尼罗罗非鱼两种芳香化酶（Cyp19a1a和Cyp19a1b）表达与功能的初步研究

发布时间：2021-07-30 23:07

　　多数研究表明雌激素在鱼类性别决定、卵巢分化与维持的过程中均起到决定性作用。芳香化酶是雌激素合成的限速酶,硬骨鱼类有两种芳香化酶,即卵巢芳香化酶（cyp19a1a）和脑芳香化酶（cyp19a1b）,已有研究主要针对cyp19a1a在性腺以及cyp19a1b在脑的表达与作用,而少有研究聚焦于cyp19a1a在脑、cypl9a1b在性腺的表达与作用。另外,现有的研究多数是通过芳香化酶活性抑制剂或者雌激素受体拮抗剂等间接的手段来证明雌激素在鱼类性别决定、卵巢分化与维持中的作用,而几乎没有通过缺失功能（loss of function）或者获得功能（gain of function）对两种芳香化酶在性别决定与分化中的作用进行研究。尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）是世界性养殖鱼类,雄鱼比雌鱼生长快50%,易获得单性鱼苗,其基因组序列已经公开,本实验8个性腺转录组数据测序相继完成,所以尼罗罗非鱼是研究性别决定与分化很好的材料。本论文主要从表达和功能两方面来研究两种芳香化酶的区别与联系。一方面通过Real-time PCR和免疫组化技术来研究两者分别在性腺与脑的表达模式以及细胞... 

【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1 雌激素的生物合成
    2 芳香化酶的结构、基因特征
        2.1 芳香化酶的结构
        2.2 芳香化酶的基因特征
    3 硬骨鱼类两种芳香化酶
    4 芳香化酶的分布
    5 芳香化酶在硬骨鱼中的细胞定位
        5.1 芳香化酶(Cyp19a1a)在硬骨鱼性腺的细胞定位
        5.2 芳香化酶(Cyp19a1b)在硬骨鱼类脑的细胞定位
    6 雌激素在性别决定、分化与卵巢维持方面的作用
    7 雌激素在鱼类脑中的作用
    8 芳香化酶表达的调控
        8.1 促性腺激素
        8.2 卵巢芳香化酶(cyp19a1a)基因表达的调控
        8.3 鱼类cyp19a1b基因的调节
    9 科学问题的提出和本研究的目的意义
第二章 尼罗罗非鱼两种芳香化酶(Cyp19a1a和Cyp19a1b)表达的初步研究
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验动物
        2.2 试剂、耗材和仪器
        2.3 实验方法
        2.4 免疫组化检测(Cyp19a1a和Cyp19a1b)在性腺与脑组织的表达
    3 实验结果
        3.1 罗非鱼脑发育中cyp19a1b的表达
        3.2 尼罗罗非鱼cyp19a1a和cyp19a1b性腺转录组表达分析
        3.3 免疫组织化学检测罗非鱼脑组织Cyp19a1a和Cyp19a1b表达
        3.4 免疫组织化学检测罗非鱼性腺组织Cyp19a1a和Cyp19a1b表达
    4. 讨论
第三章 尼罗罗非鱼两种芳香化酶(Cyp19a1a和Cyp19a1b)功能的初步研究
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验动物
        2.2 试剂、耗材和仪器
        2.3 有关试剂的配制
        2.4 实验方法
    3 实验结果
        3.1 CRISPR/Cas9敲除cyp19a1a在尼罗罗非鱼XX性腺发育中的影响
        3.2 CRISPR/Cas9敲除cyp19a1b在尼罗罗非鱼XX性腺发育中的影响
        3.3 CRISPRyCas9 敲除 cypl9ala、cypIPalb 对 XX 性腺发育的观察
        3.4 XX性腺过表达cyp19a1a对性腺发育的影响
    4 讨论
结论
参考文献
致谢
在读期间发表的主要论文
在读期间参加科研情况


【参考文献】：
期刊论文
[1]脊椎动物性别决定和分化的分子机制研究进展[J]. 周林燕,张修月,王德寿.  动物学研究. 2004(01)
[2]鱼类性别决定及其机制的研究进展[J]. 王德寿,吴天利,张耀光.  西南师范大学学报(自然科学版). 2000(03)



本文编号：3312296