草鱼IL-23不同亚基对比较菌性感染的应答及其二聚化特征
发布时间:2021-07-16 16:02
目的:白细胞介素-23(interleukin-23,IL-23)是一种炎性细胞因子,主要由活化的树突状细胞、巨噬细胞、内皮细胞和T细胞分泌,在生物体抗感染免疫应答中起到重要的生理及病理作用。IL-23是由p19和p40两个亚基通过二硫键相连接形成的异源二聚体,只有当p19和p40共同表达才具有生物学功能。多种鱼类已鉴定出三种p40同源基因p40a/b/c(p40a、p40b、p40c),但它们是否都能与p19形成异源二聚体,目前还没有确凿的证据。众所周知,草鱼是中国“四大家鱼”之一,是我国重要的淡水养殖鱼类,但由于其易受各种病原菌和病毒的危害,引起炎症反应甚至发生聚集性死亡,导致养殖户经济损失严重。本研究旨在明确p40a/b/c与p19基因在正常草鱼组织中的表达差异、对细菌性感染的应答反应,以及它们之间形成异源二聚体的特征,预期为鱼类肠道炎症的病理机制研究奠定基础。方法:(1)通过NCBI获取草鱼p19及p40a/b/c的完整mRNA序列,设计相应qPCR引物,运用qPCR技术检测上述基因在健康草鱼以及使用嗜水气单胞菌腹腔刺激草鱼24 h后各组织中的转录水平;另采用腹腔注射和肛灌两种...
【文章来源】:苏州大学江苏省 211工程院校
【文章页数】:121 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图1.?IL-12家族信号通路(引自Cytokine,?2018年)??Figure?1.?IL-12?family?signaling?pathway?(Cytokine,?2018)??3??
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第一章?萆鱼IL-23不同亚基对细菌性感染的应答及其二聚化特征??显差异。虽然在肛灌第Id均显著上调,但第3d、7?d的表达变化不同,第3d??除了?仍然高于对照组表达以夕卜祁fl/阶则显著下调至对照组以下,到第7?d,??与又显著上调,而;你与WOc则只恢复到正常水平。??图1-5显示的结果表明,草鱼/?79与;对嗜水气单胞菌的全身感染与??局部感染的免疫应答机制不同。在4个基因中,p/9与;^此对嗜水气单胞菌的??免疫应答一致,与;7扣/7及;的应答有所差异;;他及;的应答趋势一致,??但/7洲<:的应答略弱于册。??G3IP?1?d?驗?AI?1?d??Q?IP3d?E3?AI3d??〇?IP?7?d?□?Al?7?d??40??35-?料??30-?**??^?25-?**?_?_??I?2〇-?1??_?圓?Li???m??i:i?|:is?1?i??+—二;―…二?fcnt,画?irr??pl9?p4Da?p40b?p40c??图1-5嗜水气单胞菌不同感染方式对肠道和/7/9mRNA相对表达水平??的影响(n=3)??注:IP:腹腔注射:AI:肛灌注射:*,与对照组或不同时间之间的差异显著(p<0.05);?**,??与对照组或不同时间之间的差异极显著(p<0.01)??Fig.?1-5?Effects?of?different?infection?routes?of?A.?hydrophila?on?the?mRNA??expression?levels?of?the?p40a/b/c?and?pl9?genes?in?grass?carp?intestine?(n=3)??
【参考文献】:
期刊论文
[1]白细胞介素-23 p19 RNA干扰对结肠炎小鼠模型的治疗作用[J]. 任渝棠,姜泊,林欣. 胃肠病学. 2019(01)
[2]草鱼干扰素3蛋白多克隆抗体制备及其应用[J]. 范成坚,苏博洋,苏建国. 淡水渔业. 2019(01)
[3]IL-23/Th17通路与支气管哮喘的关系[J]. 张颖丽,黄花荣. 新医学. 2018(10)
[4]IL-39:IL-12家族的新成员[J]. 潘秀和,刘超波,孙俊,李燕,李明才. 生命的化学. 2016(04)
[5]一种“高性价比”切胶纯化原核表达蛋白的方法[J]. 高慎阳,查恩辉,王珅,周铁忠,李慧. 中国农学通报. 2010(22)
[6]免疫共沉淀技术的研究进展[J]. 郭纯. 中医药导报. 2007(12)
[7]以三维荧光反卷积显微技术研究活体细胞中分泌囊泡的空间分布[J]. 李栋栋,郭学彬,瞿安连,徐涛. 生物化学与生物物理学报. 2003(07)
[8]Immunological Detection of Arbutin[J]. 董敏,李国富,李津,周飞,公衍道,张秀芳,赵南明. Tsinghua Science and Technology. 1999(03)
[9]致病性嗜水气单胞菌及其所致鱼病综述[J]. 陆承平. 水产学报. 1992(03)
[10]草鱼肾组织细胞系CIK的建立及其生物学特性[J]. 左文功,钱华鑫,许映芳,杜森英,杨先乐. 水产学报. 1986(01)
本文编号:3287317
【文章来源】:苏州大学江苏省 211工程院校
【文章页数】:121 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图1.?IL-12家族信号通路(引自Cytokine,?2018年)??Figure?1.?IL-12?family?signaling?pathway?(Cytokine,?2018)??3??
?■??g?500LI?I?g?1?.?i?■?j.1??iiyjuuHiujui??p-actm?unDnHnmDBmisnBi?p-act^nE3Qd!QHEI3QQBS3^2DE2??Pi9?p?物■hhhhhhhhhhi??8001?p40b?2000-1?p40c??600-?T?¥?1500-?i??iiA?i?i..i?idi?I?il^i??I?IIlUIIIi?_??P-actin?P-actin??p4〇b?mmumiiiimm??图1-2正常草鱼各组织和;7/9mRNA相对表达水平(n=3)??Fig.?1-2?Relativeand?p/9?mRNA?expression?levels?in?normal?grass?carp??tissues?(n=3)??2.2嗜水气单胞菌感染对草鱼组织中和;7J9基因表达的影响??2.2.1嗜水气单胞菌感染24?h后草鱼组织中;^0a/&/c和;mRNA相对表达??水平??28°C养殖条件下,腹腔注射嗜水气单胞菌24?h后,肉眼可见多数草鱼游动??缓慢,几乎不摄食,体表较多出血点出现(尤其是胸鳍处),鳃丝充血,有少量??腹水。??利用实时荧光定量PCR检测,W〇a/6/c和在尾鳍、表皮、肌肉、脑、??鳃、胸腺、脾脏、肝脏、肠道、体肾、头肾和心脏等12个组织及血液中的表达??量也发生了变化。以腹腔注射等量PBS缓冲液为对照组,腹腔注射嗜水气单胞??22??
第一章?萆鱼IL-23不同亚基对细菌性感染的应答及其二聚化特征??显差异。虽然在肛灌第Id均显著上调,但第3d、7?d的表达变化不同,第3d??除了?仍然高于对照组表达以夕卜祁fl/阶则显著下调至对照组以下,到第7?d,??与又显著上调,而;你与WOc则只恢复到正常水平。??图1-5显示的结果表明,草鱼/?79与;对嗜水气单胞菌的全身感染与??局部感染的免疫应答机制不同。在4个基因中,p/9与;^此对嗜水气单胞菌的??免疫应答一致,与;7扣/7及;的应答有所差异;;他及;的应答趋势一致,??但/7洲<:的应答略弱于册。??G3IP?1?d?驗?AI?1?d??Q?IP3d?E3?AI3d??〇?IP?7?d?□?Al?7?d??40??35-?料??30-?**??^?25-?**?_?_??I?2〇-?1??_?圓?Li???m??i:i?|:is?1?i??+—二;―…二?fcnt,画?irr??pl9?p4Da?p40b?p40c??图1-5嗜水气单胞菌不同感染方式对肠道和/7/9mRNA相对表达水平??的影响(n=3)??注:IP:腹腔注射:AI:肛灌注射:*,与对照组或不同时间之间的差异显著(p<0.05);?**,??与对照组或不同时间之间的差异极显著(p<0.01)??Fig.?1-5?Effects?of?different?infection?routes?of?A.?hydrophila?on?the?mRNA??expression?levels?of?the?p40a/b/c?and?pl9?genes?in?grass?carp?intestine?(n=3)??
【参考文献】:
期刊论文
[1]白细胞介素-23 p19 RNA干扰对结肠炎小鼠模型的治疗作用[J]. 任渝棠,姜泊,林欣. 胃肠病学. 2019(01)
[2]草鱼干扰素3蛋白多克隆抗体制备及其应用[J]. 范成坚,苏博洋,苏建国. 淡水渔业. 2019(01)
[3]IL-23/Th17通路与支气管哮喘的关系[J]. 张颖丽,黄花荣. 新医学. 2018(10)
[4]IL-39:IL-12家族的新成员[J]. 潘秀和,刘超波,孙俊,李燕,李明才. 生命的化学. 2016(04)
[5]一种“高性价比”切胶纯化原核表达蛋白的方法[J]. 高慎阳,查恩辉,王珅,周铁忠,李慧. 中国农学通报. 2010(22)
[6]免疫共沉淀技术的研究进展[J]. 郭纯. 中医药导报. 2007(12)
[7]以三维荧光反卷积显微技术研究活体细胞中分泌囊泡的空间分布[J]. 李栋栋,郭学彬,瞿安连,徐涛. 生物化学与生物物理学报. 2003(07)
[8]Immunological Detection of Arbutin[J]. 董敏,李国富,李津,周飞,公衍道,张秀芳,赵南明. Tsinghua Science and Technology. 1999(03)
[9]致病性嗜水气单胞菌及其所致鱼病综述[J]. 陆承平. 水产学报. 1992(03)
[10]草鱼肾组织细胞系CIK的建立及其生物学特性[J]. 左文功,钱华鑫,许映芳,杜森英,杨先乐. 水产学报. 1986(01)
本文编号:3287317
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