镉诱导中华绒螯蟹肝胰腺氧化损伤及机理研究

发布时间：2021-10-30 13:40

　　采用急性毒性实验方法,将中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）暴露于不同Cd2+浓度组（0、0.63、1.26、5.03、10.07 mg/L）6 d,采用生化和分子生物学方法研究Cd2+对中华绒螯蟹肝胰腺代谢酶、抗氧化相关物质、线粒体的影响和损伤,采用DNA-Ladder和AO/EB双荧光染色法检测肝胰腺细胞凋亡情况,旨在探明镉对中华绒螯蟹肝胰腺的氧化损伤机理。结果显示:雌蟹和雄蟹对Cd2+的敏感度不同,肝胰腺中GPT、AKP被抑制,GOP被激活,ACP活力随着Cd2+浓度的升高呈现出先上升后下降的变化趋势;SOD、CAT和GPx变化趋势与ACP相同,H2O2和MDA含量持续积累,GSH/GSSG减少;MT mRNA表达量持续增加;线粒体状态-4呼吸、MDH和COX活性均被抑制;细胞损伤和凋亡程度随着Cd2+浓度增加而加剧,Caspase-3,8,9均被激活。结果表明:Cd2+诱导中华绒螯蟹肝胰腺产生大量的自由基,导致代谢发生异常、出现氧化损伤,且雌蟹和雄蟹对Cd2+胁迫的敏感程度和应激程度不同;Cd2+诱导肝胰腺发生凋亡是Caspase依赖型,推测线粒体介导的内源性凋亡... 

【文章来源】：温州大学浙江省

【文章页数】：88 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1 中华绒螯蟹概况
    2 镉及其污染现状
    3 镉对甲壳动物的毒性作用研究进展
        3.1 甲壳动物对镉的吸收与蓄积
        3.2 镉的毒性机理
        3.3 镉与细胞凋亡
第二章 镉对中华绒螯蟹肝胰腺代谢酶活性影响
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验设计
        1.3 实验方法
        1.4 数据处理
    2 实验结果
        2.1 镉对中华绒螯蟹肝胰腺谷丙转氨酶（ALT/GPT）活力的影响
        2.2 镉对中华绒螯蟹肝胰腺谷草转氨酶（ASLT/GOT）活力的影响
        2.3 镉对中华绒螯蟹肝胰腺碱性磷酸酶（AKP）活力的影响
        2.4 镉对中华绒螯蟹肝胰腺酸性磷酸酶（ACP）活力的影响
    3 讨论
        3.1 镉对中华绒螯蟹肝胰腺GPT和GOT活力的影响
        3.2 镉对中华绒螯蟹肝胰腺AKP和ACP活力的影响
第三章 镉对中华绒螯蟹肝胰腺抗氧化酶的影响
    1 材料和方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验设计
        1.3 实验方法
        1.4 数据处理
    2 实验结果
        2.1 镉对中华绒螯蟹肝胰腺SOD活力的影响
        2.2 镉对中华绒螯蟹肝胰腺CAT活力的影响
        2.3 镉对中华绒螯蟹肝胰腺Gpx活力和GSSG、GSH含量的影响
        2.4 镉对中华绒螯蟹肝胰腺MDA和H2O2含量的影响
    3 讨论
        3.1 镉对中华绒螯蟹肝胰腺抗氧化酶活的影响
        3.2 镉对中华绒螯蟹肝胰腺H2O2和MDA含量的影响
第四章 镉对中华绒螯蟹肝胰腺金属硫蛋白MRNA表达的影响
    1 材料和方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验设计
        1.3 实验方法
        1.4 数据处理
    2 实验结果
        2.1 中华绒螯蟹肝胰腺总RNA制备
        2.2 中华绒螯蟹肝胰腺MT特异性扩增
        2.3 镉对中华绒螯蟹肝胰腺MT m RNA相对转录水平的影响
    3 讨论
第五章 镉致中华绒螯蟹肝胰腺线粒体氧化损伤
    1 材料和方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验设计
        1.3 实验方法
        1.4 数据处理
    2 实验结果
        2.1 镉对中华绒螯蟹肝胰腺线粒体MDH、COX活性的影响
        2.2 镉对中华绒螯蟹肝胰腺线粒体状态-4 呼吸的影响
    3 讨论
第六章 镉致中华绒螯蟹肝胰腺细胞凋亡的研究
    1 实验方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验设计
        1.3 实验方法
        1.4 数据处理
    2 实验结果
        2.1 荧光显微镜观察镉对中华绒螯蟹肝胰腺细胞凋亡的影响
        2.2 琼脂糖凝胶电泳检验镉对中华绒螯蟹肝胰腺细胞DNA完整性影响
        2.3 镉对中华绒螯蟹肝胰腺Caspase-3，8，9 活性影响
    3 讨论
总结与展望
    1 结论
    2 展望
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文目录


【参考文献】：
期刊论文
[1]水体Hg2+对中华绒螯蟹肝胰腺和血淋巴酶活性的影响[J]. 赵艳民,张雷,王新华,秦延文,郑丙辉.  生态毒理学报. 2012(06)
[2]铅对河南华溪蟹卵巢抗氧化酶活力和脂质过氧化水平的影响[J]. 马京津,徐团,轩瑞晶,王兰.  环境科学学报. 2012(09)
[3]镉对长江华溪蟹金属硫蛋白mRNA表达的诱导及低分子量壳聚糖的联合作用[J]. 周妍英,李瑞金,任国锐,王兰.  环境科学学报. 2011(09)
[4]镉对日本沼虾的毒性研究[J]. 张亚娟,刘存歧,王军霞,王亚斌,邢晓光.  安徽农业科学. 2010(29)
[5]金属硫蛋白作为重金属污染生物标志物的研究进展[J]. 陈春,周启星.  农业环境科学学报. 2009(03)
[6]镉在河南华溪蟹主要组织器官中的积累效应[J]. 颜涛,马文丽,王兰,何永吉.  山西大学学报(自然科学版). 2008(04)
[7]Cd2+对长江华溪蟹谷胱甘肽系统的影响[J]. 刘娜,闫博,李涌泉,王茜,王兰.  环境科学. 2008(08)
[8]镉对长江华溪蟹酶活性及脂质过氧化的影响[J]. 李涌泉,王兰,刘娜,王茜,何永吉,孟帆.  水生生物学报. 2008(03)
[9]Cd对河南华溪蟹（Sinopotamon henanense）主要组织器官SOD和POD同工酶的影响[J]. 王兰,李涌泉,闫博,刘娜,王茜.  应用与环境生物学报. 2007(06)
[10]镉对长江华溪蟹肝胰腺抗氧化酶活力的影响[J]. 闫博,王兰,李涌泉,刘娜,王茜.  动物学报. 2007(06)

博士论文
[1]镉对长江化溪蟹心脏组织器官的毒性作用及机制研究[D]. 雷雯雯.山西大学 2012



本文编号：3466827