施氏鲟促性腺激素α亚基的克

发布时间：2022-07-12 10:11

　　为了解促性腺激素α基因（Gt Hα）在施氏鲟Acipenser schrenckii性腺分化过程中的表达、分布及调控作用。采用同源性克隆和c DNA末端快速扩增（RACE）方法从施氏鲟垂体中克隆了Gt Hα基因的全长c DNA序列。通过腹腔注射不同剂量（1μg/kg、3μg/kg和5μg/kg）的LHRH-A,应用RT-qPCR方法检测在注射LHRH-A后不同时段（1 d、3 d、5 d、7 d）施氏鲟垂体和性腺中Gt Hα基因的表达变化,并研究Gt Hα在心、肝、脾、肾、垂体等不同组织中的表达分布。结果表明:Gt Hα基因的全长c DNA序列中包含54 bp的5’非编码区、348 bp的开放阅读框和243 bp的3’非编码区。该基因共编码115个氨基酸,蛋白质二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,属于含有信号肽、跨膜结构且分泌到细胞外的亲水性蛋白。氨基酸同源性和进化分析表明,施氏鲟与中华鲟Acipenser sinensis Gt Hα序列一致性最高,与鲟科鱼类亲缘关系最近。实时荧光定量PCR检测发现,Gt Hα基因的表达具有组织特异性,在性腺、垂体中的表达量较高,显著高于肌肉、肠... 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料及样品采集
    1.2 总RNA的提取和c DNA合成
    1.3 施氏鲟Gt Hα基因全长克隆
    1.4 施氏鲟Gt Hα基因的序列分析
    1.5 实时荧光定量PCR
    1.6 数据处理
2 结果与分析
    2.1 施氏鲟Gt Hα的序列分析和蛋白质结构预测
    2.2 施氏鲟Gt Hα氨基酸同源性比较及系统进化分析
    2.3 施氏鲟Gt Hα在不同组织中的表达
    2.4 LHRH-A对施氏鲟Gt Hαm RNA表达的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]抚仙金线鲃促性腺激素亚基基因克隆及组织表达分析[J]. 杨国坤,关佳佳,孙彩云,王晓爱,潘晓赋,杨君兴,李文笙.  四川动物. 2016(05)
[2]条石鲷促性腺激素α亚基的克隆与表达特性分析[J]. 陈圣毅,史宝,柳学周,徐永江,李晓晓,王珊珊,王妍妍.  海洋科学进展. 2015(02)
[3]施氏鲟的性腺分化及养殖水温对其性腺分化的影响[J]. 张颖,孙慧武,刘晓勇,孙大江,曲秋芝.  中国水产科学. 2012(06)
[4]中国的鲟鱼养殖[J]. 孙大江,曲秋芝,张颖,马国军,王念民.  水产学杂志. 2011(04)
[5]LHRH-A粗制品对金鲫卵巢发育的影响[J]. 谢嘉华.  泉州师范学院学报. 2003(06)
[6]促黄体素释放激素和多巴胺拮抗物对鲇促性腺激素释放的作用[J]. 温海深,林浩然.  水产学报. 2001(05)



本文编号：3658929