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miR-219通过抑制bmal1b调控斑马鱼生物钟

发布时间:2021-07-16 16:34
  地球自转导致了昼夜交替变化。从低等单细胞生物到高等动物人类,对这种昼夜循环的长期适应而演化出的记时机制即生物钟。生物钟是指大约24小时的周期性生理和行为变化,包括饮食、睡眠和体温等。经典的生物钟反馈环路为Clock和Bmal蛋白形成异二聚体,随后激活下游per和cry基因的表达,Per和Cry蛋白也形成异二聚体从而抑制Clock:Bmal蛋白复合物的活性。目前对于核心生物钟基因调控机制的研究主要集中在转录水平以及翻译后修饰,对于其在转录后水平的研究还知之甚少。MicroRNAs(miRNAs)是一类约22个碱基组成的非编码RNA,可以与靶基因的3’端非翻译区(3’UTR)结合从而影响信使RNA(mRNA)的稳定性或者抑制其翻译。miRNAs调节体内许多生物化学过程,这其中就包括生物钟。前人的一项研究发现小鼠的miR-219受生物钟调控,敲降miR-219导致小鼠运动周期加长,然而miR-219调控生物钟的机制仍然不明。斑马鱼拥有三个miR-219,分布在三个染色体上。我们采用原位杂交的方法发现斑马鱼的三个miR-219呈现不同图式的节律性表达。在体外细胞实验中,我们发现miR-219的... 

【文章来源】:苏州大学江苏省 211工程院校

【文章页数】:73 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

miR-219通过抑制bmal1b调控斑马鱼生物钟


生物钟环路Fig.l-2modelofciYCadianclockfeedbackloop15斑马鱼生物钟:

示意图,原位杂交,示意图,斑马鱼


第三章 实验结果及分析 miR-219 通过抑制 bmal1b 调控斑马鱼生物钟第三章 实验结果及分析3.1 在斑马鱼体内 miR-219 是振荡表达的3.1.1 利用原位杂交检测miR-219前体的表达正如在miRNA的产生中所述,它的成熟体是一段约22个碱基的单链非编码RNA。Yoontae Lee的研究表明,microRNA的转录也是由RNA聚合酶Ⅱ催化启动的。它的产生有三个阶段,分别是初级microRNA(primary miRNA),前体microRNA(precursor miRNA),以及成熟体 microRNA (mature miRNA)。现行的运用比较多的就是使用LNA修饰的 microRNA成熟体探针对其进行检测,这种方法虽然特异性很好,但是有几个问题。首先这种方法非常昂贵,对每一种 microRNA都必

整体原位杂交,节表,生物钟,斑马鱼


果及分析 miR-219 通过抑制 bmal1b 调控斑马鱼生物钟30图3-3 整体原位杂交显示pri-miR-219-1, pri-miR-219-2, pri-miR-219-3都是节律表达的Fig.3-3 Whole mount in situ hybridization of pri-miR-219-1, pri-miR-219-2,pri-miR-219-3 showed rhythmic expression of primary miRNA


本文编号:3287359

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