淇河鲫CuZnSOD和MnSOD基因的克隆及其对嗜水气单胞菌的响应
发布时间：2021-11-02 05:17
超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）是生物抗氧化系统中重要的组成部分,主要用于清除体内多余的活性氧自由基,以保护机体遗传物质的完整性、细胞膜的稳定性等。水生动物由于缺乏特异性免疫,其自身天然免疫十分重要。近年来,大量研究证实SOD参与水生动物抗氧化反应。淇河鲫（Qihe crucian carp Carassius auratus）是河南省特有珍贵水产品,拥有很高的营养价值和经济价值,因此研究淇河鲫SOD基因特征及对病原菌的表达响应对于理解SOD的生物学功能具有重要意义。本研究以淇河鲫为研究对象,以淇河鲫肌肉总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增出Cu Zn SOD和Mn SOD的c DNA全长序列;采用q PCR技术分别检测了Cu Zn SOD和Mn SOD在健康淇河鲫10种器官组织中的表达情况;探究嗜水气单胞菌和LPS分别处理后淇河鲫肝、鳃、肾、脾和头肾中的表达响应;同时,采用羟胺法测定了相应酶活性变化。这些研究对于理解鱼体的抗氧化防护机制有重要意义,并为淇河鲫疾病防控提供理论依据。基于已知序列,设计引物,分别扩增淇河鲫Cu Zn SOD和Mn SO...
【文章来源】：河南师范大学河南省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
淇河鲫不同器官组织MnSODmRNA的表达Fig.3-2TherelativeRNAexpressionlevelofMnSODindifferentorgansandtissuesofQihecruciancarpCarassiusauratus
control group A.hydrophila LPS图 3-3 嗜水气单胞菌及 LPS 处理后淇河鲫 CuZnSOD 和 MnSOD mRNA 表达变化注：Liver(a)、Gill(a)、Kidney(a)、Spleen(a)和 Head Kidney(a)为淇河鲫 CuZnSOD 的表达变化图，Liver(b)、Gill(b)、Kidney(b)、Spleen(b)和 Head Kidney(b)为淇河鲫 MnSOD 的表达变化图(平均值±标准差，n=5 ,P<0.05*,P<0.01**)Fig. 3-3 CuZnSOD and MnSOD mRNA relative expression levels after infected by A.hydrophila and LPSin Qihe crucian carp Carassius auratus(mean ±SD , n=5, P<0.05*,P<0.01**)Note：Liver(a)、Gill(a)、Kidney(a)、Spleen(a) and Head Kidney(a) are for CuZnSODLiver(b)、Gill(b)、Kidney(b)、Spleen(b) and Head Kidney(b) are for MnSOD经嗜水气单胞菌和 LPS 处理后，淇河鲫 CuZnSOD 和 MnSOD 基因在各组织中的表达在特定的时间点有响应，其变化趋势大多呈现为：表达量先上调，后下降，其中在脾和肾中出现了再次上升的现象。在头肾中两种基因的表达情况与在其他组织的表达状况不同。CuZnSOD 在头肾中的表达呈现出先下降后上升的趋势，且分别在注射嗜水气单
45control group A.hydrophila LPS图 3-4 嗜水气单胞菌及 LPS 处理下淇河鲫各器官组织 SOD 总酶活性变化(平均值±标准差，n=5 , P<0.05*, P<0.01**)Fig. 3-4 SOD activity changesafter infected by A.hydrophila and LPS in Qihe crucian carp Carassiusauratus(mean ±SD , n=5, P<0.05*,P<0.01**)嗜水气单胞菌和 LPS 处理后，淇河鲫总 SOD 活性在肝脏、鳃、肾、脾和头肾这五种组织中均有变化。嗜水气单胞菌处理后，肝脏中 SOD 酶活性在 6h 显著高于对照组，这种高酶活性一直持续至 24h，并在 12h 达到最大值，随后酶活下降。LPS 处理后 SOD酶活性在 3h 处显著升高，并在 12h 处达到最大值，随后急剧下降至常值。鳃中 SOD 酶活性在两种处理后呈现相似的变化趋势，均是在 3h 处活性达到最大值，直至 12h 均极
本文编号：3471413
【文章来源】：河南师范大学河南省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
淇河鲫不同器官组织MnSODmRNA的表达Fig.3-2TherelativeRNAexpressionlevelofMnSODindifferentorgansandtissuesofQihecruciancarpCarassiusauratus
control group A.hydrophila LPS图 3-3 嗜水气单胞菌及 LPS 处理后淇河鲫 CuZnSOD 和 MnSOD mRNA 表达变化注：Liver(a)、Gill(a)、Kidney(a)、Spleen(a)和 Head Kidney(a)为淇河鲫 CuZnSOD 的表达变化图，Liver(b)、Gill(b)、Kidney(b)、Spleen(b)和 Head Kidney(b)为淇河鲫 MnSOD 的表达变化图(平均值±标准差，n=5 ,P<0.05*,P<0.01**)Fig. 3-3 CuZnSOD and MnSOD mRNA relative expression levels after infected by A.hydrophila and LPSin Qihe crucian carp Carassius auratus(mean ±SD , n=5, P<0.05*,P<0.01**)Note：Liver(a)、Gill(a)、Kidney(a)、Spleen(a) and Head Kidney(a) are for CuZnSODLiver(b)、Gill(b)、Kidney(b)、Spleen(b) and Head Kidney(b) are for MnSOD经嗜水气单胞菌和 LPS 处理后，淇河鲫 CuZnSOD 和 MnSOD 基因在各组织中的表达在特定的时间点有响应，其变化趋势大多呈现为：表达量先上调，后下降，其中在脾和肾中出现了再次上升的现象。在头肾中两种基因的表达情况与在其他组织的表达状况不同。CuZnSOD 在头肾中的表达呈现出先下降后上升的趋势，且分别在注射嗜水气单
45control group A.hydrophila LPS图 3-4 嗜水气单胞菌及 LPS 处理下淇河鲫各器官组织 SOD 总酶活性变化(平均值±标准差，n=5 , P<0.05*, P<0.01**)Fig. 3-4 SOD activity changesafter infected by A.hydrophila and LPS in Qihe crucian carp Carassiusauratus(mean ±SD , n=5, P<0.05*,P<0.01**)嗜水气单胞菌和 LPS 处理后，淇河鲫总 SOD 活性在肝脏、鳃、肾、脾和头肾这五种组织中均有变化。嗜水气单胞菌处理后，肝脏中 SOD 酶活性在 6h 显著高于对照组，这种高酶活性一直持续至 24h，并在 12h 达到最大值，随后酶活下降。LPS 处理后 SOD酶活性在 3h 处显著升高，并在 12h 处达到最大值，随后急剧下降至常值。鳃中 SOD 酶活性在两种处理后呈现相似的变化趋势，均是在 3h 处活性达到最大值，直至 12h 均极
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