暂养海捕日本蟳“牛奶
发布时间：2021-07-30 22:10
近年来,舟山暂养的海捕日本蟳连续发生规模性死亡事件,病蟹的血淋巴液呈乳白色牛奶状,与先前报道的梭子蟹“牛奶病”症状相似。为探索日本蟳“牛奶病”的病因,本论文从病理观察、病原分离鉴定、免疫指标检测等方面对日本蟳“牛奶病”展开研究,结果如下:临床症状和组织病理观察:（1）发病的日本蟳摄食停止、行动迟缓,打开背部甲壳,血淋巴液由正常的蓝青色变为牛奶状乳白色,无法正常凝固;（2）组织病理切片观察发现,病蟹的肝胰腺、鳃、肌肉和心肌组织都发生了不同程度的病变,具体表现为:细胞肿胀、变性甚至坏死,部分细胞的细胞核固缩、碎裂或溶解消失,基膜破裂,细胞界限模糊;（3）电镜观察:在病蟹的血淋巴液、肝胰腺、鳃、心脏等组织中均存在大量杆状病毒,直径大小约200-300nm,形状类似白斑病毒。将通过密度梯度离心从病蟹血淋巴液中分离提纯到的病毒,电镜负染也可见相似的杆状病毒。病原分离鉴定:（1）显微观察:未见明显的寄生虫感染;（2）细菌分离:病蟹血淋巴液及肝胰腺在细菌培养板TSA及TCBS划线培养,未分离到优势菌群;（3）PCR检测:提取病蟹组织DNA样本以及通过密度梯度离心获得的纯化病毒,用3对WSSV特异性引...
【文章来源】：浙江海洋大学浙江省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
健康日本蟳头
图 3-1 健康日本蟳头 图 3-2 患“牛奶病”日本蟳Fig 3-1 Healthy cultured crab Fig 3-2 Emulsified crab3.2.2 病蟹的组织病理通过石蜡切片观察，我们将患病日本蟳的肝胰腺、鳃、肌肉和心肌组织与正常日本蟳作了对比，发现患病日本蟳的以上组织均发生了不同程度的病变。3.2.2.1 肝胰腺病理特征正常日本蟳的肝胰腺组织由许多肝小管构成，肝小管由基膜上的单层柱状上皮细胞组成，细胞排列整齐，管腔明显，各结构组织之间的界限清晰分明，基底膜保持完好无损，细胞核清晰可见。患病日本蟳肝胰脏病变较其他组织中最为严重，发现肝胰腺柱状上皮细胞呈空泡化变性, 细胞排列紊乱, 肝小管上皮细胞形态及界线模糊, 细胞核溶解消失, 呈现细胞坏死状态, 无法区分肝胰腺的各种类型细胞。肝小管上皮细胞内有血细胞浸润现象。肝小管间的血腔隙及结缔组织间充满炎性坏死崩解物, 可看到细胞核固缩。
图 3-3 正常和患病日本蟳肝胰腺组织病理图Fig 3-3 Hepatopancreas tissue pathology of normal and diseased Charybdis japonicaA 图为在×40 物镜下，正常日本蟳的肝胰腺病理图：肝胰腺组织由许多肝小管构成，细胞呈柱状细胞核核圆形，紧邻基膜，管腔明显，基膜保持完整。B、C、D 图为在×40 物镜下，患病日本蟳的肝胰腺病理图：肝胰腺上皮细胞空泡变性, 细胞坏死, 法区分各种类型细胞。FigA is under×40 lens,the photograph of hepatopancreas tissue pathology for normal Charybdis japonicahepatopancreas organization made up of many small liver tube, liver cells are columnar, the nuclei of tnuclear is circle, adjacent to the base film,Lumen is obvious, basal membrane keep intact.FigB、C、Dis under×40 lens,the photograph of hepatopancreas tissue pathology for diseased Charybdjaponica：Hepatic pancreatic epithelial cell degeneration, the nucleus is necrotic and disappeared,and tboundary is blurred.3.2.2.2 鳃组织病理特征正常日本蟳的鳃由一条鳃轴、鳃丝和鳃叶等构成，鳃轴扁平状，鳃轴发出了很多平行鳃叶。在鳃腔中，许多上皮细胞突起呈“隔”状，将鳃叶腔分成许多小通道，鳃叶间
【参考文献】：
期刊论文
[1]微孢子虫感染三疣梭子蟹的肌组织病理及其免疫相关酶活性[J]. 王浩,王元,房文红,周俊芳,胡文娟. 海洋渔业. 2015(05)
[2]青蟹双顺反子病毒-1原位杂交检测方法的建立与应用[J]. 崔亚婷,倪军,马红玲,许海东,冯娟,申亚阳,郭志勋. 广东农业科学. 2015(11)
[3]二甲苯对锦鲤肝脏丙二醛含量和总抗氧化能力的影响[J]. 吴志刚,沈洪艳,杨枭,武晨虹,张国霞,李志勇. 江苏农业科学. 2013(02)
[4]草鱼呼肠孤病毒逆转录环介导等温扩增（RT-LAMP）检测方法的建立[J]. 张金凤,曾令兵,张辉,周勇,肖艺,苏岚,高正勇. 中国水产科学. 2013(01)
[5]大鲵虹彩病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 周勇,曾令兵,孟彦,周群兰,张辉,高正勇,肖艺,孙建滨. 水产学报. 2012(05)
[6]锯缘青蟹呼肠孤病毒感染的组织病理和超微病理观察[J]. 熊娟,陈吉刚,杨季芳,陈孝煊. 华中农业大学学报. 2011(05)
[7]日本蟳4个野生群体遗传多样性的微卫星分析[J]. 宋春妮,李健,刘萍,陈萍,高保全. 水产学报. 2011(07)
[8]血卵涡鞭虫单克隆抗体的制备与初步应用[J]. 查智辉,施慧,许文军,谢建军,孙忠. 水产学报. 2011(05)
[9]日本蟳（Charybdis japonica）微卫星位点的分离及遗传多样性分析[J]. 叶茂,申望,王日昕,郑兆祥,石戈. 海洋与湖沼. 2011(01)
[10]LAMP快速检测对虾IHHNV的方法与应用[J]. 何琳,徐海圣,王美珍,戎华南. 病毒学报. 2010(06)
硕士论文
[1]养殖大菱鲆4种致病菌多重PCR和荧光定量PCR检测方法的建立[D]. 刘智超.中国海洋大学 2012
[2]三疣梭子蟹血卵涡鞭虫单克隆抗体研制及其初步应用[D]. 查智辉.浙江海洋学院 2011
[3]对虾传染性肌肉坏死病几种检测方法的建立[D]. 谢玮.鲁东大学 2010
本文编号：3312216
【文章来源】：浙江海洋大学浙江省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
健康日本蟳头
图 3-1 健康日本蟳头 图 3-2 患“牛奶病”日本蟳Fig 3-1 Healthy cultured crab Fig 3-2 Emulsified crab3.2.2 病蟹的组织病理通过石蜡切片观察，我们将患病日本蟳的肝胰腺、鳃、肌肉和心肌组织与正常日本蟳作了对比，发现患病日本蟳的以上组织均发生了不同程度的病变。3.2.2.1 肝胰腺病理特征正常日本蟳的肝胰腺组织由许多肝小管构成，肝小管由基膜上的单层柱状上皮细胞组成，细胞排列整齐，管腔明显，各结构组织之间的界限清晰分明，基底膜保持完好无损，细胞核清晰可见。患病日本蟳肝胰脏病变较其他组织中最为严重，发现肝胰腺柱状上皮细胞呈空泡化变性, 细胞排列紊乱, 肝小管上皮细胞形态及界线模糊, 细胞核溶解消失, 呈现细胞坏死状态, 无法区分肝胰腺的各种类型细胞。肝小管上皮细胞内有血细胞浸润现象。肝小管间的血腔隙及结缔组织间充满炎性坏死崩解物, 可看到细胞核固缩。
图 3-3 正常和患病日本蟳肝胰腺组织病理图Fig 3-3 Hepatopancreas tissue pathology of normal and diseased Charybdis japonicaA 图为在×40 物镜下，正常日本蟳的肝胰腺病理图：肝胰腺组织由许多肝小管构成，细胞呈柱状细胞核核圆形，紧邻基膜，管腔明显，基膜保持完整。B、C、D 图为在×40 物镜下，患病日本蟳的肝胰腺病理图：肝胰腺上皮细胞空泡变性, 细胞坏死, 法区分各种类型细胞。FigA is under×40 lens,the photograph of hepatopancreas tissue pathology for normal Charybdis japonicahepatopancreas organization made up of many small liver tube, liver cells are columnar, the nuclei of tnuclear is circle, adjacent to the base film,Lumen is obvious, basal membrane keep intact.FigB、C、Dis under×40 lens,the photograph of hepatopancreas tissue pathology for diseased Charybdjaponica：Hepatic pancreatic epithelial cell degeneration, the nucleus is necrotic and disappeared,and tboundary is blurred.3.2.2.2 鳃组织病理特征正常日本蟳的鳃由一条鳃轴、鳃丝和鳃叶等构成，鳃轴扁平状，鳃轴发出了很多平行鳃叶。在鳃腔中，许多上皮细胞突起呈“隔”状，将鳃叶腔分成许多小通道，鳃叶间
【参考文献】：
期刊论文
[1]微孢子虫感染三疣梭子蟹的肌组织病理及其免疫相关酶活性[J]. 王浩,王元,房文红,周俊芳,胡文娟. 海洋渔业. 2015(05)
[2]青蟹双顺反子病毒-1原位杂交检测方法的建立与应用[J]. 崔亚婷,倪军,马红玲,许海东,冯娟,申亚阳,郭志勋. 广东农业科学. 2015(11)
[3]二甲苯对锦鲤肝脏丙二醛含量和总抗氧化能力的影响[J]. 吴志刚,沈洪艳,杨枭,武晨虹,张国霞,李志勇. 江苏农业科学. 2013(02)
[4]草鱼呼肠孤病毒逆转录环介导等温扩增（RT-LAMP）检测方法的建立[J]. 张金凤,曾令兵,张辉,周勇,肖艺,苏岚,高正勇. 中国水产科学. 2013(01)
[5]大鲵虹彩病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 周勇,曾令兵,孟彦,周群兰,张辉,高正勇,肖艺,孙建滨. 水产学报. 2012(05)
[6]锯缘青蟹呼肠孤病毒感染的组织病理和超微病理观察[J]. 熊娟,陈吉刚,杨季芳,陈孝煊. 华中农业大学学报. 2011(05)
[7]日本蟳4个野生群体遗传多样性的微卫星分析[J]. 宋春妮,李健,刘萍,陈萍,高保全. 水产学报. 2011(07)
[8]血卵涡鞭虫单克隆抗体的制备与初步应用[J]. 查智辉,施慧,许文军,谢建军,孙忠. 水产学报. 2011(05)
[9]日本蟳（Charybdis japonica）微卫星位点的分离及遗传多样性分析[J]. 叶茂,申望,王日昕,郑兆祥,石戈. 海洋与湖沼. 2011(01)
[10]LAMP快速检测对虾IHHNV的方法与应用[J]. 何琳,徐海圣,王美珍,戎华南. 病毒学报. 2010(06)
硕士论文
[1]养殖大菱鲆4种致病菌多重PCR和荧光定量PCR检测方法的建立[D]. 刘智超.中国海洋大学 2012
[2]三疣梭子蟹血卵涡鞭虫单克隆抗体研制及其初步应用[D]. 查智辉.浙江海洋学院 2011
[3]对虾传染性肌肉坏死病几种检测方法的建立[D]. 谢玮.鲁东大学 2010
本文编号：3312216
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