灭活嗜水气单胞菌刺激草鱼肾细胞（CIK）转录组研究及免疫相关分析
发布时间：2022-01-09 03:16
草鱼（Ctenopharyngodon idellus）是我国重要的淡水养殖鱼类,其产量及产值在最近几年一直位于淡水养殖鱼类前列。然而当前病害问题已成为制约草鱼养殖业发展的瓶颈,其中由嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）引发的败血症一直是草鱼养殖过程中的重要疾病。本研究从理论和实际两方面考虑,立足我国国情,以草鱼肾细胞（C.idellus kidney,CIK）为研究对象,开展以发掘草鱼免疫相关基因为目标的转录组研究。以期为今后草鱼相关基因的克隆和草鱼免疫学研究,尤其是草鱼细菌性败血症的发病机理提供重要的基础理念。本研究采用CCK-8和ELISA检测试剂盒分别测定CIK细胞经热灭活嗜水气单胞菌刺激后的细胞活力和相关酶活指标;依据半定量RT-PCR技术确定灭活病原菌刺激CIK细胞的最适浓度和最佳时长,并对该刺激条件下的细胞样品进行转录组测序;利用Illumina测序技术构建了CIK细胞经灭活病原菌刺激后的转录组文库,结合生物信息学分析的方法,探究CIK细胞的抗菌免疫应答机制。主要结果如下:1.在细胞活力测定中,随着刺激时间的延长,CIK细胞数目逐渐减少,细胞活性逐渐减...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
灭活病原菌刺激对CIK细胞形态的影响（10×）
第2章嗜水气单胞菌对草鱼肾细胞致病性研究21不清，细胞逐渐裂解（图2-2C），当孵育时间为3h时，细胞裂解程度进一步加强，部分细菌被消化（图2-2D）。图2-2CIK细胞体外吞噬现象观察孵育时长：（A）0h;（B）1h;（C）2h;（D）3h。Figure2-2ObservationofphagocytosisofC.kidneycellinvitroDurationofincubation:（A）0h;（B）1h;（C）2h;（D）3h.2.3.2细胞活性检测结果经灭活嗜水气单胞菌刺激处理的CIK细胞活性检测情况如图2-3所示。图2-3灭活嗜水气单胞菌刺激对CIK细胞活性的影响Figure2-3EffectsofActivatedA.hydrophilaStimulationonC.idelluskidneycell’sviabilityindex
第2章嗜水气单胞菌对草鱼肾细胞致病性研究21不清，细胞逐渐裂解（图2-2C），当孵育时间为3h时，细胞裂解程度进一步加强，部分细菌被消化（图2-2D）。图2-2CIK细胞体外吞噬现象观察孵育时长：（A）0h;（B）1h;（C）2h;（D）3h。Figure2-2ObservationofphagocytosisofC.kidneycellinvitroDurationofincubation:（A）0h;（B）1h;（C）2h;（D）3h.2.3.2细胞活性检测结果经灭活嗜水气单胞菌刺激处理的CIK细胞活性检测情况如图2-3所示。图2-3灭活嗜水气单胞菌刺激对CIK细胞活性的影响Figure2-3EffectsofActivatedA.hydrophilaStimulationonC.idelluskidneycell’sviabilityindex
【参考文献】：
期刊论文
[1]人参皂苷Rg1介导PI3K/AKT/FOXO3通路缓解高糖诱导的肾小球系膜细胞氧化应激反应[J]. 刘文华,望永鼎,翟一飞,靳莉莉,肖丽,李永兵. 免疫学杂志. 2020(04)
[2]鱼类免疫系统的研究进展[J]. 张媛媛,宋理平. 河北渔业. 2018(02)
[3]草鱼MHCI区基因的表达特征[J]. 吴凡,郭稳杰,詹柒凤,张锋,胡晓坤,梁旭方,刘红. 华中农业大学学报. 2017(05)
[4]凝血与补体级联反应信号通路对艾滋病湿热内蕴证发病的影响[J]. 张海燕,张淼,吕顺武,高亮,李建智,谢世平. 中国全科医学. 2017(06)
[5]草鱼NF-κB2和IκBα基因的组织分布及对GCRV病毒感染的应答分析[J]. 孙家贤,郭富华,黄容,李勇明,何利波,廖兰杰,汪亚平. 南昌大学学报(理科版). 2016(06)
[6]嗜水气单胞菌致病性研究进展[J]. 蒋霞. 生物技术世界. 2014(06)
[7]Toll样受体与自身免疫性疾病关系的研究进展[J]. 马瑞敏,张国军,康熙雄. 首都医科大学学报. 2012(02)
[8]嗜水气单胞菌国内分离株的毒力因子分布与致病性相关性分析[J]. 付乔芳,邱军强,胡鲲,杨先乐,安健. 生物学杂志. 2011(06)
[9]鱼类免疫系统的研究进展[J]. 王俊相,李玉萍,孔令富,李莲军. 四川畜牧兽医. 2010(07)
[10]鱼类体液中的几种抗菌因子研究进展[J]. 单晓枫,郭伟生,张洪波,钱爱东. 河南农业科学. 2010(05)
博士论文
[1]miRNA-338-5p抑制胶质瘤增殖、侵袭的作用及靶向CTBP2蛋白的核素显像研究[D]. 刘德志.吉林大学 2018
[2]水稻类病变早衰基因LMES3和LMES4的克隆与功能研究[D]. 王小虎.扬州大学 2018
[3]PEG模拟干旱条件下烯效唑对薏苡幼苗生理生化的调控及转录组分析[D]. 黄玉兰.黑龙江八一农垦大学 2017
[4]红鳍笛鲷皮肤转录组分析及体色相关基因克隆、表达与进化研究[D]. 张艳苹.湖南师范大学 2016
[5]碳纳米管载药系统构建及其对草鱼出血病防控研究[D]. 朱斌.西北农林科技大学 2015
[6]感病草鱼脾脏的比较转录组分析[D]. 许宝红.湖南农业大学 2012
[7]小鼠B淋巴细胞吞噬功能研究[D]. 高继鑫.第四军医大学 2012
[8]大黄鱼对鳗弧菌减毒活疫苗免疫应答差异表达基因的筛选与鉴定[D]. 卫玮.华东理工大学 2010
[9]鱼源嗜水气单胞菌aopB- aopD- aroA-缺失株构建及其生物学特性研究[D]. 罗晓松.华中农业大学 2008
[10]养殖真鲷、黑鲷抗菌肽hepcidin的基因克隆、表达特性及其抗菌活性研究[D]. 杨明.厦门大学 2006
硕士论文
[1]杀鱼爱德华氏菌侵染小鼠巨噬细胞的转录组差异表达分析[D]. 姜衡.山东农业大学 2019
[2]基于细胞自噬探讨活血定眩胶囊含药血清对bEnd.3细胞缺氧损伤的影响[D]. 黄凯.甘肃中医药大学 2019
[3]草鱼TLR19基因在抗病毒免疫中的功能及信号通路研究[D]. 纪剑飞.华中农业大学 2018
[4]百草枯对CIK细胞的毒性及其作用机制的初步研究[D]. 姜丝雨.河南师范大学 2018
[5]沙眼衣原体CT849蛋白激活JNK/ERK信号通路诱导THP-1细胞分泌促炎细胞因子[D]. 钱后.南华大学 2018
[6]鲤鱼感染嗜水气单孢菌后脾脏转录组的比较分析及免疫相关基因SCARA的系统研究[D]. 冯帅升.上海海洋大学 2016
[7]谷胱甘肽转移酶在近江牡蛎耐受腹泻性贝毒中的作用研究[D]. 邹颖.暨南大学 2015
[8]大黄鱼感染刺激隐核虫病前后肝脏转录组分析以及三种组蛋白的克隆与表达研究[D]. 金媛.厦门大学 2014
[9]毒死蜱对鲤鱼的免疫毒性研究[D]. 刘丽.河南师范大学 2013
[10]大黄鱼脾脏转录组和表达谱分析以及过氧化物酶4结构与功能研究[D]. 母尹楠.国家海洋局第三海洋研究所 2011
本文编号：3577840
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
灭活病原菌刺激对CIK细胞形态的影响（10×）
第2章嗜水气单胞菌对草鱼肾细胞致病性研究21不清，细胞逐渐裂解（图2-2C），当孵育时间为3h时，细胞裂解程度进一步加强，部分细菌被消化（图2-2D）。图2-2CIK细胞体外吞噬现象观察孵育时长：（A）0h;（B）1h;（C）2h;（D）3h。Figure2-2ObservationofphagocytosisofC.kidneycellinvitroDurationofincubation:（A）0h;（B）1h;（C）2h;（D）3h.2.3.2细胞活性检测结果经灭活嗜水气单胞菌刺激处理的CIK细胞活性检测情况如图2-3所示。图2-3灭活嗜水气单胞菌刺激对CIK细胞活性的影响Figure2-3EffectsofActivatedA.hydrophilaStimulationonC.idelluskidneycell’sviabilityindex
第2章嗜水气单胞菌对草鱼肾细胞致病性研究21不清，细胞逐渐裂解（图2-2C），当孵育时间为3h时，细胞裂解程度进一步加强，部分细菌被消化（图2-2D）。图2-2CIK细胞体外吞噬现象观察孵育时长：（A）0h;（B）1h;（C）2h;（D）3h。Figure2-2ObservationofphagocytosisofC.kidneycellinvitroDurationofincubation:（A）0h;（B）1h;（C）2h;（D）3h.2.3.2细胞活性检测结果经灭活嗜水气单胞菌刺激处理的CIK细胞活性检测情况如图2-3所示。图2-3灭活嗜水气单胞菌刺激对CIK细胞活性的影响Figure2-3EffectsofActivatedA.hydrophilaStimulationonC.idelluskidneycell’sviabilityindex
【参考文献】：
期刊论文
[1]人参皂苷Rg1介导PI3K/AKT/FOXO3通路缓解高糖诱导的肾小球系膜细胞氧化应激反应[J]. 刘文华,望永鼎,翟一飞,靳莉莉,肖丽,李永兵. 免疫学杂志. 2020(04)
[2]鱼类免疫系统的研究进展[J]. 张媛媛,宋理平. 河北渔业. 2018(02)
[3]草鱼MHCI区基因的表达特征[J]. 吴凡,郭稳杰,詹柒凤,张锋,胡晓坤,梁旭方,刘红. 华中农业大学学报. 2017(05)
[4]凝血与补体级联反应信号通路对艾滋病湿热内蕴证发病的影响[J]. 张海燕,张淼,吕顺武,高亮,李建智,谢世平. 中国全科医学. 2017(06)
[5]草鱼NF-κB2和IκBα基因的组织分布及对GCRV病毒感染的应答分析[J]. 孙家贤,郭富华,黄容,李勇明,何利波,廖兰杰,汪亚平. 南昌大学学报(理科版). 2016(06)
[6]嗜水气单胞菌致病性研究进展[J]. 蒋霞. 生物技术世界. 2014(06)
[7]Toll样受体与自身免疫性疾病关系的研究进展[J]. 马瑞敏,张国军,康熙雄. 首都医科大学学报. 2012(02)
[8]嗜水气单胞菌国内分离株的毒力因子分布与致病性相关性分析[J]. 付乔芳,邱军强,胡鲲,杨先乐,安健. 生物学杂志. 2011(06)
[9]鱼类免疫系统的研究进展[J]. 王俊相,李玉萍,孔令富,李莲军. 四川畜牧兽医. 2010(07)
[10]鱼类体液中的几种抗菌因子研究进展[J]. 单晓枫,郭伟生,张洪波,钱爱东. 河南农业科学. 2010(05)
博士论文
[1]miRNA-338-5p抑制胶质瘤增殖、侵袭的作用及靶向CTBP2蛋白的核素显像研究[D]. 刘德志.吉林大学 2018
[2]水稻类病变早衰基因LMES3和LMES4的克隆与功能研究[D]. 王小虎.扬州大学 2018
[3]PEG模拟干旱条件下烯效唑对薏苡幼苗生理生化的调控及转录组分析[D]. 黄玉兰.黑龙江八一农垦大学 2017
[4]红鳍笛鲷皮肤转录组分析及体色相关基因克隆、表达与进化研究[D]. 张艳苹.湖南师范大学 2016
[5]碳纳米管载药系统构建及其对草鱼出血病防控研究[D]. 朱斌.西北农林科技大学 2015
[6]感病草鱼脾脏的比较转录组分析[D]. 许宝红.湖南农业大学 2012
[7]小鼠B淋巴细胞吞噬功能研究[D]. 高继鑫.第四军医大学 2012
[8]大黄鱼对鳗弧菌减毒活疫苗免疫应答差异表达基因的筛选与鉴定[D]. 卫玮.华东理工大学 2010
[9]鱼源嗜水气单胞菌aopB- aopD- aroA-缺失株构建及其生物学特性研究[D]. 罗晓松.华中农业大学 2008
[10]养殖真鲷、黑鲷抗菌肽hepcidin的基因克隆、表达特性及其抗菌活性研究[D]. 杨明.厦门大学 2006
硕士论文
[1]杀鱼爱德华氏菌侵染小鼠巨噬细胞的转录组差异表达分析[D]. 姜衡.山东农业大学 2019
[2]基于细胞自噬探讨活血定眩胶囊含药血清对bEnd.3细胞缺氧损伤的影响[D]. 黄凯.甘肃中医药大学 2019
[3]草鱼TLR19基因在抗病毒免疫中的功能及信号通路研究[D]. 纪剑飞.华中农业大学 2018
[4]百草枯对CIK细胞的毒性及其作用机制的初步研究[D]. 姜丝雨.河南师范大学 2018
[5]沙眼衣原体CT849蛋白激活JNK/ERK信号通路诱导THP-1细胞分泌促炎细胞因子[D]. 钱后.南华大学 2018
[6]鲤鱼感染嗜水气单孢菌后脾脏转录组的比较分析及免疫相关基因SCARA的系统研究[D]. 冯帅升.上海海洋大学 2016
[7]谷胱甘肽转移酶在近江牡蛎耐受腹泻性贝毒中的作用研究[D]. 邹颖.暨南大学 2015
[8]大黄鱼感染刺激隐核虫病前后肝脏转录组分析以及三种组蛋白的克隆与表达研究[D]. 金媛.厦门大学 2014
[9]毒死蜱对鲤鱼的免疫毒性研究[D]. 刘丽.河南师范大学 2013
[10]大黄鱼脾脏转录组和表达谱分析以及过氧化物酶4结构与功能研究[D]. 母尹楠.国家海洋局第三海洋研究所 2011
本文编号：3577840
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/scyylw/3577840.html
