拟穴青蟹卵黄蛋白原及其类似物的研究

发布时间：2021-08-12 12:19

　　卵黄蛋白原（vitellogenin, Vg）广泛存在于卵生动物中,是卵黄磷蛋白（vitellin,Vn）的前体蛋白,而Vn则是卵黄蛋白（yolk protein, YP）的主要成分。Vg是一种高分子量的含糖、磷、脂的蛋白,其最基本的功能是为胚胎发育提供营养物质和能量,此外Vg还具有运输脂类、参与免疫防御等多方面的功能。本课题组先前已克隆了拟穴青蟹（Scylla paramamosain） Vg（SpVg）的gDNA和cDNA全长序列,并且对SpVg进行了时空表达分析,因此本文在此基础上对SpVg进行了进一步的研究,主要结果如下：1)利用三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus） Vn抗体,采用western blot方法确定了雌性拟穴青蟹Vg/Vn蛋白的亚基组成,血淋巴Vg由约80kDa和207kDa两个亚基组成,卵巢Vn由约80kDa、100kDa和107kDa三个亚基组成。并且推测得到拟穴青蟹外源性Vg的剪切模式：约287kDa的SpVg在肝胰腺合成后,被类枯草杆菌蛋白酶（subtilisin-like endoprotease）识别RERR保守基序,剪切得到... 

【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：87 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
目录
Contents
縮略语中英文对照表
摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 卵黄发生
    1.2 卵黄蛋白原的基因序列
    1.3 卵黄蛋白原的剪切加工
    1.4 卵黄蛋白原的生物学功能
    1.5 雄性动物卵黄蛋白原/卵黄蛋白的研究概况
    1.6 本文的研究目的和内容
第2章 雌性拟穴青蟹Vg和Vn的研究
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验仪器
        2.1.3 主要试剂
        2.1.4 主要溶液配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 雌性拟穴青蟹肝胰腺、血淋巴和卵巢总蛋白的提取
        2.2.2 雌性拟穴青蟹Vg和Vn的亚基组成及分子量测定
        2.2.3 雌性拟穴青蟹Vg和Vn的质谱鉴定
        2.2.4 雌性拟穴青蟹肝胰腺和卵巢中Vg和Vn的定位
    2.3 实验结果
        2.3.1 雌性拟穴青蟹Vg和Vn的亚基组成及其分子量大小
        2.3.2 雌性拟穴青蟹Vg和Vn的质谱鉴定
        2.3.3 雌性拟穴青蟹肝胰腺和卵巢中Vg和Vn的定位
    2.4 讨论
        2.4.1 雌性拟穴青蟹Vg和Vn的亚基组成及其分子量大小
        2.4.2 雌性拟穴青蟹Vg的剪切位点和发生场所
        2.4.3 雌性拟穴青蟹肝胰腺和卵巢中Vg和Vn的定位
    2.5 小结
第3章 雄性拟穴青蟹SpVg-like的研究
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验动物
        3.1.2 实验仪器
        3.1.3 主要试剂
        3.1.4 主要溶液配制
    3.2 实验方法
        3.2.1 雄性拟穴青蟹SpVg-like基因的cDNA克隆和序列分析
        3.2.2 SpVg-like基因在雄性拟穴青蟹各组织中的表达
        3.2.3 Western blot法检测雄性拟穴青蟹SpVg-like蛋白表达
        3.2.4 拟穴青蟹SpVg-like在生殖系统中的定位
    3.3 实验结果
        3.3.1 雄性拟穴青蟹SpVg-like基因的cDNA克隆和序列分析
        3.3.2 SpVg-like基因在雄性拟穴青蟹各组织中的表达
        3.3.3 雄性拟穴青蟹SpVg-like蛋白的表达
        3.3.4 SpVg-like在拟穴青蟹精巢、贮精囊和纳精囊中的定位
    3.4 讨论
        3.4.1 雄性拟穴青蟹SpVg-like与雌性拟穴青蟹SpVg的序列比较
        3.4.2 SpVg-like基因在雄性拟穴青蟹各组织中的表达
        3.4.3 雄性拟穴青蟹SpVg-like蛋白的表达
        3.4.4 SpVg-like在拟穴青蟹精巢、贮精囊和纳精囊中的定位
    3.5 小结
第4章 总结与展望
    4.1 总结
    4.2 创新点
    4.3 不足
    4.4 展望
参考文献
在学期间参与的科研项目和成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]三疣梭子蟹卵黄磷蛋白纯化及其ELISA测定方法[J]. 张艳,吴旭干,杨帆,刘智俊,成永旭.  水产学报. 2011(08)
[2]甲壳动物血蓝蛋白研究进展[J]. 潘鲁青,金彩霞.  水产学报. 2008(03)
[3]锯缘青蟹精巢发育的组织学观察[J]. 叶海辉,李少菁,黄辉洋,王桂忠.  动物学研究. 2002(02)
[4]锯缘青蟹卵黄发生期卵母细胞和卵泡细胞之间的结构变化[J]. 成永旭,李少菁,王桂忠,陈学雷,林琼武.  动物学报. 2002(01)
[5]锯缘青蟹卵母细胞的卵黄发生[J]. 颜素芬,李少菁,上官步敏.  厦门大学学报(自然科学版). 1995(03)
[6]锯缘青蟹精子超微结构的研究[J]. 上官步敏,李少菁.  动物学报. 1994(01)
[7]锯缘青蟹卵巢发育的组织学观察[J]. 上官步敏,刘正琮,李少菁.  水产学报. 1991(02)

博士论文
[1]锯缘青蟹Scylla serrata （Forskal）神经系统和消化系统内分泌细胞的研究[D]. 黄辉洋.厦门大学 2001



本文编号：3338305