E2和PrRPs对草鱼垂体促性腺激素的调节作用及其分子机制
发布时间：2022-01-22 02:59
大型鱼类性成熟时间长的问题普遍存在,这给人工繁殖生产和提高良种选育效率带来了较大困难。与哺乳动物类似,鱼类性腺发育和性成熟启动亦受下丘脑-垂体-性腺轴的调控,其中垂体促性腺激素（Gonadotropin,GtH）尤其是促黄体生成素（Luteinizing hormone,LH）脉冲式释放是性成熟启动的关键。基于此,以草鱼为研究对象,我们拟通过解析催乳素释放激素（Prolactin-releasing peptide,PrRP）和雌二醇（17β-estradiol,E2）对垂体中GtH合成与分泌的调节机制,进而揭示这两个因子在鱼类性成熟启动调控中的作用。本研究将丰富我们对鱼类性成熟启动调控网络的认识,对下一步开发鱼用高效催熟药,提高大型鱼类的育种效率具有重要意义。17β-雌二醇是由卵巢和脑生成的一种重要的性类固醇激素。在哺乳动物中,E2通过作用于下丘脑-垂体-性腺轴参与性成熟启动过程的调控。但是,人们对E2在硬骨鱼垂体中的功能了解较少。以草鱼为研究对象,我们首先从其垂体中克隆得到三种雌激素核受体（nERs:ERα,ERβ1和ERβ2）和两种G蛋白偶联膜受体（GPERs:GPER1a和GP...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
草鱼nERs和GPERs序列分析
图 2-2 草鱼 nERs 和 GPERs 的系统进化分析Fig. 2-2 Phylogenetic analysis of grass carp nERs and GPERs注释：（A）脊椎动物中 ER 氨基酸序列的系统进化分析。使用青鳉的 AR 基因作为外群。（B）草鱼 GPER 氨基酸序列的系统进化分析。使用草鱼 NK3R 作为外群。Note： (A) Phylogenetic analysis of ER amino acid sequences in vertebrate species. The Oryzias latipes AR was usedas the outgroup. (B) Phylogenetic tree of grass carp GPER using predicted amino acid sequences. NK3R from grasscarp served as an outgroup to root the tree.3.2 草鱼 nERs 和 GPERs 的组织表达利用 qRT-PCR，分析了 5 种雌二醇受体（GPER1a，GPER1b，ERα，ERβ1 和ERβ2）在不同脑区中的表达情况。如图 2-3 所示，这五种受体的转录信号广泛分布于嗅球，端脑，视顶盖，小脑，延髓，下丘脑和垂体。其中，GPER1a，ERα，ERβ1和 ERβ2 都在垂体中的表达量最高。在垂体中，ERβ1 的转录信号比其它的雌二醇受体都高。除此之外，与其它 4 种雌二醇受体相比，GPER1b 在垂体中的表达水平最低。
图 2-3 草鱼 nERs 和 GPERs 在脑中的组织分布Fig. 2-3 Tissue distribution of nERs and GPERs in grass carp brain areas3.3 在体实验验证 E2 在草鱼垂体中的功能以草鱼为研究模型，我们检测了 E2 的在体生理功能。按照 2 ng/g 草鱼体重的浓度对草鱼进行腹腔注射，处理 24 h 之后，可以显著地提高草鱼垂体中 LHβ 和 FSH的 mRNA 表达（图 2-4A）。同时在腹腔注射 E2 3 h 到 6 h 之间，草鱼血清 LH 分泌水平显著增加（图 2-4B）；类似的，E2 亦能显著（P<0.05）提高草鱼血清中 FSH分泌水平（图 2-4C）。
本文编号：3601433
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
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【学位级别】：硕士
【部分图文】：
草鱼nERs和GPERs序列分析
图 2-2 草鱼 nERs 和 GPERs 的系统进化分析Fig. 2-2 Phylogenetic analysis of grass carp nERs and GPERs注释：（A）脊椎动物中 ER 氨基酸序列的系统进化分析。使用青鳉的 AR 基因作为外群。（B）草鱼 GPER 氨基酸序列的系统进化分析。使用草鱼 NK3R 作为外群。Note： (A) Phylogenetic analysis of ER amino acid sequences in vertebrate species. The Oryzias latipes AR was usedas the outgroup. (B) Phylogenetic tree of grass carp GPER using predicted amino acid sequences. NK3R from grasscarp served as an outgroup to root the tree.3.2 草鱼 nERs 和 GPERs 的组织表达利用 qRT-PCR，分析了 5 种雌二醇受体（GPER1a，GPER1b，ERα，ERβ1 和ERβ2）在不同脑区中的表达情况。如图 2-3 所示，这五种受体的转录信号广泛分布于嗅球，端脑，视顶盖，小脑，延髓，下丘脑和垂体。其中，GPER1a，ERα，ERβ1和 ERβ2 都在垂体中的表达量最高。在垂体中，ERβ1 的转录信号比其它的雌二醇受体都高。除此之外，与其它 4 种雌二醇受体相比，GPER1b 在垂体中的表达水平最低。
图 2-3 草鱼 nERs 和 GPERs 在脑中的组织分布Fig. 2-3 Tissue distribution of nERs and GPERs in grass carp brain areas3.3 在体实验验证 E2 在草鱼垂体中的功能以草鱼为研究模型，我们检测了 E2 的在体生理功能。按照 2 ng/g 草鱼体重的浓度对草鱼进行腹腔注射，处理 24 h 之后，可以显著地提高草鱼垂体中 LHβ 和 FSH的 mRNA 表达（图 2-4A）。同时在腹腔注射 E2 3 h 到 6 h 之间，草鱼血清 LH 分泌水平显著增加（图 2-4B）；类似的，E2 亦能显著（P<0.05）提高草鱼血清中 FSH分泌水平（图 2-4C）。
本文编号：3601433
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