鲤鱼重组IL–17N的原核表达条件优化及蛋白纯化

发布时间：2021-09-03 23:51

　　为获得可溶的鲤鱼IL–17N重组蛋白,构建原核重组表达质粒GST–17N、SUMO–GST–17N和MBP–17N,确定IL–17N的最适促溶标签,并优化其诱导表达条件（诱导剂异丙基–β–D–硫代半乳糖苷（IPTG）的浓度、诱导时间和诱导温度）。结果:成功构建了鲤鱼IL–17N原核重组表达载体GST–17N、SUMO–GST–17N和MBP–17N;融合标签MBP、SUMO–GST和GST的促溶效果依次降低,SUMO–GST–17N、MBP–17N上清蛋白占总蛋白比例分别为47.4%、87.0%;MBP–17N的最佳表达条件为0.5 mmol/L IPTG,25℃诱导8～12 h;经过镍柱纯化,获得可溶MBP–17N蛋白,每克总菌约获得0.09 mg MBP–17N蛋白。 

【文章来源】：湖南农业大学学报(自然科学版). 2020,46(03)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

鲤鱼IL–17N基因的扩增产物

鲤鱼原核重组表达质粒双酶切鉴定结果

GST–17N和SUMO–GST–17N的表达结果


本文编号：3382121