一株水产副溶血弧菌拮抗菌筛选的研究
发布时间：2021-06-14 08:47
生物防治与药物防治相比,具有很大的优越性。筛选对副溶血弧菌具有高效的抑菌菌株具有实际生产意义。本试验从生病的南美白对虾上筛选出一株副溶血弧菌Vp1,利用其筛选出7株具有较强抑菌效果的芽孢杆菌A、B、C、D、E、F、G,其中B、C、D、E、F、G为地衣芽孢杆菌,A为解淀粉芽孢杆菌。进行安全试验表明:G菌的抑菌效果较好,A、C菌具有溶血现象,B、D、E、F等的抑菌圈都较小。后续实验采用G菌进行了生物学特性及对感染副溶血弧菌的斑马鱼的保护效果实验,结果表明:G菌在32℃,pH为5,盐度0.5%时,生长最佳。人工腹腔急性毒性注射感染斑马鱼4x108CFU/mL,12h全部死亡,可作为后续保护实验中病原菌的浓度。菌株G对斑马鱼96 h-LC50大于2330 mg/L。Vp1（2.046x108CFU/mL）与G菌（1.5375x108CFU/mL）混合,起到50%的保护效果。因此,实验结果表明成功筛选的G菌对副溶血弧菌Vp1具有较好的防治效果,为开发新的生物制剂提供一些理论依据。
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－２鱼体表感染副溶血弧菌的临床症状（Ａ为对照鱼，Ｂ为感染鱼）??
，，，养殖用水将１丄５受试液分为２－６组，终浓度分别为：化２３３、２．３３、２３３０ｍｇ／Ｌ?（５．６ｘｌ〇ｉＧｃＦＵ／ｍＬ），第１组为阴性对照：无菌生理盐水，性对照组，副溶血弧菌Ｖｐｌ菌株，终浓度２３．３ｍｇ／Ｌ（３．５ｘｌ〇９ＣＦＵ／ｍＬ鱼浸泡在１－６组菌液中，观察１?ｈ、２?ｈ、４?ｈ、８?ｈ、１６?ｈ、２４?ｈ、４８?ｈ、７２体异常及死亡数目，根据谢凤君等Ｐｓｉ及《新化学物质评估导则》ｐｅｌ准评定菌株Ｔ－１对斑马鱼的毒性分级。??抗菌株对几株致病弧菌的括抗效果??用点种法，同２．２，对哈维氏弧菌，副溶血弧菌Ｋ，溶藻弧菌的掉抗效验结果??抗菌株茹选结果??筛选得到屯株具有枯抗副溶血弧菌Ｖｐｌ的菌株，分别命名为Ａ、Ｂ、ＣＦ、Ｇ，其中经溶血性检测发现Ａ、Ｃ具有溶血性。初筛实验结果图３－
然后３７°Ｃ倒置培养２４ｈ，再将Ｖｐｌ?（Ｏ．ｌｍＬ）与营养琼脂液态（ｌＯｍＬ，５０’Ｃ）??混合均匀，倒入涂有Ｇ菌的平板上，３７’Ｃ倒置培养２４ｈ。发现枯抗效果更明显。??具体结果见图３－３。??口闕??图３－３?Ｇ菌对几株弧菌的括抗效果??Ｆｉｇ．?３－３?Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?Ｇ?ｏｎ?ｓｅｖｅｒａｌ?ｓｔｒａｉｎｓ?ｏｆ?Ｖｉｂｒｉｏ??３．５?Ｇ菌对斑马鱼的急性毒性试验??试验结果见表３－２，显７Ｋ斑马鱼浸泡在浓度为０?ｍｇ／Ｌ、０．２３３?ｍｇ／Ｌ、２．巧ｍｇ／Ｌ、??２３．３ｍｇ／Ｌ、２３３ｍｇ／Ｌ、２３３０ｍｇ／Ｌ的受试菌液中生长良化未出现死亡、行动迟??缓等症状，说明菌株Ｇ对斑马鱼９６ｈ－ＬＣ５０大于２３３０ｍｇ／Ｌ；根据《ＧＢ／Ｔ１３２６７－??９１水质物质对淡水鱼（斑马鱼）急性毒性测定方法》标准评定菌株Ｇ对斑马鱼??无毒，而浸泡Ｖｐｌ的阳性对照组，平均死亡率在１００％，说明该斑马鱼对该致病??菌非常敏感??１４??
【参考文献】：
期刊论文
[1]海产品中副溶血弧菌检测方法研究进展[J]. 纪懿芳,胡文忠,姜爱丽,冯可,董妍. 食品工业科技. 2015(05)
[2]石斑鱼及暂养环境中副溶血弧菌分离鉴定与毒力评价[J]. 高磊,邓益琴,刘助红,龙云映,陈偿. 海洋与湖沼. 2014(06)
[3]枯草芽孢杆菌K-6-9发酵条件优化及放大[J]. 陈莉,汪立平,赵勇,陈乐,邓添. 食品工业科技. 2014(03)
[4]地衣芽孢杆菌及其在水产养殖生产中的应用[J]. 郭荷梅. 北京农业. 2012(21)
[5]6株芽孢杆菌的生物学特性比较研究[J]. 李雅丽,秦艳,周绪霞,李卫芬. 中国畜牧兽医. 2011(04)
[6]枯草芽孢杆菌生物学特性的研究[J]. 杨锋,章亭洲. 饲料研究. 2011(03)
[7]来自大黄鱼（Pseudosciaena crocea）肠道的弧菌拮抗菌的筛选与鉴定[J]. 王娟,封永辉,蔡立胜,王建,曲宪成,张庆华. 海洋与湖沼. 2010(05)
[8]副溶血弧菌检测方法的研究进展[J]. 王国玲,栾玉明,刘达雄,陆家海. 中国卫生检验杂志. 2010(06)
[9]副溶血弧菌的快速鉴定检测方法研究进展[J]. 杨芳,李秀娟,徐保红. 河北医药. 2010(07)
[10]高效固氮芽孢杆菌筛选及其生物学特性[J]. 孙建光,张燕春,徐晶,胡海燕. 中国农业科学. 2009(06)
硕士论文
[1]副溶血弧菌感染斑马鱼的致病性及天然免疫应答研究[D]. 张永华.上海海洋大学 2012
[2]鸡源益生菌BL-Y-1菌株分离鉴定、发酵条件及其耐受性研究[D]. 王焕.河北农业大学 2009
[3]大黄鱼两株病原弧菌拮抗菌的研究[D]. 郭国军.集美大学 2007
[4]地衣芽孢杆菌TS-01培养条件的研究[D]. 谷春涛.中国农业大学 2004
本文编号：3229478
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－２鱼体表感染副溶血弧菌的临床症状（Ａ为对照鱼，Ｂ为感染鱼）??
，，，养殖用水将１丄５受试液分为２－６组，终浓度分别为：化２３３、２．３３、２３３０ｍｇ／Ｌ?（５．６ｘｌ〇ｉＧｃＦＵ／ｍＬ），第１组为阴性对照：无菌生理盐水，性对照组，副溶血弧菌Ｖｐｌ菌株，终浓度２３．３ｍｇ／Ｌ（３．５ｘｌ〇９ＣＦＵ／ｍＬ鱼浸泡在１－６组菌液中，观察１?ｈ、２?ｈ、４?ｈ、８?ｈ、１６?ｈ、２４?ｈ、４８?ｈ、７２体异常及死亡数目，根据谢凤君等Ｐｓｉ及《新化学物质评估导则》ｐｅｌ准评定菌株Ｔ－１对斑马鱼的毒性分级。??抗菌株对几株致病弧菌的括抗效果??用点种法，同２．２，对哈维氏弧菌，副溶血弧菌Ｋ，溶藻弧菌的掉抗效验结果??抗菌株茹选结果??筛选得到屯株具有枯抗副溶血弧菌Ｖｐｌ的菌株，分别命名为Ａ、Ｂ、ＣＦ、Ｇ，其中经溶血性检测发现Ａ、Ｃ具有溶血性。初筛实验结果图３－
然后３７°Ｃ倒置培养２４ｈ，再将Ｖｐｌ?（Ｏ．ｌｍＬ）与营养琼脂液态（ｌＯｍＬ，５０’Ｃ）??混合均匀，倒入涂有Ｇ菌的平板上，３７’Ｃ倒置培养２４ｈ。发现枯抗效果更明显。??具体结果见图３－３。??口闕??图３－３?Ｇ菌对几株弧菌的括抗效果??Ｆｉｇ．?３－３?Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?Ｇ?ｏｎ?ｓｅｖｅｒａｌ?ｓｔｒａｉｎｓ?ｏｆ?Ｖｉｂｒｉｏ??３．５?Ｇ菌对斑马鱼的急性毒性试验??试验结果见表３－２，显７Ｋ斑马鱼浸泡在浓度为０?ｍｇ／Ｌ、０．２３３?ｍｇ／Ｌ、２．巧ｍｇ／Ｌ、??２３．３ｍｇ／Ｌ、２３３ｍｇ／Ｌ、２３３０ｍｇ／Ｌ的受试菌液中生长良化未出现死亡、行动迟??缓等症状，说明菌株Ｇ对斑马鱼９６ｈ－ＬＣ５０大于２３３０ｍｇ／Ｌ；根据《ＧＢ／Ｔ１３２６７－??９１水质物质对淡水鱼（斑马鱼）急性毒性测定方法》标准评定菌株Ｇ对斑马鱼??无毒，而浸泡Ｖｐｌ的阳性对照组，平均死亡率在１００％，说明该斑马鱼对该致病??菌非常敏感??１４??
【参考文献】：
期刊论文
[1]海产品中副溶血弧菌检测方法研究进展[J]. 纪懿芳,胡文忠,姜爱丽,冯可,董妍. 食品工业科技. 2015(05)
[2]石斑鱼及暂养环境中副溶血弧菌分离鉴定与毒力评价[J]. 高磊,邓益琴,刘助红,龙云映,陈偿. 海洋与湖沼. 2014(06)
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[8]副溶血弧菌检测方法的研究进展[J]. 王国玲,栾玉明,刘达雄,陆家海. 中国卫生检验杂志. 2010(06)
[9]副溶血弧菌的快速鉴定检测方法研究进展[J]. 杨芳,李秀娟,徐保红. 河北医药. 2010(07)
[10]高效固氮芽孢杆菌筛选及其生物学特性[J]. 孙建光,张燕春,徐晶,胡海燕. 中国农业科学. 2009(06)
硕士论文
[1]副溶血弧菌感染斑马鱼的致病性及天然免疫应答研究[D]. 张永华.上海海洋大学 2012
[2]鸡源益生菌BL-Y-1菌株分离鉴定、发酵条件及其耐受性研究[D]. 王焕.河北农业大学 2009
[3]大黄鱼两株病原弧菌拮抗菌的研究[D]. 郭国军.集美大学 2007
[4]地衣芽孢杆菌TS-01培养条件的研究[D]. 谷春涛.中国农业大学 2004
本文编号：3229478
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