中华鳖Dmrt1基因的克隆及表达分析

发布时间：2022-04-18 21:13

　　中华鳖（Pelodiscus sinensis）属于爬行纲（Reptilia），龟鳖目（Testudines），鳖科（Trionychidae），鳖属（Pelodiscus），是我国传统的名贵水产品。其雄性个体不仅生长快，而且裙边较雌性个体宽厚，具有更高的经济价值和营养价值。研究发现中华鳖无异型性染色体，性别决定为温度依赖型，目前中华鳖性腺分化机制尚未阐明，有关性别决定基因Dmrt1的研究尚未见报道。Dmrt1基因是DMRT基因家族的成员之一，是目前已知性别决定和性别分化相关基因中最为保守的一个。为研究Dmrt1基因对中华鳖性别分化的影响，采用RACE方法获得该基因的cDNA全长序列，并利用荧光定量PCR技术分析了Dmrt1基因在中华鳖不同龄期及不同组织的表达情况。研究表明：中华鳖Dmrt1基因的cDNA序列全长为2335bp，包括164bp的5′非编码区（5′UTR）、1064bp的3′端非编码区（3′UTR），1107bp的开放阅读框（ORF），编码368个氨基酸，预测分子量为39.20kDa，理论等电点（pI）为7.58。同源性分析发现中华鳖Dmrt1基因的氨基酸序列与部分物种的... 

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 性别决定与性别分化
        1.1.1 性别决定的几种方式
        1.1.2 性别分化的相关基因
    1.2 爬行动物 TSD 机制
    1.3 Dmrt 基因家族
        1.3.1 Dmrt1 基因
        1.3.2 Dmrt 家族其他基因的功能
    1.4 中华鳖的性别决定
    1.5 研究目的和意义
第2章 中华鳖 Dmrt1 基因的克隆及生物信息学分析
    2.1 材料与仪器
        2.1.1 材料
        2.1.2 实验仪器及试剂
    2.2 方法
        2.2.1 总 RNA 的提取
        2.2.2 cDNA 第一链的合成
        2.2.3 Dmrt1 基因 cDNA 全序列的克隆
        2.2.4 中华鳖 Dmrt1 基因序列全长验证
        2.2.5 生物信息学分析
    2.3 实验结果
        2.3.1 中华鳖精巢总 RNA
        2.3.2 中华鳖 Dmrt1 基因全长 cDNA 的克隆
        2.3.3 中华鳖 Dmrt1 基因 cDNA 序列分析
    2.4 讨论
第3章 中华鳖 Dmrt1 基因的表达分析
    3.1 材料与试剂
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 主要试剂及仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 引物设计
        3.2.2 各组织总 RNA 的提取
        3.2.3 cDNA 第一链的合成
        3.2.4 标准曲线的制作
        3.2.5 Dmrt1 基因的荧光定量 PCR
    3.3 结果分析
    3.4 讨论
结语
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间取得的科研成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]DMRT基因家族研究进展[J]. 张月圆,王昌留.  中国细胞生物学学报. 2013(11)
[2]脊椎动物性别决定基因与性染色体演化机制[J]. 邵长伟,陈松林.  农业生物技术学报. 2012(12)
[3]温度依赖型性别决定在爬行动物中的研究进展[J]. 刘智棋,李婉,唐森威,李剑勇,杨东波,杨毅.  四川动物. 2012(04)
[4]脊椎动物Dmrt基因的研究进展[J]. 汪海,王婷茹,袁静,杨超,于祥国,李明辉,王德寿.  贵州农业科学. 2012(05)
[5]黄颡鱼DMRT1基因cDNA全长克隆及其表达分析[J]. 李林,梁宏伟,李忠,罗相忠,张志伟,朱媛媛,邹桂伟.  华中农业大学学报. 2012(02)
[6]爬行动物温度决定性别的现象与机制[J]. 杜卫国,孙宝珺.  生物学通报. 2012(03)
[7]两栖动物性别决定相关基因的研究进展[J]. 刘佳,李忻怡,张育辉.  动物学杂志. 2011(06)
[8]孵化温度对中华鳖性别分化的影响[J]. 巫旗生,王晓清,曾亚英,马晓,何横忠.  饲料博览. 2011(02)
[9]Dmrt基因家族的研究进展[J]. 杨洪雁,宁方勇,杜智恒,杨春山,白秀娟.  黑龙江畜牧兽医. 2010(01)
[10]龟鳖类温度依赖型性别决定机制的研究进展[J]. 贺斌,史海涛,廖广桥.  动物学杂志. 2009(05)

硕士论文
[1]DMRT家族生物信息学分析及Dmrt4/Dmrt6表达与功能初步研究[D]. 汪海.西南大学 2013
[2]孵化温度对乌龟性别分化影响的研究[D]. 李珊.湖南师范大学 2002



本文编号：3646371