杂交三倍体泥鳅细胞遗传学研究

发布时间：2021-09-09 07:55

　　泥鳅（Misgrunus anguillicaudatus）是我国常见的一种小型经济鱼类，因其具有较高的营养价值而受到消费者的喜爱，但由于泥鳅所栖息自然环境的破坏及人为的过度捕捞，野生泥鳅的产量及品质逐年下降，已难以满足市场的需求。因此，泥鳅良种选育及对其细胞遗传研究就显得十分重要。泥鳅存在多倍体现象，三倍体鱼类因其育性差、生长快等特性而成为鱼类育种研究的热点，对三倍体泥鳅的研究多集中在体细胞方面的研究，而对与其育性相关的生殖细胞的研究，尤其是染色体行为及带型方面的研究尚未见报道。本研究利用二倍体泥鳅与天然四倍体泥鳅杂交所获得的杂交三倍体泥鳅为研究对象，通过制备其生殖细胞减数分裂染色体来研究减数分裂过程中染色体的行为特征，并利用Ag-NORs、CMA3/DA/DAPI、荧光原位杂交（FISH）技术探讨生殖细胞染色体的带型特征，最后利用C带技术研究了二倍体及杂交三倍体泥鳅胚胎染色体的带型特征，所获得的研究结果如下：1、无论四倍体泥鳅与二倍体泥鳅正交还是反交后代生殖细胞染色体减数分裂中不但发现有单价体及二价体的存在，也发现了不同配对形式的三价体；而且也发现了染色体加倍现象；正反交的精母细胞... 

【文章来源】：大连海洋大学辽宁省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
第一章 文献综述
    1 多倍体鱼类的研究进展
        1.1 鱼类中多倍体现象
        1.2 三倍体鱼类的育种研究
        1.3 多倍体鱼类的产生方法
            1.3.1 生物学方法
            1.3.2 物理学方法
            1.3.3 应用某些化学药品，
            1.3.4 电休克及高盐高碱法
        1.4 多倍体的倍性鉴定
            1.4.1 染色体计数和核型公式的分析
            1.4.2 核仁数目的银染色法测定
            1.4.3 细胞体积的测量和比较
            1.4.4 流式细胞仪测 DNA 含量
        1.5 三倍体鱼类在生产上的应用
    2 多倍体鱼类染色体的研究
        2.1 减数分裂染色体的行为
        2.2 染色体的带型
            2.2.1 银染
            2.2.2 CMA3/DA/DAPI 荧光染色
            2.2.3 荧光原位杂交（FISH）
            2.2.4 C 带
    3 泥鳅的研究现状及存在的问题
第二章 杂交三倍体泥鳅的减数分裂
    1 材料与方法
        1.1 实验用鱼
        1.2 精母细胞减数分裂染色体标本的制备
            1.2.1 秋水仙素处理
            1.2.2 取材和低渗
            1.2.3 固定
            1.2.4 制片
            1.2.5 吉姆萨染色并拍照
        1.3 卵母细胞减数分裂染色体标本的制备
            1.3.1 卵巢体外培养
            1.3.2 剥取卵核
            1.3.3 染色体标本制备及观察
    2 结果
        2.1 杂交三倍体泥鳅（4n x 2n，2n x 4n）精母细胞第一次减数分裂中期(MI)染色体行为的观察
            2.1.1 杂交三倍体泥鳅（4n x 2n）的精母细胞 MI 染色体行为的观察
            2.1.2 杂交三倍体泥鳅（2n x 4n）的精母细胞 MI 染色体行为的观察
        2.2 杂交三倍体泥鳅（4n x 2n，2n x 4n）卵母细胞第一次减数分裂中期(MI)染色体行为的观察
            2.2.1 杂交三倍体泥鳅（4n x 2n）卵核染色体的观察
            2.2.2 杂交三倍体泥鳅（2n x 4n）卵核染色体的观察
    3 讨论
第三章 精母细胞染色体的带型及 RDNA 定位
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
            1.2.1 精巢细胞减数分裂染色体的 Ag‐NORs 染色
            1.2.2 精巢细胞减数分裂染色体 CMA3/DA/DAPI 荧光染色
            1.2.3 精巢细胞减数分裂染色体荧光原位杂交(FISH)
    2 实验结果
        2.1 杂交三倍体泥鳅精母细胞减数分裂染色体 Ag‐NORs
        2.2 杂交三倍体泥鳅精母细胞减数分裂 CMA3/DA/DAPI 染色
        2.3 杂交三倍体泥鳅精母细胞减数分裂荧光原位杂交（FISH）
    3 讨论
第四章 二倍体与杂交三倍体泥鳅体细胞染色体 C 带研究
    1 实验材料及方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
            1.2.1 胚胎染色体的制备
            1.2.2 染色体的 C 带染色
            1.2.3 核型分析
    2 实验结果
        2.1 二倍体泥鳅胚胎 C 带及核型
        2.2 杂交三倍体泥鳅胚胎 C 带及核型
    3 讨论
第五章 结论
参考文献
攻读学位期间发表的论文及摘要
攻读学位期间申请的专利
致谢
附表



本文编号：3391720