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副溶血弧菌VPA0041和VPA1701蛋白调控运动性的分子机制研究

发布时间:2021-11-23 16:20
  副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)是一种革兰氏阴性菌,广泛存在于各种水环境中,如海洋,沿海和淡水环境。副溶血弧菌也是一种重要食源性病原菌,不仅能够导致海洋动物弧菌病,人们食用生的或者未煮熟的水产品可以导致急性胃肠炎。不仅严重威胁人类的饮食健康,也给水产养殖业造成巨大的经济损失,目前研究发现其致病性主要与黏附因子、溶血毒素、T3SSs、T6SSs、运动性、摄铁系统和蛋白酶等毒力因子息息相关。转录调控因子(TFs)主要是通过直接结合到启动子区域,直接调控下游基因的表达,如代谢途径、群体感应系统、毒力系统以及运动性等多种信号通路。为了深入了解毒力基因致病机制,前期研究通过转座子插入失活的方法(TIS)筛选出230个与肠道定殖相关的基因。本研究筛选其中8个转录调控因子作为本次研究的对象,分别为VPA0041、VPA0076、VPA0240、VPA0692、VPA0806、VPA1365、VPA1562和VPA1701。利用同源重组的方法分别成功构建了这8个基因的缺失突变株,分别为△VPA0041、△VPA0076、△VPA0240、△VPA0692、△VPA08... 

【文章来源】:扬州大学江苏省

【文章页数】:93 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

副溶血弧菌VPA0041和VPA1701蛋白调控运动性的分子机制研究


图1副溶血弧菌中T3SS调控毒力的分子机制??Fig?】The?molercular?mechanism?of?T3SSs?regulating?virulence?in??

机制,分子


fcrri???erttcrobactin??—^?Tf?exogenous??peritdasm?protein?_?_??TmB??Inaei?abc?匕秘?p^cde?aBC??membiaiie?s>swjnx?ExbD?abc?rystsrxn?SVsterm??Cvtoolasm?,??e?0?e??晷??Fur??Fui??0?^?Fur??C?0???^????c?°?^?J ̄ ̄5E——??图2摄铁系统的致病分子机制??Fig?2?The?inolercular?mechanism?of?iron?uptake?system??6??

质粒,图谱,试剂


?扬州大学硕士学位论文???onRj6K??—RP4??//?^yCAT??[]??DM4?H??T?7000?bp?Ll??v?#??SacBR??图1-1质粒pDM4图谱??Fig?1-1?The?map?of?plasmid?pDM4??M?1??图1-2质粒pMMB207图谱??Figl-2?The?map?of?plasmid?pMMB207??1.2主要试剂??LB肉汤培养基(LB)、LB肉汤琼脂培养基(LA)、5〇xTAEbuffer、6xEMSA上??样缓冲液、蛋白上样缓冲液、蛋白Marker、琼脂糖和抗生素(羧辛青霉素、氯霉素和??卡那青霉素)、氯化钾、碳酸氢钠、溶菌酶、75%乙醇和细菌总RNA提取试剂盒购自??生工生物工程(上海)股份有限公司;PCR反应相关试剂(2><PlusTaqMasterDNA聚??合酶、高保真?Prime?STAR?Max?DNA?聚合酶、DNA?Marker?和?l〇xLoading?buffer)、普??通DNA产物纯化试剂盒、凝胶回收试剂盒、质粒DNA抽提试剂盒购自南京诺唯赞生??物科技有限公司;逆转录试剂盒和荧光定量试剂购自TAKARA生物技术有限公司;??DNA酶切、连接反应相关试剂(限制性内切酶Xho?I、Sal?I、Sac?I、Nde?I、l〇xQ.Cut??buffer、T4DNALigase以及Ligase?buffer)购自宝日医生物技术(北京)有限公司。??12??

【参考文献】:
期刊论文
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本文编号:3514248

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