鲟鱼嗜水气单胞菌灭活疫苗研制及其免疫效果分析

发布时间：2022-02-21 04:28

　　鲟鱼是我国淡水养殖重要品种之一,在我国淡水养殖业中占重要地位。目前鲟鱼养殖业呈快速增长趋势,但随着鲟鱼养殖集约化和规模化程度不断提高,细菌性疾病不断发生。嗜水气单胞菌是弧菌科气单胞菌属成员,广泛存活在淡水、淤泥、土壤等环境,常常引起鱼类包括鲟鱼等以及两牺动物发生病死亡。当前,细菌性疾病防治多用抗生素及化学药物,但若长期不合理或不规范使用,引起细菌耐药现象出现,导致环境细菌污染严重等问题,而疫苗预防具有效果好和低污染等优点,已在鲟鱼养殖业中广泛应用。本研究在前期分离得到鲟鱼源嗜水气单胞菌的基础上,通过比较灭活条件包括甲醛浓度（0.05%、0.1%、0.2%、0.3%和0.4%）、灭活温度（4℃、28℃、30℃和37℃）和灭活时间（4h、8h、12h和24h）,制备鲟鱼用嗜水气单胞菌灭活疫苗。然后选取鲟鱼140尾,随机分为对照组、疫苗组、佐剂组和疫苗+佐剂组,每组35尾,相应以无菌PBS溶液、灭活疫苗、黄芪多糖和灭活疫苗+黄芪多糖进行注射。于注射后第1d、7d、14d、21d和28d时,随机采集试验鲟尾静脉血液样本,5尾/组,采用ELISA测定鲟鱼血液常规生化指标（谷草转氨酶AST、谷丙转... 

【文章来源】：贵州大学贵州省211工程院校

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
文献综述
    1 嗜水气单胞菌病概述
        1.1 病原菌形态特征
        1.2 病原菌致病因子
    2 嗜水气单胞菌疫苗种类
        2.1 灭活疫苗
        2.2 弱毒疫苗
        2.3 核酸疫苗
        2.4 亚单位疫苗
    3 免疫佐剂种类
        3.1 免疫佐剂分类
        3.2 黄芪多糖
    4 鱼类免疫系统
        4.1 鱼类免疫系统的组成
        4.2 鱼类免疫相关评价指标
    5 研究目的与意义
前言
1 材料
    1.1 试验动物与菌株
    1.2 主要试剂
    1.3 主要仪器
2 方法
    2.1 灭活疫苗的制备
        2.1.1 菌株复苏及菌液配制
        2.1.2 灭活条件筛选
        2.1.3 灭活疫苗的制备具体过程
        2.1.4 灭活疫苗无菌及安全性检验
    2.2 试验分组管理及相关指标检测
        2.2.1 黄芪多糖溶液的制备
        2.2.2 试验动物分组饲养管理及免疫接种
        2.2.3 试验样品采集及处理
        2.2.4 常规生化指标测定
        2.2.5 相关免疫指标测定
    2.3 免疫保护效果
        2.3.1 攻毒试验
        2.3.2 免疫保护率
        2.3.3 对组织细胞的影响
    2.4 数据处理
3 结果
    3.1 灭活疫苗制备结果
        3.1.1 灭活条件筛选结果
        3.1.2 灭活疫苗无菌检验及安全性检验结果
    3.2 相关免疫指标检测结果
        3.2.1 常规生化指标检测结果
        3.2.2 血清免疫指标检测结果
    3.3 免疫保护效果
        3.3.1 免疫保护率
        3.3.2 对组织细胞影响的结果
4 讨论
    4.1 灭活疫苗制备结果分析
    4.2 相关指标检测结果分析
        4.2.1 常规生化指标检测结果分析
        4.2.2 相关免疫指标检测结果分析
    4.3 免疫保护效果分析
        4.3.1 免疫保护率结果分析
        4.3.2 对组织细胞影响结果分析
5 全文结论
参考文献
致谢
附录 攻读硕士学位期间发表论文情况


【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]褐牙鲆早期生活史阶段的抗氧化和免疫系统对甲基汞毒性的响应[D]. 任中华.中国科学院大学(中国科学院海洋研究所) 2019
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硕士论文
[1]嗜水气单胞菌灭活疫苗浸泡水温对异育银鲫免疫应答的影响研究[D]. 刘恩秀.西南大学 2018
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[3]两种佐剂对虹鳟杀鲑气单胞菌灭活疫苗免疫效果的影响[D]. 刘帅.上海海洋大学 2017
[4]俄罗斯鲟性腺溃烂病的免疫效果研究及脓包病病原的分离鉴定[D]. 肖艳翼.上海海洋大学 2016
[5]大鲵细菌病原的分离鉴定与嗜水气单胞菌灭活疫苗的免疫应答研究[D]. 杨星.南京农业大学 2014
[6]加州鲈嗜水气单胞菌灭活疫苗免疫效果及免疫学评价[D]. 付亚成.湖南农业大学 2010
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本文编号：3636498