凡纳滨对虾急性肝胰腺坏死病病原分离鉴定及耐药性分析

发布时间：2022-07-12 15:13

　　本研究从疑似患急性肝胰腺坏死病（Acute hepatopancreas necrosis disease,AHPND）的凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）肝胰腺组织中分离到一株优势菌株,采用16S rRNA分析,结合生理生化和质谱特征,鉴定该株优势菌为副溶血弧菌（Vibrio parahemolyticus）。毒力基因分析结果显示,菌株携带毒力蛋白PirA＆B^VP相关毒力基因Pir^vpA和Pir^vpB,但不携带副溶血弧菌主要致病因子耐热直接溶血毒素基因Tdh和相对耐热溶血毒素基因Trh。对健康对虾进行回归感染,72 h全部死亡,临床症状符合典型AHPND症状。药物敏感性分析结果显示,该菌株对甲砜霉素、氟苯尼考等6种药物敏感,对氨苄西林钠、盐酸土霉素等4种药物耐药,对硫酸新霉素、恩诺沙星等2种药物表现为中介。这可为对虾急性肝胰腺坏死病的流行病学研究和防控技术开发提供基础资料。 

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 试验材料
        1.1.1 试验用虾
        1.1.2 主要实验仪器
        1.1.3 主要实验试剂
    1.2 试验方法
        1.2.1 病原分离与鉴定
            1)细菌分离
            2)回归感染实验
            3)菌株的生化鉴定
            4)菌株的分子生物学鉴定
            5)菌株的MALDI-TOF质谱鉴定
        1.2.2 药物敏感性试验
2 结果与分析
    2.1 病原分离与鉴定
        2.1.1 菌株分离情况及形态特征
        2.1.2 病原回归感染
        2.1.3 16S rRNA扩增情况和系统发育分析
        2.1.4 菌株的生化鉴定
        2.1.5 MALDI-TOF质谱快速鉴定
        2.1.6 菌株的毒力基因分析
    2.2 菌株的耐药性分析
3 讨论
    3.1 副溶血弧菌的毒力基因
    3.2 AHPND致病菌的分离鉴定方法
    3.3 AHPND的防控措施
4 结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]福建省南美白对虾幼体急性肝胰腺坏死病病原分离与PCR检测[J]. 郭书林,陈信忠,尤颖哲,陈何东,王艺红,丁亦男,龚艳清,杨俊萍.  中国动物检疫. 2019(06)
[2]致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VpAHPND)自然感染三疣梭子蟹[J]. 郝景伟,高保全,王崇,孟宪亮,万晓媛,李小平,刘萍,张庆利.  水产学报. 2019(07)
[3]对虾急性肝胰腺坏死综合症双重PCR检测方法的建立[J]. 邓艳,黄燕琼,戴金,何淑华,赵尚志,柏建山.  中国兽医杂志. 2018(07)
[4]凡纳滨对虾急性肝胰腺坏死病（AHPND）病原分离鉴定及其致病性分析[J]. 贾丹,史成银,黄倢,张庆利,万晓媛,许华,刘冉阳,王海波,郭程程,谢国驷.  渔业科学进展. 2018(03)
[5]几种消毒剂对凡纳滨对虾致病性弧菌的杀灭作用[J]. 刘志轩,王印庚,张正,王凯,蔡生力,包海岩,姚学良,张振.  渔业科学进展. 2018(03)
[6]凡纳滨对虾急性肝胰腺坏死综合征研究进展[J]. 蒋葛,沈辉,万夕和,乔毅.  动物医学进展. 2018(04)
[7]对虾急性肝胰腺坏死综合征病原研究进展[J]. 陈信忠,郭书林,龚艳清,苏亚玲,杨俊萍,孔繁德.  检验检疫学刊. 2016(01)
[8]副溶血性弧菌流行特征及毒力基因分析[J]. 杨贵清,杜小莉,卓菲,赵洁玲.  热带医学杂志. 2015(08)
[9]副溶血性弧菌毒力基因研究进展[J]. 陈茂义,胡婕,陈婷,胡静荣,姚永祥.  公共卫生与预防医学. 2013(03)
[10]MALDI-TOF-MS在病原微生物鉴定中的研究进展[J]. 陈信忠,龚艳清,郭书林.  生物技术通报. 2012(06)

硕士论文
[1]凡纳滨对虾急性肝胰腺坏死病防治中草药的筛选[D]. 姜燕.大连海洋大学 2016



本文编号：3659355