杂交鳢（斑鳢♀×乌鳢♂）溃疡病病原的分离、鉴定及其防治中草药的筛选
发布时间：2021-07-28 04:11
杂交鳢（Channa Maculate♀×Channa Argus♂）味道鲜美、营养价值高,历来倍受消费者的喜爱,但随着养殖密度的增加,杂交鳢疾病频繁爆发,导致杂交鳢大量死亡或体表留有伤疤失去商用价值,在一定程度上限制了杂交鳢养殖业的发展空间。本实验针对2014年发生在广东省中山市三角镇爆发溃疡病的养殖杂交鳢进行采样,通过常规的细菌分离方法、生理生化鉴定、分子生物学鉴定等方法对病原菌进行分析,并开展药物敏感性试验和中草药抑菌、杀菌试验,筛选具有较好抑菌效果的抗生素和中草药。本实验从自然发病的杂交鳢病灶中分离得到1株真菌,命名为G1,真菌G1生长速度较快,菌落结构疏松,菌落表面呈现灰绿色。通过显微镜观察发现:真菌G1主体部分由错综复杂菌丝构成,其中营养菌丝具有明显的分隔,而气生菌丝的某一部分转变为分生孢子梗,分生孢子梗顶端膨大形成球形顶囊,顶囊表面有许多附着着球形分生孢子的小梗,从形态学角度初步鉴定为黄曲霉（Aspergillus flavus）。采用以菌株G1基因组DNA为模板,扩增所测菌株的内转录间隔区序列（Internal Transcribed Spacer,ITS）,通过NCB...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语表（Abbreviation）
第一章 文献综述
1.1 杂交鳢概述
1.1.1 杂交鳢简介
1.1.2 杂交鳢的营养价值
1.2 杂交鳢疾病及其防治研究
1.2.1 溃疡病
1.2.2 结节病
1.2.3 水霉病
1.3 气单胞菌研究进展
1.3.1 气单胞菌的分类地位及检测
1.3.2 气单胞菌对水产养殖动物的危害
1.4 中草药在水产养殖中的应用
1.4.1 提高水产动物免疫力
1.4.2 对病原体的直接抑制或杀灭
1.4.3 促进生长，改善肌肉品质
第二章 杂交鳢溃疡病病原的分离鉴定
2.1 前言
2.2 材料与方法
2.2.1 细菌分离纯化
2.2.2 细菌人工感染试验
2.2.3 细菌形态学观察及生理生化试验
2.2.4 细菌 16S rRNA基因序列分析
2.2.5 细菌gyrB基因序列分析
2.2.6 细菌药敏试验
2.2.7 真菌形态学观察
2.2.8. 真菌ITS序列分析
2.3 结果与分析
2.3.1 细菌人工感染试验
2.3.2 形态学观察及生理生化试验
2.3.3 细菌 16S rRNA基因序列分析
2.3.4 细菌gyrB基因序列分析
2.3.5 细菌药敏性试验
2.3.6 真菌形态学观察
2.3.7 真菌ITS序列分析
2.4 讨论
2.4.1 杂交鳢溃疡病病原分析
2.4.2 菌株S8的分类鉴定
2.4.3 菌株S8的药物敏感性
第三章 抗菌中草药的筛选
3.1 前言
3.2 材料与方法
3.2.1 无菌中草药药液制备
3.2.2 菌悬液的制备
3.2.3 MIC和MBC的测定
3.3 结果与分析
3.4 讨论
3.4.1 中草药的抑菌效果研究
3.4.2 五倍子、黄芩和石榴皮的抑菌效果
参考文献
附录
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]气单胞菌性鱼病研究进展[J]. 商宝娣,张效平. 农业与技术. 2015(24)
[2]醇提五倍子对鳙鱼非特异性免疫功能及抗病能力的影响[J]. 耿昕颖,刘蕾,王家祯,王巍,单晓枫,马红霞,高云航. 上海交通大学学报(农业科学版). 2015(06)
[3]鲟病原性温和气单胞菌的分离鉴定及药敏试验[J]. 肖艳翼,王斌,夏永涛,胡利静,胡鲲,杨先乐. 南方农业学报. 2015(10)
[4]中草药制剂对鳜鱼肠绒毛高度和肝细胞的影响[J]. 林洁荣,刘庆华. 中国畜牧兽医文摘. 2015(11)
[5]三北地区鱼源气单胞菌的分离鉴定与药敏试验[J]. 崔佳佳,李绍戊,王荻,卢彤岩. 江西农业大学学报. 2016(01)
[6]斑鳢与乌鳢杂交及回交子代生长和免疫指标的比较研究[J]. 王超,吕子君,曾运丁,邹记兴. 大连海洋大学学报. 2015(05)
[7]不同添加剂对团头鲂生长性能和肌肉品质的影响[J]. 林建斌,朱庆国,梁萍,邱曼丽. 福建农业学报. 2015(07)
[8]饲料中添加复方中草药对草鱼幼鱼生长、肌肉成分及免疫相关酶活性的影响[J]. 谭娟,邓雨飞,曹宇舰,姚益洲,马超. 广东农业科学. 2015(10)
[9]复方中草药对虹鳟抗氧化能力的影响[J]. 孙裔雷,王荻,刘红柏. 大连海洋大学学报. 2015(02)
[10]乌鳢、斑鳢及其杂交F1代肌肉营养成分和含肉率的比较分析[J]. 罗青,陈昆慈,赵建,洪效友,朱新平,史燕. 大连海洋大学学报. 2015(02)
博士论文
[1]黄颡鱼溃疡综合征病原菌及主要毒力因子研究[D]. 程方俊.西南大学 2012
硕士论文
[1]板蓝根对鲤鱼消化机能及免疫机能的影响研究[D]. 孙朋.吉林农业大学 2015
[2]3种海水小杂鱼及其罐头制品的营养特性和热加工对鱼肉品质的影响[D]. 冯雨薇.山西大学 2013
[3]斑点叉尾鮰源温和气单胞菌生物学及药物敏感性研究[D]. 谢旭阳.河南师范大学 2013
[4]气单胞菌的毒力基因检测及环境因子对毒力基因表达的影响[D]. 范腾飞.合肥工业大学 2013
[5]江苏地区气单胞菌分离鉴定及强毒株生物学特性分析[D]. 胡萌.南京农业大学 2012
[6]抗水霉药物的筛选及其制剂的应用效果研究[D]. 张世奇.上海海洋大学 2011
[7]复方中草药对斜带石斑鱼生长性能及非特异性免疫功能的影响[D]. 孔江红.集美大学 2011
[8]五倍子没食子酸的提取、纯化及抑菌效果研究[D]. 王广娟.河北农业大学 2010
[9]中药黄芪、黄芩有效成分的体外抑菌作用研究[D]. 王娜.燕山大学 2009
[10]黄芩的化学成分研究[D]. 刘英学.沈阳药科大学 2008
本文编号：3307182
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语表（Abbreviation）
第一章 文献综述
1.1 杂交鳢概述
1.1.1 杂交鳢简介
1.1.2 杂交鳢的营养价值
1.2 杂交鳢疾病及其防治研究
1.2.1 溃疡病
1.2.2 结节病
1.2.3 水霉病
1.3 气单胞菌研究进展
1.3.1 气单胞菌的分类地位及检测
1.3.2 气单胞菌对水产养殖动物的危害
1.4 中草药在水产养殖中的应用
1.4.1 提高水产动物免疫力
1.4.2 对病原体的直接抑制或杀灭
1.4.3 促进生长，改善肌肉品质
第二章 杂交鳢溃疡病病原的分离鉴定
2.1 前言
2.2 材料与方法
2.2.1 细菌分离纯化
2.2.2 细菌人工感染试验
2.2.3 细菌形态学观察及生理生化试验
2.2.4 细菌 16S rRNA基因序列分析
2.2.5 细菌gyrB基因序列分析
2.2.6 细菌药敏试验
2.2.7 真菌形态学观察
2.2.8. 真菌ITS序列分析
2.3 结果与分析
2.3.1 细菌人工感染试验
2.3.2 形态学观察及生理生化试验
2.3.3 细菌 16S rRNA基因序列分析
2.3.4 细菌gyrB基因序列分析
2.3.5 细菌药敏性试验
2.3.6 真菌形态学观察
2.3.7 真菌ITS序列分析
2.4 讨论
2.4.1 杂交鳢溃疡病病原分析
2.4.2 菌株S8的分类鉴定
2.4.3 菌株S8的药物敏感性
第三章 抗菌中草药的筛选
3.1 前言
3.2 材料与方法
3.2.1 无菌中草药药液制备
3.2.2 菌悬液的制备
3.2.3 MIC和MBC的测定
3.3 结果与分析
3.4 讨论
3.4.1 中草药的抑菌效果研究
3.4.2 五倍子、黄芩和石榴皮的抑菌效果
参考文献
附录
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]气单胞菌性鱼病研究进展[J]. 商宝娣,张效平. 农业与技术. 2015(24)
[2]醇提五倍子对鳙鱼非特异性免疫功能及抗病能力的影响[J]. 耿昕颖,刘蕾,王家祯,王巍,单晓枫,马红霞,高云航. 上海交通大学学报(农业科学版). 2015(06)
[3]鲟病原性温和气单胞菌的分离鉴定及药敏试验[J]. 肖艳翼,王斌,夏永涛,胡利静,胡鲲,杨先乐. 南方农业学报. 2015(10)
[4]中草药制剂对鳜鱼肠绒毛高度和肝细胞的影响[J]. 林洁荣,刘庆华. 中国畜牧兽医文摘. 2015(11)
[5]三北地区鱼源气单胞菌的分离鉴定与药敏试验[J]. 崔佳佳,李绍戊,王荻,卢彤岩. 江西农业大学学报. 2016(01)
[6]斑鳢与乌鳢杂交及回交子代生长和免疫指标的比较研究[J]. 王超,吕子君,曾运丁,邹记兴. 大连海洋大学学报. 2015(05)
[7]不同添加剂对团头鲂生长性能和肌肉品质的影响[J]. 林建斌,朱庆国,梁萍,邱曼丽. 福建农业学报. 2015(07)
[8]饲料中添加复方中草药对草鱼幼鱼生长、肌肉成分及免疫相关酶活性的影响[J]. 谭娟,邓雨飞,曹宇舰,姚益洲,马超. 广东农业科学. 2015(10)
[9]复方中草药对虹鳟抗氧化能力的影响[J]. 孙裔雷,王荻,刘红柏. 大连海洋大学学报. 2015(02)
[10]乌鳢、斑鳢及其杂交F1代肌肉营养成分和含肉率的比较分析[J]. 罗青,陈昆慈,赵建,洪效友,朱新平,史燕. 大连海洋大学学报. 2015(02)
博士论文
[1]黄颡鱼溃疡综合征病原菌及主要毒力因子研究[D]. 程方俊.西南大学 2012
硕士论文
[1]板蓝根对鲤鱼消化机能及免疫机能的影响研究[D]. 孙朋.吉林农业大学 2015
[2]3种海水小杂鱼及其罐头制品的营养特性和热加工对鱼肉品质的影响[D]. 冯雨薇.山西大学 2013
[3]斑点叉尾鮰源温和气单胞菌生物学及药物敏感性研究[D]. 谢旭阳.河南师范大学 2013
[4]气单胞菌的毒力基因检测及环境因子对毒力基因表达的影响[D]. 范腾飞.合肥工业大学 2013
[5]江苏地区气单胞菌分离鉴定及强毒株生物学特性分析[D]. 胡萌.南京农业大学 2012
[6]抗水霉药物的筛选及其制剂的应用效果研究[D]. 张世奇.上海海洋大学 2011
[7]复方中草药对斜带石斑鱼生长性能及非特异性免疫功能的影响[D]. 孔江红.集美大学 2011
[8]五倍子没食子酸的提取、纯化及抑菌效果研究[D]. 王广娟.河北农业大学 2010
[9]中药黄芪、黄芩有效成分的体外抑菌作用研究[D]. 王娜.燕山大学 2009
[10]黄芩的化学成分研究[D]. 刘英学.沈阳药科大学 2008
本文编号：3307182
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