七鳃鳗（Lampetra japonica）CD81的克隆表达及生物信息学分析
发布时间：2021-10-16 12:53
CD81属于四跨膜蛋白超家族（transmembrane4superfamily,TM4SF）成员，广泛表达于不同的组织中，可促进细胞自身和细胞之间的信号转导并能跨膜作用于某些蛋白。CD81可以参加几种病毒辨认与进入细胞，调节不同细胞的一系列生理反应过程。此外，CD81是B细胞和T细胞受体的组成成分，它们之间的相互作用会抑制信息的传递[1]。当前研究的主要内容是CD81在B-T细胞彼此作用中所起到的作用，以及分别在B细胞和T细胞中发挥的功能[2]。CD81在细胞膜上可与CD4、CD8、CD19、CD21、HLA-DR和α3β1整合素等结合，并调控丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）对宿主细胞的侵染，通过免疫作用刺激产生的CD81抗体能有效的阻止HCV的侵染和传播等[3]。目前的研究主要集中在高等脊椎动物，但在相对原始的无颚脊椎动物七鳃鳗中CD81的生物学功能还不清楚。在本文中，通过对脂肪体cDNA文库中的cDNA序列进行查找与生物信息学分析（此文库为本实验室构建的日本七鳃鳗（Lampetra japonica）文库），得到一条与已报道的哺乳动物CD81有较高同源性...
【文章来源】：辽宁师范大学辽宁省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
总RNA电泳图(M：DL2000Marker；1：总RNA)
图 2.3 CD81 目的片段 PCR 结果及筛选结果；A) CD81 PCR 电泳结果图；M：DL2,000 Marker；1：CD81 目的片段 PCR 产物；B) CD81 胶收产物电泳结果图；M：DL2,000 Marker；1：CD81 割胶回收 PCR 产物；C)菌落 PCR 后扩增物（4 个菌落进行平行对照）；M： DL2,000 Marker；1,2,3,4：4 个菌落 PCR 扩增 CD81 目的片段；D)重组质粒 DNA；M：DNA Marker DL2,000；1：质粒；Fig. 2.3 The PCR product of the fragment of CD81 and positive selection;A) The result of CD81 PCR; M: DNA Marker DL2,000; 1. CD81 PCR products; B) The result ofCD81 recovery PCR products; M: DNA Marker DL2,000; 1. CD81 recovery PCR products; C) Thproduct of the bacterial colony PCR; M：DNA Marker DL2,000; 1,2,3,4：The bacterial colony PCRfour parallel controls of the fragment of CD81; D) The Recombinant plasmid DNA; M: DNA MarkDL2,000; 1: Plasmid;(2) CD81 目的片段测序结果与验证测序结果(附录 B)显示，含有起始密码子 ATG，并且含有终止密码子 TGA 由证明扩增实验已经完成（图 2.4）。并将实验扩增得到的目的序列利用 Sequench和 ORF Finder 搜索软件来分析确定此目的片段的开放阅读框为 702bp，编码 233 个基酸 (图 2.5,2.6)。
图 2.4 PCR 扩增得到的 CD81 目的片段 (注：该序列起始密码子 ATG 和终止密子 TAG 为斜体加粗，划线部分为开放阅读框)Fig.2.4 the sequence of CD81target gene were obtained by using PCR(Note: The initiation codon is bold or italic and the termination codon is bold or italic ,The openreading frame of Lampetra japonica CD81 is underlined with single straight line.)图 2.5 用 Sequencher 软件分析的七鳃鳗 CD81ORFFig. 2.5 The open reading frame of Lampetra japonica CD81 by using Sequencher
本文编号：3439842
【文章来源】：辽宁师范大学辽宁省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
总RNA电泳图(M：DL2000Marker；1：总RNA)
图 2.3 CD81 目的片段 PCR 结果及筛选结果；A) CD81 PCR 电泳结果图；M：DL2,000 Marker；1：CD81 目的片段 PCR 产物；B) CD81 胶收产物电泳结果图；M：DL2,000 Marker；1：CD81 割胶回收 PCR 产物；C)菌落 PCR 后扩增物（4 个菌落进行平行对照）；M： DL2,000 Marker；1,2,3,4：4 个菌落 PCR 扩增 CD81 目的片段；D)重组质粒 DNA；M：DNA Marker DL2,000；1：质粒；Fig. 2.3 The PCR product of the fragment of CD81 and positive selection;A) The result of CD81 PCR; M: DNA Marker DL2,000; 1. CD81 PCR products; B) The result ofCD81 recovery PCR products; M: DNA Marker DL2,000; 1. CD81 recovery PCR products; C) Thproduct of the bacterial colony PCR; M：DNA Marker DL2,000; 1,2,3,4：The bacterial colony PCRfour parallel controls of the fragment of CD81; D) The Recombinant plasmid DNA; M: DNA MarkDL2,000; 1: Plasmid;(2) CD81 目的片段测序结果与验证测序结果(附录 B)显示，含有起始密码子 ATG，并且含有终止密码子 TGA 由证明扩增实验已经完成（图 2.4）。并将实验扩增得到的目的序列利用 Sequench和 ORF Finder 搜索软件来分析确定此目的片段的开放阅读框为 702bp，编码 233 个基酸 (图 2.5,2.6)。
图 2.4 PCR 扩增得到的 CD81 目的片段 (注：该序列起始密码子 ATG 和终止密子 TAG 为斜体加粗，划线部分为开放阅读框)Fig.2.4 the sequence of CD81target gene were obtained by using PCR(Note: The initiation codon is bold or italic and the termination codon is bold or italic ,The openreading frame of Lampetra japonica CD81 is underlined with single straight line.)图 2.5 用 Sequencher 软件分析的七鳃鳗 CD81ORFFig. 2.5 The open reading frame of Lampetra japonica CD81 by using Sequencher
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