低氧胁迫对鲢线粒体ATP酶活性及β、γ、δ亚基表达的影响

发布时间：2023-02-26 20:27

　　线粒体ATP酶是机体生命活动中供能的关键酶,它有F1和F0两部分组成,在结合状态下具有合成ATP的活性,而在分离状态下具有水解ATP的活性,ATP的水解能够驱动F1的转动,跨膜的质子流能促进F0的转动,因此ATP酶通过F1和Fo两部分的有序配合,从而合成维持机体正常生命活动所需的能量供给。 鲢(Hypophthalmichthys molitrix),俗称白鲢、跳鲢、水鲢、鲢子,隶属于鲤形目(Cypriniformes),鲤科(Cyprinidae),是我国著名的四大家鱼之一,已成为我国主要养殖的淡水鱼类之一。鲢由于性情活泼,喜跳跃,耐低氧能力较差,环境剧烈变化时易发生大水面积的浮头泛塘现象,因而选育耐低氧鲢品种(系)已经成为鲢新品种选育的重要研究课题之一。低氧状态下,由于供氧不足,线粒体中的氧化磷酸化反应受阻,不能及时有效的合成ATP,造成能量代谢受阻,无法满足鱼体对ATP正常的生理需求,鱼类游动缓慢,当缺氧严重时,会导致鱼类的死亡。 本文旨在通过RACE技术对鲢线粒体ATP酶F1部分p、γ、6亚基基因的克隆,采用SYBR-green Ⅰ荧光定量PCR技术对其在低氧胁迫过程中鲢各组织...

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

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目录
摘要
Abstract
第一章 前言
    1 鲢的生物学特征和研究现状
    2 鱼类低氧胁迫的研究进展
    3 线粒体ATP酶
        3.1 线粒体ATP酶结构
        3.2 外界环境应激对线粒体ATP酶的影响
        3.3 线粒体ATP酶F₁各亚基的研究现状
    4. 技术路线
    5. 本研究的目的和意义
第二章 鲢线粒体ATP酶活性分析
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
    2 实验结果与分析
        2.1 ATP合酶活性的测定标准曲线
        2.2 低氧胁迫过程中鲢线粒体ATP酶在各组织中的活性
    3 讨论
第三章 鲢线粒体ATPβ基因的克隆及表达
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
    2 结果与分析
        2.1 鲢线粒体F₁-β基因全长cDNA的获得
        2.2 鲢线粒体ATP酶β亚基基因cDNA序列分析
        2.3 鲢线粒体ATP酶β亚基氨基酸序列同源性分析
        2.4 鲢线粒体ATP酶β亚基的生物信息学分析
        2.5 鲢F₁-βmRNA表达的特异性及低氧胁迫过程中的表达变化
    3 讨论
第四章 鲢线粒体F₁-ATPγ基因的克隆、表达
    1 材料与方法
    2 结果与分析
        2.1 鲢线粒体ATP酶γ亚基基因cDNA全长的克隆
        2.2 鲢线粒体ATP酶γ亚基基因cDNA序列分析
        2.3 鲢线粒体ATP酶γ亚基的生物信息学分析
        2.4 鲢线粒体ATP酶γ亚基氨基酸序列同源性分析
        2.5 鲢线粒体ATP酶γ基因表达特征分析
    3 讨论
第五章 鲢线粒体F₁-ATP δ基因的克隆与表达
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 试验方法
    2 结果与分析
        2.1 鲢F₁-δ基因全长cDNA全长的获得
        2.2 鲢线粒体F₁-δ基因cDNA序列分析
        2.3 氨基酸序列比对及系统进化树分析
        2.4 鲢F₁-δ蛋白质的理化性质、结构域及信号肽分析
        2.5 鲢F₁-δmRNA表达的组织特异性及低氧胁迫过程中的表达变化
    3 讨论
参考文献
致谢
硕士期间发表的主要论文



本文编号：3750839