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大黄鱼性腺发育相关基因的表达特性研究

发布时间:2021-09-07 07:18
  本研究以我国重要的海洋经济鱼类-大黄鱼(Larimichthys crocea)作为实验对象,用RACE技术克隆获得WD40重复家族成员wdr55、wdr73、wdr91,以及E3泛素连接酶的底物受体dcaf17基因的cDNA全长(命名为Lc-wdr55、Lc-wdr73、Lc-wdr91、Lc-dcaf17),采用荧光定量PCR技术研究了这些基因的组织的表达谱,以及不同发育阶段精巢和卵巢中的表达差异,探讨其在大黄鱼性腺发育过程中的作用。结果如下:1、Lc-wdr55基因cDNA序列全长1,849bp,其中开放阅读框(ORF)1,233bp,编码410个氨基酸,含有7个WD40结构域、1个EWD盒子。Lc-wdr55在性腺的表达量显著高于其他组织(P<0.05)、并在精巢的的表达量高于卵巢。不同发育阶段卵巢与精巢Lc-wdr55的表达量都是成熟期最高,增殖期次之,排空期表达量最低(P<0.05);显示其与性腺发育与成熟有显著的相关性。2、Lc-wdr73基因cDNA序列全长1,706bp,其中ORF 1,406bp,编码381个氨基酸,5’UTR51bp,3’UTR 509... 

【文章来源】:集美大学福建省

【文章页数】:85 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

大黄鱼性腺发育相关基因的表达特性研究


WD40蛋白的空间结构(引自Sprague等[84]

结构图,作用过程,空间结构,泛素


调节的关键分子。蛋白与 CRL4 E3 泛素连接酶的复合物的结构及功能L4 的结构研究解析主要如下:DDB1( UV-damaged DNA为 127 kDa的蛋白质,作为一个损伤DNA结合蛋白(DB)成员被发现,DDB1 蛋白由 3 个β-propeller结构域组成是与CUL4 结合,BPA与BPC结构域紧密联系,作为底物的白的泛素化修饰来调控基因复制、转录、修复及信号转导等功CRL4 E3 泛素连接酶复合物的分子支架,氨基端结合DDB-E2 结合,使E2 与靶蛋白的空间互近,并将泛素共价结合到靶蛋白随后由 26S蛋白酶体降解。结构图见图 1-2。2006 年间报道称发现了与DDB1-CUL4 相互作用的因子,他们各自-Cul4 associated factors)[95-98]。dcafs作为底物识别因子,后是WD40 蛋白,属于WD40 家族,但是其中dcaf15、dcaf16、结构,有待深究。

条带,研究生学位论文,整性,性腺


士研究生学位论文 大黄鱼性腺相关基因的表达特性取大黄鱼各组织的总 RNA 用 1%琼脂糖凝胶电泳,由图可见,由上到下、5S 三条带,并且 28S、18S 条带清晰,比例约 2:1,5S 条带最弱(图 测 RNA 的 OD260/280 均处于 1.8-2.2 之间,OD260/230 在 2.0-2.5 之间,说整性和纯度都较好,可以进行后续实验。定量所用 RNA 同样符合条件。


本文编号:3389107

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