-UTR）66bp,3’非编码区（3’-UTR）148 bp,开放阅读框（ORF）375bp,编码124个氨基酸包括N末端24个氨基酸的信号肽、C末端17个氨基酸的成熟肽和13个氨基酸的神经肽Mgrp,与金鱼（Carassius auratus）的MCH的序列同源性最高,相似... 

【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词表
前言
一、文献综述
    1. MCH、CRH和GNRH2的结构
        1.1 MCH的结构
        1.2 CRH的结构
        1.3 GnRH2的结构
    2. MCH、CRH和GNRH2的分布
        2.1 MCH的分布
        2.2 CRH的分布
        2.3 GnRH2的分布
    3. MCH、CRH和GNRH2的生物学功能
        3.1 MCH的生物学功能
        3.2 CRH的生物学功能
        3.3 GnRH2的生物学功能
    4 本论文研究的目的和意义
二、齐口裂腹鱼MCH、CRH和GNRH2基因的克隆
    1 材料
        1.1 动物材料
        1.2 试剂
        1.3 主要仪器设备
    2 方法
        2.1 总RNA的抽提
        2.2 RACE扩增
        2.3 目的片段的分离和回收
        2.4 连接和转化
        2.5 菌落PCR及测序
        2.6 基因序列分析
    3 结果
        3.1 MCH基因的克隆和序列分析
        3.2 CRH基因的克隆和序列分析
        3.3 GnRH2基因的克隆和序列分析
    4 分析与讨论
        4.1 MCH基因的系统分析
        4.2 CRH基因的系统分析
        4.3 GnRH2基因的系统分析
三 齐口裂腹鱼MCH、CRH和GNRH2基因的分布
    1 动物材料
    2 方法
        2.1 引物设计与检测
        2.2 实时荧光定量
        2.3 数据分析
    3 结果
    4 分析与讨论
        4.1 MCH在不同组织的表达
        4.2 CRH在不同组织的表达
        4.3 GnRH2在不同组织的表达
四 不同摄食水平对MCH、CRH和GNRH2表达水平的影响
    1 动物材料
    2 方法
        2.1 餐前餐后对MCH、CRH和GnRH2表达水平的影响
        2.2 长期禁食对MCH、CRH和GnRH2表达水平的影响
    3 结果
        3.1 禁食对MCH表达的影响
        3.2 禁食对CRH表达的影响
        3.3 禁食对GnRH2表达的影响
    4 分析与讨论
结论
参考文献
致谢
附录
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本文编号：3205905