中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）C型凝集素的抗菌功能研究

发布时间：2022-06-28 09:14

　　作为模式识别受体,C型凝集素家族（CTLs）在识别和清除病原物的过程中扮演重要角色。在本研究中,在中华绒螯蟹中发现一种新的CTL。根据从肝胰腺cDNA文库里分离得到的ESTs克隆得到该基因的全长。该基因全长为685bp含开放阅读框（ORF）468bp,可编码155个氨基酸。氮端含有信号肽和糖类识别结构功能域（CRD）。通过实时定量PCR技术,检测该基因mRNA大量存在于肝胰腺中,在其他组织中很少甚至没有。经过脂多糖（LPS）的免疫刺激,该基因mRNA水平明显上调。该重组蛋白（rEsLecD）可以结合多种微生物,包括革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌和真菌。同时,钙离子的存在可以增强该重组蛋白对细菌的结合能力,但钙离子在结合实验中不是必须的。该重组蛋白与细菌的结合继而诱导病原微生物的凝集。另外我们检测到这种重组蛋白能够抑制细菌的生长,并且有一定的杀菌作用。更有趣的是,该重组蛋白可以引发血细胞体外包裹。总之本研究结果预示着,该凝集素蛋白作为抗菌模式识别受体分子,在无脊椎动物的非特异性免疫系统中,扮演重要角色。Lectins作为一种模式识别受体（PRR）,以细胞表面受体或者游离的可溶蛋白存在。在识别... 

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
论文摘要
ABSTRACT
第一章 综述
    第一节 甲壳动物动物免疫系统
    第二节 C型凝集素简介
    第三节 本研究的意义及技术路线
第二章 EsLecD基因的序列以及表达模式分析
    第一节 EsLecD基因全长的克隆
    第二节 EsLecD基因的序列分析
    第三节 EsLecD表达模式分析
第三章 EsLecD的抗菌机制探讨
    第一节 重组载体构建以及重组蛋白的表达和纯化
    第二节 rEsLecD与细菌的结合以及钙离子依赖性分析
    第三节 rEsLecD抑菌和杀菌活性的分析
    第四节 rEsLecD凝集细菌活性分析
    第五节 rEsLecD参与血细胞包裹作用的分析
第四章 总结及展望
参考文献
附录
致谢



本文编号：3653944