虾肝肠胞虫的流行病学及防控药剂的筛选和效果的研究
发布时间：2021-11-02 04:18
自从虾肝肠胞虫（Enterocytozoon hepatopenaei,EHP）在泰国养殖的生长缓慢的斑节对虾（Penaeus monodon）中被发现以来,越南、印尼、马来西亚和泰国等国家均有检测出EHP对凡纳滨对虾的感染,对虾感染该病原后,会出现生长缓慢或生长停滞,有时会出现白便等症状,但其摄食和存活率不受影响。本实验室最早也于2013年从浙江台州养殖的日本囊对虾、凡纳滨对虾以及罗氏沼虾样品中检出了EHP的感染,当对虾肝胰腺中EHP SSU rDNA的相对拷贝数在103 copies/（ng HpDNA）数量级或EHP载量指数在3以上时,对虾的生长明显较慢,表明该载量的EHP已处于一个较高的风险水平,其导致对虾生长缓慢的问题给对虾养殖业带来了巨大损失,需要引起高度重视。本研究对EHP的流行病学进行了更深层次的研究,运用了孢子纯化、荧光染色、TaqMan qPCR、原位杂交等技术手段,旨在了解EHP的更多信息,以期对该病的感染机制和防控策略提供技术依据。主要包括以下研究内容:1虾肝肠胞虫（EHP）孢子的分离纯化与计量孢子是EHP进行个体和群体间传播的关键方式,研...
【文章来源】：大连海洋大学辽宁省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 绪论
1.1 凡纳滨对虾养殖概况
1.2 凡纳滨对虾养殖常见病害
1.3 虾肝肠胞虫的研究进展
1.3.1 虾肝肠胞虫的发现
1.3.2 虾肝肠胞虫的分类依据和感染机制
1.3.3 虾肝肠胞虫的传播方式
1.3.4 虾肝肠胞虫的检测方法
1.3.5 虾肝肠胞虫的流行病学
1.3.6 虾肝肠胞虫的防控措施
1.4 本研究的目的和意义
第二章 虾肝肠胞虫(EHP)孢子的纯化与计量
2.1 材料与方法
2.1.1 材料
2.1.2 方法
2.2 结果与分析
2.2.1 EHP的 TaqMan探针实时荧光PCR标准曲线
2.2.2 虾样的EHP载量检测
2.2.3 EHP的蔗糖密度梯度离心提纯
2.2.4 纯化的EHP孢子的电镜观察
2.2.5 纯化的EHP孢子的光镜观察
2.2.6 纯化的EHP孢子的光镜计数
2.2.7 纯化的EHP孢子的Taq Man qPCR检测
2.3 讨论
第三章 荧光染料检测虾肝肠胞虫(EHP)的可行性研究
3.1 材料与方法
3.1.1 材料
3.1.2 方法
3.2 结果与分析
3.2.1 纯化孢子的荧光染料染色结果
3.2.2 对虾粪便和肝胰腺匀浆液的Calcofluor White染色结果
3.2.3 对虾各个组织切片的 Calcofluor White 染色结果
3.2.4 套式PCR法验证试验结果
3.2.5 原位 LAMP(ISDL)验证试验结果
3.3 讨论
第四章 对虾饵料中虾肝肠胞虫(EHP)的携带情况调查
4.1 材料与方法
4.1.1 材料
4.1.2 方法
4.2 结果与分析
4.2.1 采集样品的Taq Man qPCR检测结果
4.2.2 阳性沙蚕的DNA序列比对和原位LAMP试验
4.2.3 阳性虾片样品的人工感染试验结果
4.3 讨论
第五章 虾肝肠胞虫(EHP)防控药剂的效果评价
5.1 材料与方法
5.1.1 材料
5.1.2 方法
5.2 结果与分析
5.2.1 包裹材料的筛选结果
5.2.2 每次取样的样品信息统计
5.2.3 药物的效果评价结果
5.3 讨论
结论
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]凡纳滨对虾感染虾肝肠胞虫的群体及组织间差异性分析[J]. 程东远,邱亮,宋增磊,万晓媛,董宣,谢国驷,黄倢. 渔业科学进展. 2018(04)
[2]虾肝肠胞虫的研究进展[J]. 叶键,许婷,施礼科,王力,陈凡,郭水荣. 科学养鱼. 2018(01)
[3]柞蚕微孢子虫的研究进展[J]. 刘中文,徐欣,张英华,杨新峰,郭剑,朱绪伟. 中国蚕业. 2017(04)
[4]警惕卤虫可携带虾肝肠孢虫[J]. 叶键,施礼科,王力,陈凡,郭水荣,麻灵芬. 科学养鱼. 2017(11)
[5]中华绒螯蟹微孢子虫研究进展[J]. 刘洪岩,赵彦华,孙梦玲,薛晖. 水产养殖. 2017(10)
[6]南美白对虾生物学特性概述[J]. 李法君. 生物学教学. 2017(09)
[7]3种虾片在凡纳滨对虾育苗中的效果评价[J]. 杨育凯,林黑着,杨其彬,黄小林,黄忠. 四川农业大学学报. 2017(02)
[8]凡纳滨对虾3种主要病毒和虾肝肠胞虫在辽宁地区的流行情况分析[J]. 王博雅,王力,刘美如,叶仕根,黎睿君,李华,李强. 大连海洋大学学报. 2017(02)
[9]凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）传染性皮下及造血组织坏死病毒（IHHNV）及虾肝肠胞虫（EHP）的荧光定量PCR检测[J]. 刘宝彬,杨冰,吕秀旺,万晓媛,刘珍,黄倢. 渔业科学进展. 2017(02)
[10]应用荧光染色剂Fluorescent Brightener 28和Propidium Iodide染色识别家蚕微孢子虫[J]. 戴卫江,陈功,彭祥然,李孝良,马琳,唐旭东,徐莉,沈中元. 蚕业科学. 2017(01)
硕士论文
[1]对虾饵料生物携带WSSV的风险评估及红肉河蓝蛤对凡纳滨对虾抗病力的影响[D]. 刘家举.中国海洋大学 2013
[2]养殖大菱鲆常用饵料携带的细菌与其疾病发生的相关性分析[D]. 刘朝阳.中国海洋大学 2007
本文编号：3471322
【文章来源】：大连海洋大学辽宁省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 绪论
1.1 凡纳滨对虾养殖概况
1.2 凡纳滨对虾养殖常见病害
1.3 虾肝肠胞虫的研究进展
1.3.1 虾肝肠胞虫的发现
1.3.2 虾肝肠胞虫的分类依据和感染机制
1.3.3 虾肝肠胞虫的传播方式
1.3.4 虾肝肠胞虫的检测方法
1.3.5 虾肝肠胞虫的流行病学
1.3.6 虾肝肠胞虫的防控措施
1.4 本研究的目的和意义
第二章 虾肝肠胞虫(EHP)孢子的纯化与计量
2.1 材料与方法
2.1.1 材料
2.1.2 方法
2.2 结果与分析
2.2.1 EHP的 TaqMan探针实时荧光PCR标准曲线
2.2.2 虾样的EHP载量检测
2.2.3 EHP的蔗糖密度梯度离心提纯
2.2.4 纯化的EHP孢子的电镜观察
2.2.5 纯化的EHP孢子的光镜观察
2.2.6 纯化的EHP孢子的光镜计数
2.2.7 纯化的EHP孢子的Taq Man qPCR检测
2.3 讨论
第三章 荧光染料检测虾肝肠胞虫(EHP)的可行性研究
3.1 材料与方法
3.1.1 材料
3.1.2 方法
3.2 结果与分析
3.2.1 纯化孢子的荧光染料染色结果
3.2.2 对虾粪便和肝胰腺匀浆液的Calcofluor White染色结果
3.2.3 对虾各个组织切片的 Calcofluor White 染色结果
3.2.4 套式PCR法验证试验结果
3.2.5 原位 LAMP(ISDL)验证试验结果
3.3 讨论
第四章 对虾饵料中虾肝肠胞虫(EHP)的携带情况调查
4.1 材料与方法
4.1.1 材料
4.1.2 方法
4.2 结果与分析
4.2.1 采集样品的Taq Man qPCR检测结果
4.2.2 阳性沙蚕的DNA序列比对和原位LAMP试验
4.2.3 阳性虾片样品的人工感染试验结果
4.3 讨论
第五章 虾肝肠胞虫(EHP)防控药剂的效果评价
5.1 材料与方法
5.1.1 材料
5.1.2 方法
5.2 结果与分析
5.2.1 包裹材料的筛选结果
5.2.2 每次取样的样品信息统计
5.2.3 药物的效果评价结果
5.3 讨论
结论
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]凡纳滨对虾感染虾肝肠胞虫的群体及组织间差异性分析[J]. 程东远,邱亮,宋增磊,万晓媛,董宣,谢国驷,黄倢. 渔业科学进展. 2018(04)
[2]虾肝肠胞虫的研究进展[J]. 叶键,许婷,施礼科,王力,陈凡,郭水荣. 科学养鱼. 2018(01)
[3]柞蚕微孢子虫的研究进展[J]. 刘中文,徐欣,张英华,杨新峰,郭剑,朱绪伟. 中国蚕业. 2017(04)
[4]警惕卤虫可携带虾肝肠孢虫[J]. 叶键,施礼科,王力,陈凡,郭水荣,麻灵芬. 科学养鱼. 2017(11)
[5]中华绒螯蟹微孢子虫研究进展[J]. 刘洪岩,赵彦华,孙梦玲,薛晖. 水产养殖. 2017(10)
[6]南美白对虾生物学特性概述[J]. 李法君. 生物学教学. 2017(09)
[7]3种虾片在凡纳滨对虾育苗中的效果评价[J]. 杨育凯,林黑着,杨其彬,黄小林,黄忠. 四川农业大学学报. 2017(02)
[8]凡纳滨对虾3种主要病毒和虾肝肠胞虫在辽宁地区的流行情况分析[J]. 王博雅,王力,刘美如,叶仕根,黎睿君,李华,李强. 大连海洋大学学报. 2017(02)
[9]凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）传染性皮下及造血组织坏死病毒（IHHNV）及虾肝肠胞虫（EHP）的荧光定量PCR检测[J]. 刘宝彬,杨冰,吕秀旺,万晓媛,刘珍,黄倢. 渔业科学进展. 2017(02)
[10]应用荧光染色剂Fluorescent Brightener 28和Propidium Iodide染色识别家蚕微孢子虫[J]. 戴卫江,陈功,彭祥然,李孝良,马琳,唐旭东,徐莉,沈中元. 蚕业科学. 2017(01)
硕士论文
[1]对虾饵料生物携带WSSV的风险评估及红肉河蓝蛤对凡纳滨对虾抗病力的影响[D]. 刘家举.中国海洋大学 2013
[2]养殖大菱鲆常用饵料携带的细菌与其疾病发生的相关性分析[D]. 刘朝阳.中国海洋大学 2007
本文编号：3471322
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/scyylw/3471322.html
